Промышленная вытяжка улитка: конструкция, принцип работы
На чтение 6 мин Просмотров 432 Опубликовано Обновлено
Одним из важнейших элементов производственного процесса является обеспечение комфортных условий труда. Состояние и состав воздушных масс в любой отрасли промышленности часто требует корректировки из-за пыли, выделения паров и газов, чрезмерной влажности, повышенной температуры или токсичных примесей. В зависимости от особенностей технологического процесса эти факторы влияют не только на здоровье работников, но и на герметичность оборудования.
Приемлемый температурный режим, комфортная влажность и удаление загрязненных примесями отработанных воздушных масс обеспечиваются системой вытяжной вентиляции. Не стоит ее путать с приточной, которая призвана нагнетать свежий воздух в помещения, хотя обе они осуществляют свои функции при помощи специальной техники – вентиляторов или эжекторов.
Широкое применение в промышленности получила вытяжная система с использованием радиальных или центробежных вентиляторов.
Вытяжные системы с использованием радиальных вентиляторов
Эффективные и простые устройства пользуются заслуженной популярностью и в бытовых условиях. Вытяжка улитка, как по-другому называют такие вентиляторы, быстро справляется с устранением запахов, излишней влажностью, снижением температуры на кухне, в ванной комнате, в гараже, подвальных помещениях или в погребах. Такие системы используются, например, в котельных или многоквартирных домах.
На рисунке показана схема, обеспечивающая вытяжку воздушных масс при помощи радиального вентилятора.
Простейшая схема работы вытяжной системы: 1 – отверстия воздухоприемника; 2 – воздуховоды; 3 – вентилятор; 4 – циклон с фильтрами для очистки воздушных масс, перед выбросом в атмосферу; 5 – стена; 6 – вытяжка. Стрелками указано направление движения воздуха.Конструкция
Устройство радиального вентилятораПростота сборки и доступность конструкционных элементов стали причиной того, что радиальные вентиляторы собираются не только в заводских условиях, но и в домашних.
Ведь промышленная сборка, хотя и имеет гарантию качества, не всегда доступна по ценовому диапазону и в необходимой конфигурации для небольших жилых или подсобных помещений.
Конструкция стандартного центробежного вентилятора предусматривает обязательное наличие:
- Всасывающего патрубка, в который поступают отработанные газо-воздушные массы.
- Рабочего (турбинного) колеса, оснащенного радиальными лопастями. В зависимости от предназначения они могут быть загнуты вперед или назад от угла вращения. В последнем варианте бонусом будет экономия расходуемой электроэнергии до 20%. Они обеспечивают ускорение, а также задают направление движению воздуха.
- Спиральной коллекторной трубы или спирального кожуха, из-за которого конструкция и получила название улитки. Она призвана снизить скорость движения прогоняемого через устройство воздуха.
- Вытяжного канала. Из-за разной скорости, с которой воздушные массы двигаются во всасывающем патрубке и в спиральном кожухе, здесь создается достаточно сильное давление, которое может доходить до 30кПа в промышленных условиях.
- Электродвигателя.
Размеры улитки, мощность двигателя, угол вращения и форма лопастей и другие особенности зависят от сферы и конкретных условий применения.
Принцип действия
Эффективность вытяжных систем с применением улиток основана на их простом принципе действия.
В процессе работы электродвигатель запускает вращение рабочего колеса.
Турбинное колесо с радиальными лопатками, благодаря центростремительному движению, засасывают через патрубок и придают газо-воздушным массам ускорение.
Их движению передается вращательный характер центробежного усилия лопаток. Это обеспечивает разный вектор входящему и выходящему потокам.
Вследствие этого выходящий поток направляется в спиральный кожух. Конфигурация спирали обеспечивает торможение и последующую подачу потока под давлением в вытяжной канал.
Из вытяжного канала газо-воздушные массы выводятся в воздуховоды для дальнейшей очистки и выброса в атмосферу.
Если в воздуховодах предусмотрены перекрывающие клапаны, то радиальный вентилятор может работать как вакуумный насос.
Виды
Масштабы помещений, а также уровень загрязнения и нагрева воздуха в них требуют установки вытяжных систем соответствующего размера, мощности и конфигурации. Поэтому и центробежные вентиляторы бывают различных видов.
В зависимости от уровня давления, создаваемого воздушными массами в вытяжном канале, они классифицируются на вентиляторы:
- Низкого давления – до 1кПа. Чаще всего их конструкция предусматривает широкие листовые лопатки, которые загнуты вперед к всасывающему патрубку, с максимальной скоростью вращения до 50м/с. Сфера их применения – преимущественно вентиляционные системы. Они создают меньший уровень шума, вследствие этого их можно использовать в помещениях, где постоянно находятся люди.
- Среднего давления. При этом уровень нагрузки, создаваемой движением воздушных масс в вытяжном канале, может находиться в диапазоне от 1 до 3 кПа. Их лопасти могут иметь разный угол и направление наклона (как вперед, так и назад), выдерживают максимальную скорость до 80м/с. Сфера применения шире, чем у вентиляторов низкого давления: они также могут устанавливаться на технологических установках.
- Высокого давления. Такая техника применяется преимущественно для технологических установок. Полное давление в вытяжном канале составляет от 3кПа. Мощность установки создает окружную скорость всасываемых масс более 80 м/с. Турбинные колеса оснащаются исключительно лопастями загнутыми назад.
Сфера применения шире, чем у вентиляторов низкого давления: они также могут устанавливаться на технологических установках.Давление является не единственным признаком, по которому различают радиальные вентиляторы. В зависимости от скорости воздушных масс, которая обеспечивается рабочим колесом, они делятся на два класса:
- I класс – говорит о том, что фронтально загнутые лопасти обеспечивают скорость менее 30 м/с, а обратно загнутые – не более 50 м/с;
- II класс включает более мощные установки: они обеспечивают скорость прогоняемым воздушным массам выше, чем вентиляторы I класса.
Кроме того, устройства производятся с разным направлением вращения относительно всасывающего патрубка:
- ориентированные направо можно устанавливать с поворотом корпуса по ходу часовой стрелки;
- налево – против хода часовой стрелки.
Сфера применения улиток во многом зависит от электродвигателя: его мощности и способа крепления к рабочему колесу:
- оно может набирать обороты непосредственно на валу двигателя;
- его вал соединяется с двигателем при помощи муфты и фиксируется одним или двумя подшипниками;
- при помощи клиноременной передачи, при условии его фиксации одним или двумя подшипниками.
Ограничения в использовании
Радиальные вентиляторы целесообразно устанавливать для перемещения больших объемов газо-воздушных масс при условии, что они не содержат:
- взрывчатых веществ;
- волокнистых материалов и липких взвесей в количестве более 10 мг/м3;
- взрывоопасной пыли.
Важным условием эксплуатации является температурный режим окружающей среды: он не должен выходить за рамки от -40 0С до +45 0С. Кроме того, в составе проходящих газо-воздушных масс не должны присутствовать коррозионные агенты, способствующие ускоренному разрушению проточной части вентилятора.
Безусловно, для использования в некоторых отраслях промышленности, производятся вентиляторы с большой степенью коррозионной устойчивости, защитой от искр и перепадов температуры с корпусами и внутренними комплектующими из сплавов повышенной прочности.
Вентиляторы для вытяжки промышленные улитка
Торговый дом «Комтех» осуществляет поставку всего спектра промышленного тепловентиляционного оборудования.
В ассортименте более 1000 наименований: осевые и радиальные вентиляторы, тягодутьевые машины, крышные вентиляторы, водяные, паровые и электрические калориферы, воздушно-отопительные агрегаты, тепловые завесы и комплектующие к ним.
Вся продукция находится в наличии на нашем складе и может быть доставлена в любой регион России в кратчайшие сроки.
Мы гарантируем высокое качество наших изделий, подтвержденное сертификатами соответствия, и выгодные цены, как для оптовых, так и для розничных покупателей. Возможна отсрочка платежа!
Для получения консультации специалиста звоните по телефону +7 (343) 213-08-50
Вентиляционное оборудование:
Теплообменное оборудование:
Вам требуется поставка надежного теплообменного или вентиляционного промышленного оборудования? Ищете выгодные условия? Хотите получить заказ точно в срок?
Тогда звоните по телефону +7 (343) 213-08-50. Будем рады помочь Вам!
Наши преимущества
- Наличие более 1000 видов вентиляционного и теплового оборудования на складе Екатеринбурга.
- Выгодные цены, сравнимые с ценами конкурентов.
- Доставка по всем регионам Российской Федерации.
- Рассмотрение заявок в короткие сроки и своевременная доставка заказа.
- Дополнительные скидки на покупки оптом, в зависимости от объема товара, и отсрочку платежа.
- Качество товара гарантировано, предоставляется вся необходимая документация.
Товар в наличии на складе | Высокое качество | Оперативная доставка | Скидки оптовикам |
Схема работы
| Вы отправляете заявку | |
| Мы выставляем Вам счет | |
| Вы оплачиваете покупку удобным для Вас способом | |
| Получаете свой товар |
≡ Центробежный вентилятор радиальный | Вентиляторы Улитка
Инженерная система вентиляции крупных производственных объектов и коммерческих учреждений требует особого подхода к организации и реализации. Промышленная вентиляция отличается от бытовой, высокими требованиями к производительности и надежности вентиляционного оборудования, а также грамотной прокладке инженерной сети.
Прежде всего это связано с тем, что основными особенностями данного типа сооружений, выступают обширные площади, высокая загруженность людьми и, в подавляющем числе случаев, рабочий процесс сопровождается выделением в атмосферу здания разного рода вредоносных элементов, газо-воздушных и химических веществ. Именно по этим причинам, необходимость снабжения помещений промышленного типа эффективным воздухообменом стоит весьма остро. Это, не говоря уже о том, что климатические и атмосферные показатели внутри таких объектов строго должны отвечать требованиям на законодательном уровне. Самым действенным решением проблемы снабжения принудительной промышленной вентиляцией является мощное вентиляционное оборудование — центробежный вентилятор радиальный (улитка).
Интернет-магазин вентиляции ОВК Комплект предлагает к ознакомлению самые современные и высокоэффективные промышленные вытяжки улитки — специально разработанные центробежные радиальные вентиляторы в спиральном корпусе усиленной мощности и повышенной надежности под вентиляцию производственных объектов.
Данные вентиляционные устройства пользуются высокой популярностью среди пользователей и чаще всего применяются в вентиляционных системах: завода, цеха, фабрики, склада, ангара, ресторана, торгового центра и подобных крупных сооружений. Хотя и использование центробежных вытяжных вентиляторов улиток не ограничивается сугубо перечисленными и вполне могут обеспечить прекрасный воздухообмен в пределах помещений бытового характера: многоэтажных домов, офисов и тд.
Если вам срочно необходимо организовать на крупных закрытых участках современную систему вентиляции, которая может демонстрировать потрясающие результаты по притоку и вытяжке объемных потоков воздуха, то вам не найти оборудование лучше, чем радиальный центробежный вентилятор улитка — купить по выгодной цене, которую вы можете прямо на сайте интернет-магазина ОВК Комплект за несколько минут.
Основные особенности конструкции и применение центробежной вытяжки улитки
В основе конструктивных элементов радиальных центробежных вентиляторов лежат несколько основных элементов: вращающийся ротор, состоящий из особых спиральных лопастей; асинхронный электродвигатель 2-ух, 4-ох, 6-ти или 8-ми полюсного исполнения; цельнометаллический спиральный корпус, с возможности ручного регулирования угла (до 45о) под которым будет производится монтаж к воздуховоду.
Генерация воздушного потока осуществляется под воздействием центробежной силы, которая возникает при нагнетании вращения ротора, в который, в свою очередь, засасывается воздух и за счет специальных лопаток перемещается под прямым углом к выходному отверстию спирального кожуха.
Центробежная вытяжка улитка конструктивно может иметь разное исполнение формы лопастей рабочего колеса, что диктует направление движения воздушных потоков, а также придает работе всего радиального вентилятора ряд дополнительных свойств. При варианте загиба лопаток назад вентиляционная система обретает способность экономить до 20% электроэнергии и лучше переносить перегрузки по расходу воздуха. В случае применения вперед загнутых лопастей снижается общий диаметр рабочего колеса, что существенно снижает размеры всего центробежного вентилятора и в результате демонстрирует более низкую частоту вращения, которая сводит возникновение шума до минимального показателя.
Касательно количественного исполнения лопаток рабочего колеса — оно может быть различным.
Данный параметр на пару с производительными возможностями двигателя, прямым образом влияет на мощность, скорость и размеры, которыми обладает центробежный вентилятор радиальный.
Прежде чем купить вытяжку улитку, обязательно убедитесь локально где и в каким условиях преимущественно будет использоваться данный промышленный вентилятор. Существует довольно широкая разновидность исполнения конструкции по габаритным размерам, диаметр основного корпуса в среднем может варьироваться от 25 до 150 см. Ориентация роторной части может быть выполнена как на левую сторону, так и на правую. Но чем больше всего отличается один центробежный вентилятор улитка от другого — это объем рабочего давления. Выбор модели по данному параметру диктуют степень загрязненности атмосферы в целевой области применения. Обратите особое внимание именно на этот нюанс, ибо недостаточный уровень давления, чреват неспособностью вытяжки улитки справляться с ожиданиями пользователя, а излишний повлечет за собой неоправданные траты денежных средств на центробежный вентилятор — цена которого будет на порядок выше, чем необходимо.
Диапазон условий давления:
- Центробежный вентилятор низкого давления (до 100 кг/м2) — весьма компактных размеров, применим для вентиляции промышленных и бытовых объектов, с минимальной вместительностью в воздухе вредоносных инородных тел и опасных элементов;
- Центробежный вентилятор среднего давления (от 100 до 300 кг/м2) — специализирован под более тяжелые условия эксплуатации на производственных объектах и предусматривает дополнительную термозащиту;
- Центробежный вентилятор высокого давления (от 300 до 1200 кг/м2) — максимально укомплектован под условия тяжелых промышленных и химических процессов;
Самым высоким уровнем безопасности обладает, так называемый, «радиальный вентилятор с повышенной защитой». Такая модель промышленной вытяжки улитки состоит из прочных алюминиевых сплавов, обладающих повышенной огнеупорностью, антикоррозийным покрытием и оснащена специальным взрывозащищенным электродвигателем.
Такое вентиляционное оборудование предусматривает наличие реализации всех необходимых мер во избежание образования искр, так как основной задачей приспособления является циркуляция воздуха с высоким процентом примесей газообразных, взрывоопасных, химических и подобных веществ.
Где возможно радиальный центробежный вентилятор купить без лишних трат и потерь качества?
Интернет-магазин промышленной вентиляции ОВК Комплект — один из крупнейших поставщиков вентиляционного оборудования для производственных помещений в Украине. Ассортимент данной торговой площадки составляют исключительно качественные товары производства мировых и отечественных брендов. Наши ключевые инструменты конкуренции, которые уже не первый год выгодно выделяют компанию на фоне остальных — это образцовый уровень сервиса, исчерпывающая техническая информационная база, гарантия качества и выгодные цены. Центробежные радиальные вентиляторы улитки, купленные в пределах сайта компании ОВК Комплект, по сей день, обеспечивают своей безупречной работой уже не одну сотню промышленных объектов эффективной вентиляцией без единого возврата или нареканий от пользователей.
На цифровых торговых прилавках нашего интернет-магазина представлена официальная продукция ведущих компаний индустрии промышленной вентиляции и инженерных систем. В наличии Центробежные вентиляторы ВЕНТС, Bahcivan, Soler&Palau, Turbovent, Systemair, Rosenberg самых разнообразных моделей и технических характеристик. Если вам требуется лучшая промышленная вытяжка улитка — купить ее, выбрав среди перечисленных выше торговых марок, будет самым мудрым решением.
Если у вас возникли проблемы с подбором нужного оборудования, срочно обращайтесь в консультационный центр ОВК Комплект! Штат сотрудников состоит исключительно из профессионалов областей строительства и инженерного оборудования и каждый из них, с радостью, поможет удовлетворить все пожелания вентиляционной системы, индивидуально под каждого отдельного клиента. Будьте уверены, вам на все 100% помогут купить радиальный вентилятор, идеально подходящий под любые архитектурные и технические характеристики помещения.
Интернет-магазин ОВК Комплект осуществляет доставку любого заказанного товара во все города Украины: Киев, Харьков, Львов, Днепропетровск, Одесса и все остальные населенные пункты в пределах страны. Где бы вы не находились, купить центробежный вентилятор улитку, возможно не покидая дислокации оформления заказа!
Вентилятор улитка — промышленная вытяжка
Вентилятор улитка — эффективное и часто применимое на практике оборудование. Благодаря большому выбору типоразмеров и видов устройств, купить вентилятор улитку можно для промышленных и бытовых целей.
Вентиляторы улитки для вытяжки имеют некоторые технические преимущества перед другими вентиляторами, что видно при более подробном рассмотрении особенностей.
Конструкция
Корпус имеет форму спирали. Вентилятор улитка промышленный или бытовой как правило радиального типа. Это характеризует способ образования и направления воздушного потока: от центра к краям вдоль рабочего колеса за счет действия центробежной силы.
Для увеличения эффективности направления потока и увеличения мощности на колесе могут быть лопасти разной формы. Размер, корпус, а также особенности лопастей зависят от назначения устройства. И цена на вентилятор улитку формируется на основе этих параметров.
Как работает вытяжной промышленный вентилятор улитка:
· Через входное отверстие в ротор всасывается воздух.
· Движением радиального колеса воздух получает направление и необходимую силу для движения.
· Далее воздух под давлением попадает в спиралевидный кожух.
· По спирали отработанный воздух попадает в вытяжной канал.
Благодаря универсальной конструкции и системе работы, улитку вытяжку устанавливают, как в промышленной, так и в бытовой сфере.
Типы по назначению
· Общего применения (обычные жилые или производственные помещения, где нет загрязнений, а также специфических условий).
· Взрывозащищенные (предотвращают появление искры).
· Жаростойкие (в зданиях с повышенными температурами).
· Антикоррозийные (для работы в химической среде).
· Пылевые (для работы с взвешенными частицами, есть система противостоящая забиванию механизма отходами).
· Дымоотводы (выдерживают высокие температуры во время пожара).
Особенности использования
Установка отлично справляется с большими объемами воздушных масс. Но вытяжка общего назначения не выдерживает наличия взрывчатых элементов, пыли, волокнистых примесей, коррозийных агентов. Для этого нужны вентиляторы специального назначения.
Вытяжки промышленные Улитка, Центробежные вентиляторы ВЕНТС ВЦУ
Условное обозначение
Условное обозначение
| Серия | Исполнение мотора | Диаметр рабочего колеса, мм | Ширина рабочего колеса, мм | |
| ВЕНТС ВЦУ | Кол-во полюсов | Фазность | 140; 160; 180; 200; 225; 250 | 60; 62; 80; 90; 92; 102; 140 |
| 2 4 |
Е: однофазный | |||
Принадлежности
Принадлежности
| Изделие | Виброизоляторы резиновые | Фланец | Решетка |
| ВЦУ 2Е 140х60 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 140 | РВЦ-ВЦУ 140 |
| ВЦУ 2Е 160х62 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 160 | РВЦ-ВЦУ 160 |
| ВЦУ 2Е 160х90 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 160 | РВЦ-ВЦУ 160 |
| ВЦУ 4Е 180х92 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 180 | РВЦ-ВЦУ 180 |
| ВЦУ 4Е 200х80 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 200 | РВЦ-ВЦУ 200 |
| ВЦУ 4Е 200х102 | ВВЦр 8 | ФВЦ-ВЦУ 200 | РВЦ-ВЦУ 200 |
| ВЦУ 4E 225х102 | ВВЦр 16 | ФВЦ-ВЦУ 200/ ФВЦ-ВЦУ 225 | РВЦ-ВЦУ 200/ РВЦ-ВЦУ 225 |
| ВЦУ 4Е 250х102 | ВВЦр 16 | ФВЦ-ВЦУ 250 | РВЦ-ВЦУ 250 |
| ВЦУ 4Е 250х140 | ВВЦр 16 | ФВЦ-ВЦУ 250 | РВЦ-ВЦУ 250 |
|
|
|
Вентиляторы 220. Улитка 220 наличие, Радиальные вентиляторы 220, Вентилятор 220 Вольт. Вытяжка улитка 220 вольт. Вентилятор радиальный 220 В
Вентилятор 220
Улитка 220
Вентилятор 220 Вольт
Вытяжка улитка 220 вольт
Вентилятор радиальный 220 В
Вентилятор 220 Вольт
Улитка 220 В
компактные радиальные вентиляторы
малогабаритные радиальные вентиляторы
Улитка 220 цена
Улитка 220 наличие
Центробежный вентилятор 220 в наличии
Радиальный вентилятор 220 вольт наличие
вентиляторы 220 в
малогабаритные вентиляторы 220 наличие
Вентилятор 220 цена
Вентилятор 220 в наличие
Центробежные вентиляторы
Вентилятор 1 фазный
Вентилятор улитка
Вентилятор 220 Вольт купить
Вентилятор радиальный 220 В наличие
вентиляторы малогабаритные
малогабаритные вентиляторы купить
малогабаритные вентиляторы цена
малогабаритные вентиляторы 220
малогабаритные вентиляторы 220 вольт
компактные радиальные вентиляторы
вентиляторы 220
радиальные вентиляторы 220 В
улитки 220 В
улитка 220 вольт
220 улитка
Вентилятор улитка 220 вольт
Радиальные вентиляторы 220
Вентилятор улитка 220 купить
Купить радиальный вентилятор улитка 220 в
Вентилятор вытяжной улитка
Вытяжка улитка
Вытяжка улитка цена
Однофазные вентиляторы радиальные
Параметры вентиляторов улитка
характеристики вентилятора улитка
Вентилятор улитка 220 наличие
Вентилятор VS 220 в стальном корпусе, колесо оцинкованная сталь с вперед загнутыми лопатками, Т -40…+60 С, внутренний двигатель IP44, круглый/прямоугольный (вход/выход) фланец для крепления воздуховода или поверхности
| Модель вентилятора | Элек. параметры, В/кВт | Частота вращения об./мин | D соед, мм | Расход воздуха м³/ч | Давление max, Па | Прайс-лист, цена с НДС, руб |
| Вентилятор VS 32-220 | 220/0,85 | 1360 | 300 | 3200 | 580 | уточнить |
| Вентилятор VS 23-220 | 220/0,58 | 1360 | 250 | 2300 | 440 | уточнить |
| Вентилятор VS 15-220 | 220/0,33 | 1360 | 200 | 1500 | 325 | уточнить |
| Вентилятор VS 9-220 | 220/0,18 | 2600 | 150 | 900 | 375 | уточнить |
| Вентилятор VS 7-220 | 220 | 2600 | 130 | 700 | 260 | уточнить |
Вентиляторы улитка 220В габаритные и присоединительные размеры: вентилятор VS-32 220 вольт, вентилятор VS 23 220, вентилятор улитка VS-15 220, вентилятор VS 9-220, вентилятор VS 7 220
Вентиляторы улитка 220 вольт параметры VS 32-7 и характеристики: Вентиляторы VS 32-7 улитка 220В характеристики и параметры скачать
Прайс-лист вентиляторы улитка 220, скачать: Вентилятор 220 Вольт, Цена улитка 220 В
Вентиляторы пылевые улитка ВРП 115-45 для вытяжки и удаления опилок в Санкт-Петербурге цена 15900 руб.
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45
Положение корпуса вентиляторов ВРП 115-45, исполнение 1
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45, исполнение 1
| № вентилятора | Размеры, мм | ||||||||
| Пр 135˚, Л135˚ | Пр 270˚, Л270˚ | Пр 315˚, Л315˚ | |||||||
| B | b | H | B | b | H | B | b | H | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №2,5 | 535 | 210 | 241 | 409 | 225 | 194 | 535 | 210 | 179 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №3,15 | 663 | 263 | 302 | 506 | 282 | 243 | 663 | 263 | 224 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №4 | 840 | 332 | 382 | 641 | 357 | 307 | 840 | 332 | 282 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 896 | 350 | 386 | 700 | 367 | 330 | 896 | 350 | 310 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 1106 | 441 | 488 | 866 | 465 | 418 | 1106 | 441 | 393 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 1388 | 557 | 615 | 1090 | 590 | 530 | 1388 | 557 | 500 |
| № вентилятора | Размеры, мм | ||||||||
| Пр 0˚, 0˚ | Пр 45˚, Л45˚ | Пр 90˚, Л90˚ | |||||||
| B | b | H | B | b | H | B | b | H | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №2,5 | 471 | 194 | 183 | 420 | 179 | 325 | 409 | 225 | 277 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №3,15 | 585 | 243 | 224 | 525 | 224 | 400 | 506 | 282 | 342 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №4 | 741 | 307 | 284 | 664 | 282 | 508 | 641 | 357 | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 770 | 330 | 333 | 696 | 310 | 546 | 700 | 367 | 440 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 957 | 418 | 401 | 881 | 393 | 665 | 866 | 465 | 539 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 1205 | 530 | 500 | 1115 | 500 | 831 | 1090 | 590 | 675 |
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №2,5, №3,15, №4, исполнение 1
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №2,5, №3,15, №4, исполнение 1
| № вентилятора | Размеры, мм | |||||||||
| D | D1 | C | E | b | h | Lмах | L1 | L2 | L3 | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №2,5 | 140 | 170 | 175 | 150 | 162,5 | 300 | 465 | 109 | 24 | 80 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №3,15 | 215 | 245 | 223 | 189 | 205 | 395 | 550 | 133 | 56 | 80 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №4 | 264 | 294 | 280 | 240 | 260 | 520 | 700 | 168 | 93 | 10 |
| № вентилятора | Размеры, мм | n1 | n2 | |||||||
| L4 | L5 | t1 | t2 | T1 | T2 | T3 | T4 | |||
| Вентилятор ВРП 115-45 №2,5 | 280 | 220 | 65 | 65 | 130 | 130 | 209 | 186 | 2 | 2 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №3,15 | 350 | 265 | 84 | 75 | 84 | 75 | 254 | 221 | 1 | 1 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №4 | 460 | 320 | 110 | 95 | 110 | 95 | 320 | 285 | 1 | 1 |
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №5, №6,3, №8, исполнение 1
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №5, №6,3, №8, исполнение 1
| № вентилятора | Размеры, мм | |||||||
| D | D1 | C | d | b | h | L | L1 | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 350 | 390 | 300 | 12 | 250 | 550 | 850 | 250 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 440 | 500 | 378 | 12 | 315 | 670 | 1070 | 303 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 560 | 610 | 480 | 13 | 401 | 845 | 1350 | 388 |
| № вентилятора | Размеры, мм | N | N2 | n | ||||
| L2 | L3 | L4 | T | T2 | ||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 182 | 644 | 410 | 200 | 342 | 8 | 12 | 2 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 219 | 810 | 502 | 300 | 418 | 8 | 16 | 3 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 287 | 1078 | 690 | 400 | 520 | 12 | 20 | 4 |
Положение корпуса вентиляторов ВРП 115-45 исполнение 5
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №5, №6,3, №8 исполнение 5
| № вентилятора | Размеры, мм | ||||||||
| Пр 135˚, Л135˚ | Пр 270˚, Л270˚ | Пр 315˚, Л315˚ | |||||||
| B | b | H | B | b | H | B | b | H | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 1168 | 350 | 386 | 1148 | 333 | 330 | 1362 | 546 | 310 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 1480 | 441 | 488 | 1440 | 401 | 418 | 1704 | 665 | 393 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 1802 | 557 | 615 | 1745 | 500 | 530 | 2076 | 831 | 500 |
| № вентилятора | Размеры, мм | ||||||||
| Пр 0˚, 0˚ | Пр 45˚, Л45˚ | Пр 90˚, Л90˚ | |||||||
| B | b | H | B | b | H | B | b | H | |
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | 1255 | 440 | 333 | 1200 | 386 | 546 | 1182 | 367 | 440 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | 1579 | 539 | 401 | 1527 | 488 | 665 | 1504 | 465 | 539 |
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | 1920 | 675 | 500 | 1860 | 615 | 831 | 1830 | 590 | 675 |
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №5, №6,3, №8, исполнение 5
Габаритные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №5, №6,3, №8, исполнение 5
| № вентилятора | Размеры, мм | ||||||||||
| D | D1 | C | d | b | h | L | L1 | L2 | L3 | ||
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | вар-1 | 350 | 390 | 300 | 12 | 250 | 550 | 902 | 250 | 980/2 | 980/2 |
| вар-2 | 847 | ||||||||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | вар-1 | 440 | 500 | 378 | 12 | 315 | 670 | 1050 | 303 | 635 | 635 |
| вар-2 | 1047 | ||||||||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | вар-1 | 560 | 610 | 480 | 13 | 401 | 845 | 1480 | 388 | 785 | 785 |
| вар-2 | 1420 | ||||||||||
| № вентилятора | Размеры, мм | N1 | N2 | N3 | n | ||||||
| L4 | L5 | L6 | L7 | T | T2 | ||||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №5 | вар-1 | 410 | 170 | 726 | 526 | 200 | 336 | 8 | 12 | 5 | 2 |
| вар-2 | 671 | ||||||||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №6,3 | вар-1 | 502 | 219 | 842 | 584 | 300 | 418 | 8 | 16 | 6 | 3 |
| вар-2 | 842 | ||||||||||
| Вентилятор ВРП 115-45 №8 | вар-1 | 690 | 287 | 1165 | 803 | 400 | 520 | 12 | 20 | 6 | 4 |
| вар-2 | 1100 | 792 | |||||||||
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №10, исполнение 1
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №12, исполнение 1
Габаритные и присоединительные размеры вентиляторов ВРП 115-45 №10, исполнение 5
Обследование водотоков бассейна реки Колумбия в поисках гигантской улитки Fluminicola columbiana и моллюска реки Большой Колумбия Fisherola nuttalli (Технический отчет)
Neitzel, D. A., Frest, T. J., и Вашингтонский университет, Сиэтл, Вашингтон. Исследование водотоков бассейна реки Колумбия на предмет обнаружения гигантской улитки шпиля реки Колумбия Fluminicola columbiana и моллюска реки Большой Колумбия Fisherola nuttalli . США: Н. П., 1989.Интернет. DOI: 10,2172 / 5473804.
Neitzel, D. A., Frest, T. J., и Вашингтонский университет, Сиэтл, Вашингтон. Исследование водотоков бассейна реки Колумбия на предмет обнаружения гигантской улитки шпиля реки Колумбия Fluminicola columbiana и моллюска реки Большой Колумбия Fisherola nuttalli . Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/5473804
Нейтцель, Д.А., Фрест Т. Дж. И Вашингтонский университет, Сиэтл, Вашингтон. Солнце .
"Обследование водотоков бассейна реки Колумбия на предмет обнаружения гигантской улитки шпиля реки Колумбия Fluminicola columbiana и блюдца реки Большой Колумбия Fisherola nuttalli". Соединенные Штаты. https://doi.org/10.2172/5473804. https://www.osti.gov/servlets/purl/5473804.
@article {osti_5473804,
title = {Исследование водотоков в бассейне реки Колумбия для гигантской улитки Fluminicola columbia с шпилем реки Колумбия и моллюска Fisherola nuttalli},
author = {Neitzel, D.А. и Фрест, Т. Дж. И Вашингтонский университет, Сиэтл, Вашингтон},
abstractNote = {Опросы подтвердили выживание как гигантской улитки Fluminicola columbiana, обитающей на реке Колумбия, так и большой моллюски Fisherola nuttalli, обитающей на реке Колумбия, в Хэнфорд-рич на реке Колумбия, штат Вашингтон, а также в других местах в Вашингтоне, Орегоне и Айдахо . Обзор исторических коллекционных записей предполагает, что оба вида существуют и в других местах бассейна реки Колумбия. В настоящее время недостаточно информации для проведения адекватной оценки любого вида с точки зрения возможного включения в федеральный или штатный перечень видов, находящихся под угрозой исчезновения или находящихся под угрозой исчезновения.Результаты наших исследований позволяют предположить, что существуют дополнительные неоткрытые популяции обоих видов. Существует относительно высокая вероятность того, что нетронутая среда обитания, необходимая для шпилевых улиток и блюдец, останется в 37 ручьях или участках ручьев в Вашингтоне, Орегоне, Айдахо и Монтане (Британская Колумбия рассматривалась вне рамок проекта). Для тщательного исследования потребуется посещение более 600 сайтов. 20 исх., 5 рис., 7 таб.},
doi = {10.2172 / 5473804},
url = {https: // www.osti.gov/biblio/5473804},
журнал = {},
номер =,
объем =,
place = {United States},
год = {1989},
месяц = {10}
}
Характеристика репродуктивных генов и пептидов наземной улитки-вредителя, Theba pisana
PLoS One. 2016; 11 (10): e0162355.
Майкл Дж. Стюарт
1 Исследовательский центр генетики, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
Тианфанг Ван
1 Исследовательский центр генетики, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
Брэдли И.Хардинг
1 Исследовательский центр генетики, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
U. Bose
1 Центр генетических исследований, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
Рассел К. Уайет
2 Университет Святого Франциска Ксавьера, Антигониш, Новая Шотландия, 5000, Канада
Кеннет Б.Этаж
3 Институт биохимии и факультет биологии Карлтонского университета, 1125 Полковник Бай Драйв, Оттава, Онтарио, K1S 5B6, Канада
Скотт Ф. Камминс
1 Центр генетических исследований, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
Цзян Цзин, редактор
1 Исследовательский центр генетики, факультет науки, здравоохранения, образования и инженерии, Университет Саншайн-Кост, Маручидор, округ Колумбия, Квинсленд, 4558, Австралия
2 Санкт-ПетербургУниверситет Фрэнсиса Ксавьера, Антигониш, Новая Шотландия, 5000, Канада
3 Институт биохимии и факультет биологии Карлтонского университета, 1125 Полковник Бай Драйв, Оттава, Онтарио, K1S 5B6, Канада
Нанкинский университет, КИТАЙ
Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.
Концептуализация: KBS SFC.
Обработка данных: MJS BIH.
Формальный анализ: MJS.
Получение финансирования: KBS SFC.
Расследование: MJS BIH UB.
Методология: MJS BIH UB TW SFC.
Администрация проекта: SFC.
Ресурсы: KBS SFC.
Программное обеспечение: TW.
Надзор: SFC.
Оценка: MJS.
Визуализация: MJS UB SFC.
Составление оригинала: MJS BIH.
Написание — просмотр и редактирование: RCW KBS SFC.
Поступила 14.04.2016; Принято, 22 августа 2016 г.
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.- Дополнительные материалы
S1 Рис. Сравнение и филогенетический анализ ГнРГ. (TIF)
GUID: 1A7056C4-1375-453F-B14B-72377DFC386E
S2 Рис. Полный гель RT-PCR, демонстрирующий тканеспецифическую экспрессию генов предшественников APGWamide, ELH и GnRH в T . писана . Представление показано в . Используемые ткани включают: бурсу (B), ЦНС (целые ганглии центральной нервной системы), дротиковый мешок (DS), мышцу стопы (F), гепатопанкреас (HP), слизистые железы (MG), овотестис (OT), половой член ( П). Tpi-actin использовали в качестве положительного контроля.(TIF)
GUID: 57A5EV5A8-A230-4202-899D-16170AF15887
S3 Рис.: Модель ELh2. (A) Потенциальная энергия ELh2 как функция времени во время MD. Сплошная линия — среднее значение за 50 пс. (B) RMSD позвоночника во время того же MD, по сравнению с конформацией с самой низкой энергией (репрезентативная структура). Последовательность ELh2: [p-] EAERDRRTWSISNALTVLTDMVVEHEQRRLAAEREALKQRLLELамид.(TIF)
GUID: B9C464EE-B7B5-4947-AE88-DAFC134F8531
S1 Таблица: праймеров, используемых для RT-PCR.(DOCX)
GUID: 4DB887B8-E2C7-40B0-9022-6AB4E6C1E722
- Заявление о доступности данных
Все соответствующие данные находятся в документе и файлах вспомогательной информации.
Abstract
Углубленное понимание молекулярных компонентов, участвующих в воспроизводстве, может помочь в понимании эволюционных приспособлений, используемых животными, включая гермафродитов, для получения потомства и сохранения продолжения их родословной.В этом исследовании мы фокусируемся на средиземноморской улитке Theba pisana , наземной улитке-гермафродите, которая стала высокоинвазивным видом вредителей в сельскохозяйственных районах по всему миру. Наш анализ Т . pisana В ткани ЦНС были обнаружены транскрипты генов, кодирующих белки, связанные с репродукцией моллюсков, включая APGWamide, гонадотропин-рилизинг-гормон (GnRH) и гормон яйцекладки (ELH). Изоформа 1 ELH (ELh2), как известно, является мощным репродуктивным пептидным гормоном, участвующим в овуляции и яйцекладке у некоторых водных моллюсков.Две другие изоформы ELH, не относящиеся к CNS, также присутствовали в T . pisana ( Tpi-ELh3 и Tpi-ELh4 ) в мешочке дротика улитки и слизистых железах. Биологическая активность синтетического ELh2 на половозрелом T . pisana был подтвержден с помощью биоанализа с улитками, демонстрирующими индуцированное ELh2 поведение к кладке яиц, включая рытье нор в почве и откладывание яиц. Таким образом, это исследование представляет подробный молекулярный анализ репродуктивных генов нейропептидов наземной улитки и обеспечивает основу для понимания функции ELH.
Введение
Размножение улиток контролируется тетранейральной центральной нервной системой (ЦНС) [1,2], которая координирует своевременное высвобождение и действие мощных нейропептидов. У моллюсков есть несколько нейропептидов, которые привлекли особый исследовательский интерес из-за их консервативной роли в репродуктивных процессах, включая Ala-Pro-Gly-Try-амид (APGWamide), гормон яйцекладки (ELH) и гонадотропин-рилизинг-гормон ( ГнРГ).
APGWamide, впервые описанный у морской улитки Куроки и др. .[3], кодируется предшественником, который обладает множественными сайтами лизин-аргининового (KR) расщепления, давая N-концевой амидированный биоактивный тетрапептид APGW. В Lymnaea stagnalis известно, что APGWamide регулирует мужские репродуктивные функции, такие как контроль выворота полового члена и ингибирование спонтанных мышечных сокращений гладкой мускулатуры в семявыносящем протоке [4,5], а также спермию в ушном ушке осла. ( Haliotis asinina ) [6].
Пептид ELH был идентифицирован как у Aplysia , так и у Lymnaea (называемого гормоном каудодорзальных клеток или CDCH, в Lymnaea ), а также у двух видов устриц и блюдца [7,8,9,10, 11,12], в то время как аналоги были описаны не только у моллюсков, например, у плодовой мухи ( Drosophila ; овулин) [13] и пиявки ( Theromyzon tessulatum ) [14].В Aplysia ELH регулирует функции женской репродуктивной системы, а именно те, которые связаны с овуляцией и откладыванием яиц [1,15]. Aplysia ELH, который высвобождается из клеток нервного мешка, стимулирует длительное возбуждение нейронов в брюшном ганглии и в то же время диффундирует в гемолимфу, чтобы действовать как эндокринный нейрогормон (Geraerts et al., 1988). Когда ELH достигает овотестиса животного, он вызывает сокращение гладкомышечных фолликулов, облегчая тем самым изгнание яичной нити (Dudek and Tobe, 1978).Кроме того, ELH подавляет пищевое поведение, воздействуя на щечные и церебральные ганглии, и вызывает движение головой, воздействуя на педальные и церебральные ганглии (Shyamala et al., 1986). Инъекция CDCH в Lymnaea стимулирует овуляцию и образование яйцеклетки [16].
Функциональные роли GnRH задокументированы для большинства типов животных (обзор Roch et al., [17]). У позвоночных GnRH вызывает высвобождение гонадотропинов, тогда как у беспозвоночных все еще продолжаются исследования для определения его точной роли в воспроизводстве или других физиологических процессах.Пептиды GnRH были идентифицированы у ряда водных видов моллюсков, и хотя их функция не была хорошо изучена, синтетический GnRH индуцирует стероидогенез и стимуляцию пролиферации сперматогониев у осьминогов ( Octopus vulgaris ), японского гребешка ( Patinopecten yessoensis ) и Тихоокеанская устрица ( Crassostrea gigas ) [17,18]. В целом, отличительной особенностью всех белков-предшественников GnRH является хорошо консервативный пептид GnRH pQHWSX 4 PGамид, который отщепляется от вариабельного N-концевого пептида, ассоциированного с GnRH [17].
Переход к наземной среде означал, что наземные улитки стали отличаться от других брюхоногих моллюсков, и это сопровождалось ключевыми изменениями в воспроизводстве, включая аспекты ухаживания и откладки яиц, чтобы приспособиться к нехватке воды (например, размещение яиц под землей) . Одним из видов, выработавших особенно эффективные приспособления для выживания в засушливых местах обитания, является средиземноморская наземная улитка Theba pisana (Müller, 1774). Способность этого вида-гермафродита выживать в течение длительного времени при небольшом количестве воды или без нее также, вероятно, привела к его успеху в качестве занесенного вредителя во многие районы, где он может размножаться с высокой скоростью, нанося значительный ущерб сельскому хозяйству [19,20].К сожалению, в настоящее время у нас есть ограниченное представление о молекулярных компонентах, участвующих в воспроизводстве улиток-гермафродитов, особенно потому, что, в отличие от большинства раздельнополых животных, их анатомия включает более сложные пути, регулирующие контроль над репродуктивным метаболизмом.
В этом исследовании мы выполнили de novo транскриптомное секвенирование T . pisana Соединительная оболочка ЦНС для поиска гена ELH. С помощью биоинформатического анализа мы также идентифицировали целевые гены, связанные с репродукцией, ELH, APGWamide и GnRH.Мы демонстрируем, что эти гены имеют значительную гомологию аминокислотных последовательностей с другими моллюсками, а также демонстрируют количественное распределение каждого в ЦНС, дротиковом мешочке и слизистых железах. Биотесты in vivo с использованием синтетического пептида ELH подтверждают, что ELH играет решающую роль в воспроизводстве наземных улиток, вызывая быстрые изменения за счет стимуляции яйцекладки.
Методы
Заявление об этике
Использование животных для данного исследования было одобрено и проводилось в соответствии с рекомендациями, установленными Комитетом по этике животных Университета Саншайн-Кост.
Животные
T . pisana были получены из Warooka, Южная Австралия (34,9900 ° ю.ш., 137,3990 ° в.д.). Животные были идентифицированы как T . pisana в соответствии с критериями, описанными в разделе «Комплексное управление улитками в посевах и пастбищах» [19]. Попав в лабораторию, улиток содержали в террариумных загонах при температуре 19 ° C, 30% влажности и 12: 12-часовом цикле свет: темнота. Их еженедельно кормили огурцом и морковью. Чтобы определить зрелость улиток, они были разделены на три группы на основе визуального осмотра их репродуктивных систем при вскрытии; ювенильный (без репродуктивной системы), незрелый (недоразвитая репродуктивная система, включая небольшие слизистые и альбуминовые железы) и зрелые (полностью развитая репродуктивная система, включая наличие дротиков, крупных слизистых и белковых желез).
Сравнение белков и аннотации
A T . pisana Библиотека RNA-seq была собрана из SRP056280, как описано в Adamson et al. (2015) [21]. Аннотации генов, соответствующие репродуктивным белкам моллюсков, были выбраны для сравнительного анализа с использованием основной рабочей среды CLC v6.9 (CLCbio) и поиска BLASTp. Соответствующие нуклеотидные последовательности транслировались с помощью инструмента ExPASy translate (http://web.expasy.org/translate/), а возвращенные последовательности белков обрабатывались с помощью SignalP (http: // www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/) [22] для определения секреции. NeuroPred (http://neuroproteomics.scs.illinois.edu/cgi-bin/neuropred.py) [23] использовался для прогнозирования сайтов расщепления, посттрансляционных модификаций и присутствия предполагаемых биоактивных пептидов. Схематические диаграммы структур белковых доменов были приготовлены с использованием программы Domain Graph (DOG, версия 2.0) [24]. Прогнозы вторичной структуры белка были сделаны с использованием PredictProtein (http://www.predictprotein.org/), а 3D-модели белков были построены с использованием Assisted Model Building with Energy Refinement (AMBER) 14 [25], в которой моделировались молекулярной динамикой. выборка производится каждую пикосекунду, всего 250 наносекунд.
Белковые последовательности из T . pisana сравнивали с предсказанными последовательностями белков APGWamide, ELH и GnRH пептида, которые были получены от NCBI и Veenstra [11]. Используя платформу MEGA 6.0 и встроенные программы ClustalW и весовую матрицу белков Гоннета [26], схемы множественного выравнивания последовательностей были сгенерированы и визуализированы с помощью пакета LaTeX TeXShade [27]. Филогенетические деревья для GNRH были построены с использованием MEGA6.0 и метода объединения соседей [28] с 1000 повторениями начальной загрузки.
Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и клонирование гена
Тотальную РНК выделяли из девяти различных T . pisana ткани (ганглии ЦНС, копулятрикс сумки, тракт бурсы, дротиковый мешок, мышца стопы, гепатопанкреас, слизистые железы, овотест и половой член), собранные как у зрелых ( n = 10), так и у неполовозрелых животных ( n = 15) с использованием методов экстракции TRIzol (Invitrogen). Общую целостность РНК анализировали с использованием 1,2% агарозного геля с окрашиванием формальдегидом и бромидом этидия.Тотальную РНК использовали в качестве матрицы для синтеза комплементарной ДНК (кДНК) с использованием набора QuantiTect (QIAgen, Лимбург, Нидерланды) в соответствии с инструкциями поставщика. ПЦР проводили на матричной кДНК с использованием REDTaq (Sigma-Aldrich, Миссури, США) в соответствии с инструкциями поставщика, включая специфичные для генов праймеры (50 пмоль каждый; таблица S1). Параметры цикла: 94 ° C в течение 1 минуты, 45 ° C в течение 2 минут и 72 ° C в течение 3 минут для 30 циклов. Продукты ПЦР разделяли в 2% агарозном геле (0,6x Трис-борная кислота EDTA, TBE; 0.2% бромистого этидия) перед визуализацией (Syngene, Кембридж, Англия). Полученные ампликоны очищали из 2% агарозных гелей с помощью набора для очистки QIAquick spin PCR (QIAgen) в соответствии с инструкциями поставщика. Затем очищенные продукты ПЦР лигировали в плазмиду pGEM-T easy (Promega, WI, США), и рекомбинантные клоны секвенировали в Австралийском исследовательском центре генома (AGRF, Брисбен).
Целая монтировка
in situ для гибридизации (WMISH)Рибозонды, меченные дигоксигенином (DIG), сконструированные против 3ˊ нетранслируемой области гена Tpi-ELh2. (идентифицированный в транскриптоме) и положительный контроль по актину были приготовлены для WMISH как описано ранее [29].Ткани ЦНС, дротикового мешка и слизистой железы собирали у взрослых улиток и фиксировали в 4% параформальдегиде в 0,01 М фосфатно-солевом буфере (Sigma; 138 мМ NaCl, 2,7 мМ KCl, pH 7,4) в течение ночи, затем хранили в 70% этаноле при 4 °. С. Затем проводили WMISH с использованием меченых DIG рибозондов с модификациями согласно [29]. Для документирования образцы были обезвожены ступенчатой заменой этанола, очищены смесью бензилбензоат: бензиловый спирт (2: 1 об. / Об.) И помещены в 70% глицерин. Затем ткани исследовали с помощью стереоскопа Leica M205A, а изображения получали цифровой камерой Leica DFC550.
ЖХ-МС / МС Идентификация ELH
Для подтверждения продукции ELH белок был экстрагирован из объединенных ЦНС и объединенных слизистых желез как зрелых, так и незрелых T . писана ( n = 30). Ткани гомогенизировали в 0,1% трифторуксусной кислоте (TFA) в H 2 O в соотношении 1 мл на 200 мг ткани. Затем гомогенизированную ткань обрабатывали ультразвуком тремя импульсами (по 15 с каждый) и центрифугировали в течение 10 минут при 5000 g при 4 ° C. Гидрофильные биомолекулы выделяли с использованием картриджа C18 Sep-Pack Vac (5 г; Waters, Rydalmere, NSW, Australia) в соответствии с инструкциями производителя.Образцы лиофилизировали, а затем ресуспендировали в 1 мл 0,1% TFA для ОФ-ВЭЖХ с использованием градиента ацетонитрила 0-60% в течение 60 мин (колонка Agilent Zorbax 300 SB-C18, 4,8 мм x 150 мм, размер частиц 5 мкм). Образцы элюатов собирали фракциями по 5 мин, и биомолекулы детектировали при длинах волн 210 и 280 нм.
Фракции анализировали методом ЖХ-МС / МС на приборе Shimadzu Prominance Nano HPLC (Япония), сопряженном с масс-спектрометром Triple-ToF 5600 (ABSCIEX, Канада), оборудованным источником ионов с электрораспылением нано.Приблизительно 6 мкл каждого экстракта вводили в колонку-ловушку C18 размером 50 мм x 300 мкм (Agilent Technologies, Австралия) со скоростью 30 мкл / мин. Образец обессоливали на колонке-ловушке в течение 5 минут, используя 0,1% муравьиную кислоту (водн.) При 30 мкл / мин. Затем колонку-ловушку помещали в линию с аналитической колонкой для нано-ВЭЖХ (150 мм x 75 мкм, 300SBC18, 3,5 мкм; Agilent Technologies, Австралия) для масс-спектрометрического анализа. Для элюции пептида использовали линейные градиенты 1–40% растворителя B в течение 35 минут при скорости потока 300 нл / мин с последующим более крутым градиентом от 40% до 80% растворителя B за 5 минут.Растворитель B выдерживали при 80% в течение 5 минут для промывки колонки и возвращали к 1% растворителю B для уравновешивания перед следующим вводом образца. Растворитель A состоял из 0,1% муравьиной кислоты (водн.), А растворитель B содержал 90/10 ацетонитрила / 0,1% муравьиной кислоты (водн.). Напряжение ионного распыления было установлено равным 2400 В, потенциал декластеризации (DP) 100 В, поток газа завесы 25, небулайзерный газ 1 (GS1) 12 и интерфейсный нагреватель при 150 ° C.
Масс-спектрометр получил данные полного сканирования TOF-MS за 500 мс, за которыми следовали данные полного сканирования продуктов иона 20 на 50 мс в режиме информационно-зависимого сбора, IDA.Данные полного сканирования TOF-MS были получены в диапазоне масс 350–1800 и для ионов продукта мс / мс 100–1800. Ионы, наблюдаемые при сканировании TOF-MS, превышающие пороговое значение в 100 отсчетов и зарядовое состояние от +2 до +5, были установлены для запуска получения спектра иона-продукта, мс / мс, полученных в результате 20 наиболее интенсивных ионов. Данные были получены и обработаны с помощью программного обеспечения Analyst TF 1.5.1 (ABSCIEX, Канада). Белки были идентифицированы путем поиска в базе данных с использованием PEAKS v6.0 (BSI, Канада) по базе данных последовательностей белков, предсказанных для T . pisana библиотека транскриптомов соединительной оболочки и база данных белков, состоящая из известных нейропептидов моллюсков [12].
ELH Bioassay
Взрослых улиток ( n = 78, 6 на группу лечения; 1,85 г ± стандартное отклонение 0,25 г массы тела) были выбраны случайным образом и им вводили 5 или 10 мкл синтетического ELh2 (китайские пептиды; шприц Hamilton на 50 мкл) в одной из пяти концентраций: 10 −12 M, 10 −9 M, 10 −6 M, 1.15×10 -4 M или 10 -3 M. Все растворы были приготовлены в моллюске Рингера (30), и концентрации были выбраны на основе предыдущих исследований в A . californica , что указывает на то, что ELh2 эффективен в этом диапазоне для стимуляции яйцекладки [10]. После инъекции всех улиток помещали в отдельные сосуды для образцов объемом 500 мл, на 1/4 заполненные влажным суглинком. Затем их выдерживали при температуре окружающей среды 18–21 ° C с циклом свет / темнота 12:12 ч. Изменения в поведении, в том числе рытье нор и откладывание яиц, отслеживали каждые 10 минут в течение до 1 часа после инъекции, а затем каждый час в течение 6 часов, после чего их отслеживали каждые 24 часа в течение до 6 дней после инъекции.Отрицательный контроль включал инъекцию 10 мкл БСА (10 мкг / мл в Рингере) или раствора Рингера из моллюсков [30]. Улиток, проколотых шприцем, также оценивали без инъекции какого-либо раствора.
Результаты
Идентификация и анализ генов, ассоциированных с репродукцией
Был идентифицирован транскрипт APGWamide ( Tpi — APGW1 ), который кодирует предшественник, содержащий сигнальную последовательность из 27 остатков и несколько областей для расщепления и высвобождения набора пептидов APGWamide ( ).Предшественник Tpi-APGW состоит из 379 аминокислот, хотя терминальный стоп-кодон отсутствует, и поэтому предполагается, что он имеет частичную длину. Был идентифицирован один транскрипт для ELH ( Tpi, -ELH), который кодирует единственный полноразмерный предшественник белка. Предшественник Tpi -ELH из 212 аминокислот содержит сигнальную последовательность из 28 остатков и сайты расщепления для высвобождения одного амидированного пептида ELH, содержащего 44 аминокислоты ( ). Единая расшифровка для T . Был идентифицирован pisana предшественник GnRH ( Tpi-GnRH ), который кодирует предшественник из 116 аминокислот.Предшественник содержит сигнальную последовательность из 26 остатков и сайты расщепления для высвобождения пептида GnRH из 11 остатков и пептида, ассоциированного с GnRH из 76 остатков ( ). Предшественник Tpi-GnRH демонстрирует высокую аминокислотную гомологию в пептидной области GnRH с другими последовательностями моллюсков, особенно с A . californica за счет сохранения Tyr на N-конце пептида GnRH ( S1, фиг. ). Tpi-GnRH также демонстрирует типичные GnRH-подобные характеристики, предполагающие N-концевой пироглютированный Gln и присутствие Ser, Gly и Trp, которые обнаруживаются в большинстве пептидов семейства GnRH [17].
Молекулярная характеристика T . pisana Белки-предшественники APGWamide, ELH и GnRH.Для каждого показаны аминокислотная последовательность и схематическое изображение.
Тканевую экспрессию генов APGW , ELH и GnRH предшественника проводили с использованием ОТ-ПЦР с ген-специфическими праймерами на РНК, полученными из тканей зрелого и незрелого T . pisana ( и S2 Fig ). Tpi — Транскрипты гена APGW присутствовали только в ткани ЦНС как зрелых, так и незрелых улиток. Ген Tpi — GnRH экспрессировался в ЦНС и ткани яичников зрелых улиток и только в ЦНС незрелых улиток. Ампликон Tpi — ELH ожидаемого размера был идентифицирован в ЦНС и слизистых железах зрелых и неполовозрелых улиток (ELh2), а также в мешочке для дротиков зрелых улиток. Кроме того, были идентифицированы два более крупных ампликона: один из дротикового мешка зрелых улиток (ELh3), а другой из слизистой железы как незрелых, так и зрелых улиток (ELh3).
Типичный гель для ОТ-ПЦР, демонстрирующий тканеспецифическую экспрессию генов-предшественников APGWamide, ELH и GnRH в T . писана .Ткани были получены из зрелых ( n = 10) и незрелых ( n = 15) улиток. Используемые ткани включают: бурсу (B), ЦНС (целые ганглии центральной нервной системы), дротиковый мешок (DS), мышцу стопы (F), гепатопанкреас (HP), слизистые железы (MG), овотестис (OT), половой член ( П). Tpi-actin использовали в качестве положительного контроля.
Анализ генов ELH
Все ампликоны ELH были секвенированы, что показало, что ампликон CNS ELh2 соответствует Tpi — ELH , идентифицированному в транскриптоме ЦНС (Ref-ELH), тогда как более крупные ампликоны, извлеченные из слизистой железы и дротика. Ампликоны sac, как оказалось, демонстрируют различные вариации (ELh3 и ELh4) внутри пептида ELH ( ). Предшественник Tpi -ELH продемонстрировал сильную гомологию с другими предшественниками ELH моллюска в пептиде ELH, в основном около N- и C-концов.Это сохранение было также очевидным, когда Tpi-ELH сравнивали с другими идентифицированными ELH ( ). Предсказанная трехмерная структура пептида ELH показывает, что он, вероятно, состоит из двух коротких альфа-спиралей ( ). Потенциальная энергия как функция времени во время этого моделирования молекулярной динамики (MDS) и среднеквадратичное отклонение положений атомов (RMSD) относительно этой структуры в ходе MDS ( S3 Рис. ) предполагает, что она достигла семейство стабильных конформаций (RMSD <2Å).Репрезентативная структура Tpi-ELH возникла на 106,60 нс в MDS.
Молекулярная идентификация Theba pisana гормона яйцекладки (ELH).( A ) Сравнительное выравнивание аминокислотной последовательности области ELH, показывающее оболочку ELH (Ref-ELh2) с ампликонами ELH, полученными из CNS, DS (ELh3) и MG (ELh4). Черное затенение представляет идентичные остатки, серое затенение представляет аналогичные остатки. Показан пептидный домен ELH. ( B ) Аминокислотная последовательность и сравнительное выравнивание аминокислотной последовательности известных пептидов ELH.Логотип последовательности обеспечивает общее представление о сохранении последовательности с масштабной линейкой, указывающей степень сохранения аминокислот. ( C ) Прогнозируемая структура T . писана ЭЛх2. Пурпурный представляет собой альфа-спираль, Thr8-Ile11, Lys38-Leu42; голубые витки, белая случайная катушка Gln1-Arg4, Ser12-Thr16, Thr19-Glu26 и Leu30-Arg34.
Полная гибридизация монтировки in situ с антисмысловым рибозондом ELh2 DIG-меченным рибозондом была использована для определения пространственной экспрессии Tpi-ELh2 в зрелом T . pisana ЦНС, дротиковый мешок и слизистые железы ( ). В ЦНС экспрессия Tpi — ELh2 наблюдалась в областях соединительной оболочки, ближайших к церебральным ганглиям и процеребруму. Tpi — Экспрессия ELh2 также наблюдалась по всему мешочку для дротиков, тогда как слизистые железы демонстрировали экспрессию точечных точек по всей ацинусам, которые, как известно, содержат скопления секретирующих слизь клеток. Отрицательные контроли демонстрировали краевое окрашивание фона, ограниченное внешней границей соединительной ткани.Фонового окрашивания слизистых желез и мешочка для дротиков не наблюдалось.
Цельное крепление in situ локализация гибридизации Theba pisana ELh2 в ЦНС зрелой и незрелой улитки, мешочке дротика и слизистой.Антисмысловые DIG-меченные рибозонды показывают расположение транскрипта Tpi-ELh2 . Открытые стрелки представляют собой пример экспрессии в мешочке дротика и слизистой, а также в оболочке ганглиев головного мозга. Черные стрелки выделяют экспрессию Tpi-ELh2 в области париетальных / плевральных / висцеральных ганглиев; красные стрелки показывают расположение узлов педали.
ОФ-ВЭЖХвыполняли на экстрактах ЦНС и слизистых желез, чтобы определить, можно ли идентифицировать какой-либо из предшественников Tpi -ELH. Типичные профили элюирования с помощью ОФ-ВЭЖХ для ЦНС и слизистой железы показаны в , соответственно, где фракции между 20-40-минутной элюцией были дополнительно проанализированы с помощью ЖХ-МС / МС. Один сегмент пептида, соответствующий предшественнику Tpi-ELH, был обнаружен в экстракте ЦНС через 30–35 мин, что соответствует L 21 ALSSSAMPVPDEMKVP 39 ([M + 1H] 1+ = 1610.83) ( ). Три различных пептидных сегмента-предшественника Tpi-ELh2 были идентифицированы из экстрактов слизистых желез, которые также элюировались в течение 30–35 минут ( ), пример которых соответствует Q 43 LEITGKQP 51 , ([M + 2H] 2+ = 507,28).
Протеомное доказательство наличия пептидов-предшественников ELH в белковых экстрактах T . писана салфетки.Типичные профили элюирования с помощью ОФ-ВЭЖХ, последовательность предшественника с подходящим пептидом и спектры МС / МС для ( A ) ЦНС и ( B ) слизистой железы.Синяя линия на хроматограммах указывает, где элюируются пептиды Tpi-ELH.
Биологические анализы
Зрелые T . pisana также анализировали на предмет откладывания яиц после инъекции улиткам либо синтетического Tpi-ELh2, либо контрольных растворов () . В анализе 1 в течение 60 минут после инъекции 100% улиток ( n = 78) выздоровели, что продемонстрировано нормальной активностью. В отрицательном контроле (улиткам, которым вводили раствор Рингера, БСА или инъекции без раствора) не наблюдалось никаких изменений поведения, включая откладывание яиц) через 24 часа после инъекции.В отличие от этого, рытье норы в почве наблюдалось у 40,7% улиток, обработанных Tpi-ELh2 ( n = 22), включая одну обработанную Tpi-ELh2 улитку (1,15×10 -4 M Tpi-ELH), которая имела произвела яичную массу, содержащую оплодотворенные и неоплодотворенные яйца. В последующих наблюдениях через 48 и 72 часа после инъекции еще 5 улиток из группы обработки ELH 1,15×10 -4 M имели кордоны отложенных яиц. Смертности не наблюдалось ни в одной из групп лечения.
Таблица 1
Биотест яйцекладки после инъекции синтетического Tpi-ELh2 и / или отрицательных контролей.
| Стимул | n | Отрицательный | Закапывание без откладки яиц | Закапывание с откладыванием яиц | Только откладывание яиц | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Впрыск (без раствора) | 6 | 6 | 0 | 0 | 0 | |||||||
| Звонок (10 мкл) | 6 | 6 | 0 | |||||||||
| BSA (10 мкг / мл, 10 мкл) | 6 | 6 | 0 | 0 | 0 | |||||||
| ELH (10- 3 M, 5 мкл) 6 | 0 | 0 | 0 | |||||||||
| ELH (10- 3 M, 10 мкл) | 6 | 6 | 0 | 0 | 0 | |||||||
| ELH (1.15x -4 M, 10 мкл) | 6 | 0 | 0 | 6 | 0 | |||||||
| ELH (10- 6 M, 5 мкл) | 6 | 1 | 0 | 0 | ||||||||
| ELH (10- 6 M, 10 мкл) | 6 | 4 | 2 | 0 | 0 | |||||||
| ELH (10-9 9 M, 535 мкл) | 6 | 0 | 6 | 0 | 0 | |||||||
| ELH (10-9 M, 10 мкл) | 6 | 2 | 4 | 0 | 0 | 0 | 0 906 10- 12 M, 5 мкл) | 6 | 4 | 2 | 0 | 0 |
| ELH (10-9 12 M, 10 мкл) | 6 | 3 | 0 | 0 | ||||||||
| Анализ 2 | ||||||||||||
| Впрыск | 6 | 6 | 0 | 0 | 0 | |||||||
| ELH (1.15x -4 M, 10 мкл) | 30 | 11 | 0 | 16 | 3 |
Учитывая, что улитки с 1,15×10 -4 M Tpi-ELH показали яйценоскость в анализе 2 улиткам ( n = 30) вводили только 1,15×10 -4 M ELH () . Опять-таки, немедленной кладки яиц не наблюдалось, но через 24 часа после инъекции 3 улитки продемонстрировали откладывание яиц (зарывались в почву), а 2 улитки откладывали яйца. Через 48 часов после инъекции еще 13 улиток откладывали яйца, а еще 2 яичных массы присутствовали через 72 часа после инъекции.Некоторые яичные массы были обнаружены над верхним слоем почвы ( n = 3). К 6 дню еще 2 улитки дали массу яиц до того, как эксперимент был завершен. Отрицательный контроль (инъекция без раствора, n = 6) не давал яиц, или улитки не проявляли поведения рытья нор или откладки яиц.
Обсуждение
В этом исследовании мы проанализировали ЦНС T . pisana для оценки присутствия генов репродуктивных нейропептидов, подобных моллюскам. Наш Т . pisana CNS RNA-seq Данные показали присутствие двух изоформ-предшественников Tpi-APGW1 частичной длины ( Tpi-APGW1 и Tpi-APGW2 ). Имея 379 аминокислот и кодируя двенадцать пептидов APGWamide, Tpi-APGW1 был больше (по крайней мере на 72%), чем предшественник APGWamide Haliotis asinina [31], и примерно на 29% больше, чем Tpi-APGW2. Эта вариабельность объясняется включением одной вставки из 111 аминокислот в Tpi-APGW1 по сравнению с Tpi-APGW2, и по сравнению с другими моллюсками, это делает его крупнейшим известным предшественником APGWamide моллюсков, идентифицированным на сегодняшний день.Различные аналоги, такие как родственные пептиды GWamide (TPGWa, KPGWa и RPGWa), были идентифицированы у каракатицы Sepia officinalis [32,33], голубой мидии Mytilus edulis [34] и Тихоокеанского региона ( C . gigas ) и жемчужные ( Pinctata fucata ) устрицы [12], но они не присутствовали в T . писана . Однако мы идентифицировали единственный амидированный пептид, AAEW, который кодируется обеими изоформами Tpi-APGW. Ген Tpi-APGW экспрессировался исключительно в ЦНС, расположение, которое согласуется с другими брюхоногими моллюсками.В частности, сообщалось, что APGW локализуется в переднемедиальной области церебральных ганглиев и в части педальных ганглиев [35,36,37,38]. Дальнейшие работы потребуются для идентификации полноразмерной последовательности Tpi-APGW и характеристики роли и функции как AAEWамида, так и APGWamide в Theba .
У моллюсков гены, кодирующие GnRH, ранее были идентифицированы в тканях ЦНС O . vulgaris [39] и Aplysia [40].Кроме того, он был недавно аннотирован из чернового варианта генома устриц C . гига и P . fucata [12] и блюдце L . гигантея [11]. Кроме того, многочисленные исследования также документально подтвердили наличие (посредством иммунолокализации) и биоактивность GnRH у множества других видов моллюсков [41,42,43,44,45,46,47], таким образом подтверждая эволюционную консервацию GnRH среди этого разнообразного тип. В этом исследовании мы идентифицировали транскрипт, кодирующий полноразмерный предшественник Tpi-GnRH внутри транскриптома оболочки, с последующим анализом пространственной экспрессии, показавшим, что он также присутствует в овотесте зрелых животных.Такое расположение не является необычным для моллюсков, как показано на примере S . лекарственный и H . asinina , где ген GnRH также экспрессируется в яичнике [48,49]. Наше исследование поддерживает роль GnRH в воспроизводстве и дополнительно поддерживает идею о том, что независимо от эволюционного расстояния между типами животных, GnRH является древним пептидом, который последовательно демонстрирует роль в широком контексте воспроизводства животных [17,48]. Это контрастирует с разнообразием GnRH-подобных изоформ, включая AKH, коразонин и RPCH, которые были обнаружены среди экдизозоа, которые еще не были напрямую связаны с репродуктивными процессами [50,51].
Ген ELH весьма вариабелен, что затрудняет положительную идентификацию биоактивного пептида с помощью традиционных молекулярных инструментов. В последнее время, благодаря относительной легкости, с которой можно секвенировать нуклеиновые кислоты, подходы к высокопроизводительному анализу транскриптомов позволили исследователям идентифицировать предполагаемые нейропептиды даже у немодельных видов животных [12,52]. Таким образом, анализ транскриптомов в настоящее время является ценным инструментом для открытия генов и эффективно используется у ряда видов, что полезно в случаях, когда геном недоступен [53].Например, гены ELH устрицы были выделены в результате скрининга in silico геномов тихоокеанской устрицы ( Crassostrea gigas ) и жемчужной устрицы ( Pinctata fucata ) [12].
Т . pisana ELh2 кодирует белок, который разделяет характерные черты препрогормона ELH, включая гидрофобную сигнальную последовательность, за которой следует ряд сайтов расщепления, которые могут высвобождать биоактивный пептид ELH [54]. Однако Tpi-ELh2 не содержит гомологичных пептидов в своем предшественнике, которые имеют сходство с α- или β-пептидами ELH, как описано в предшественнике Aplysia ELH.Эти дополнительные биоактивные пептиды-предшественники известны своей ролью в самовозбуждении нейронов, содержащих Aplsyia ELH [55]. Однако, поскольку предшественник Tpi-ELh2 содержит предсказанные сайты расщепления, которые могут высвобождать по крайней мере 4 дополнительных пептида, мы предполагаем, что они могут играть те же роли, что и те, которые описаны в Aplysia . С-концевой пептид (SQNNAVVKADVSNRREQDFLSFLQAALGSSENV) в целом является кислым, что согласуется с С-концевым пептидом предшественника Aplysia ELH, известным как кислотный пептид [56].Сравнение первичной структуры Tpi-ELh2 с другими ELH моллюсков обнаруживает консервативные области на N- и C-концах, включая амидирование, которое, как полагают, играет важную роль в связывании рецепторов [9].
Накопленные геномные данные показали, что ген ELH является членом мультигенного семейства, состоящего из небольшого числа высокогомологичных генов, которые экспрессируются тканеспецифическим образом [12,57]. Имеются также сообщения о множестве ELH-подобных пептидов в одном и том же предшественнике. Например, в устрицах P , fucata и C , gigas последовательность предшественника гена ELH кодирует предшественники, которые включают два ELH-подобных пептида [58].Мы обнаружили, что хотя T . pisana не содержит предшественника с несколькими ELH, у него есть два дополнительных гена ELH, Tpi-ELh3 и Tpi-ELh4 , которые экспрессируются в неневральных тканях, что определяется тканеспецифической RT. -PCR. Это имеет интересные параллели с ELH-подобным пептидом предсердной железы Aplysia , последним главным экзокринным органом, вступающим в контакт с яйцами до того, как они откладываются [59]. Было высказано предположение, что при нормальных физиологических обстоятельствах предсердная железа не может секретировать ELH в гемоцель и, следовательно, не играет прямой роли в отложении яиц [60].Вместо этого, когда пептиды предсердной железы вводятся зрелым животным, они могут вызывать отложение яиц из-за прямого действия пептидов, связанных с ELH [61,62]. Это говорит о том, что расположение предсердной железы и ее роль могут больше соответствовать стимулированию стимулирующего поведения при спаривании [63,64].
В нашем исследовании мы обнаружили Tpi-ELh2-3 в мешочке дротика и слизистой железе зрелого T . pisana (но только слизистая железа неполовозрелых улиток), таким образом предполагая, что этот гормон вносит вклад в предполагаемый перенос аллогормонов во время стрельбы «любовным» дротиком в спиралидных улитках.Любовный дротик действует как игла, подобная шприцу, которая облегчает совместный перенос предварительно покрытого вещества (веществ) слизистой железы при спаривании, что увеличивает успех отцовства [65,66,67,68,69,70,71]. На сегодняшний день нет исследований, которые четко определили точный биохимический состав аллогормона хелицида Лав Дарт, хотя известно, что по крайней мере один компонент аллогормона стимулирует сокращение дивертикула протока сумки реципиента, тем самым обеспечивая сохранение увеличенной доли его донорской спермы. [72].Следовательно, следует изучить влияние Tpi-ELh2 и Tpi-ELh3 на сокращение дивертикула протока бурсы. Однако настоящее исследование установило, что синтетический Tpi-ELh2 может вызывать наблюдаемые изменения в поведении кладки яиц in vivo . В Aplysia ELH может стимулировать откладку яиц примерно через 45 минут после инъекции [7]. Время, необходимое для кладки яиц под действием Tpi-ELh2 в T . pisana был намного длиннее (от 180 минут до 24 часов после инъекции), и те животные, которые действительно демонстрировали кладку яиц, давали незрелые яйца.Этот результат может быть связан с изоляцией отдельных улиток во время биопроб или периодами, когда улитки находились в состоянии покоя, или периодами бездействия, что приводило к более медленному восстановлению и мобилизации улиток.
Выводы
Репродуктивные нейропептиды охватывают разнообразный класс клеточных сигнальных молекул, которые продуцируются и высвобождаются через секреторный путь, регулируемый эндокринной системой. В этом исследовании мы проанализировали транскриптом ЦНС наземной улитки T . pisana , и идентифицировали транскрипты генов, которые кодируют три пептида ELH, ELh2-3.Основываясь на функциональном анализе, мы установили роль ELh2 в репродуктивных процессах T . писана . Важно отметить, что это первый случай, когда ELH был охарактеризован как на генном, так и на функциональном уровне у наземной улитки. Мы также сообщаем о транскриптах других генов, которые участвуют в репродуктивных процессах у моллюсков, включая APGW и GnRH . Вполне возможно, что теперь эта информация может быть использована для разработки основы для понимания воспроизводства у других наземных моллюсков и разработки способов управления популяциями наземных улиток-вредителей посредством модуляции этих генов.
Дополнительная информация
S1 Рис.
Сравнение и филогенетический анализ гонадолиберина.(TIF)
S2 Рис.
Полный гель RT-PCR, демонстрирующий тканеспецифическую экспрессию генов-предшественников APGWamide, ELH и GnRH в T . писана .Обозначение показано в . Используемые ткани включают: бурсу (B), ЦНС (целые ганглии центральной нервной системы), дротиковый мешок (DS), мышцу стопы (F), гепатопанкреас (HP), слизистые железы (MG), овотестис (OT), половой член ( П). Tpi-actin использовали в качестве положительного контроля.
(TIF)
S3 Рис.
Модель ELh2.(A) Потенциальная энергия ELh2 как функция времени во время MD. Сплошная линия — среднее значение за 50 пс. (B) RMSD позвоночника во время того же MD, по сравнению с конформацией с самой низкой энергией (репрезентативная структура). Последовательность ELh2: [p-] EAERDRRTWSISNALTVLTDMVVEHEQRRLAAEREALKQRLLELамид.
(TIF)
S1 Таблица
Праймеры, используемые для ОТ-ПЦР.(DOCX)
Благодарности
Мы также хотим выразить нашу благодарность Грэму Хейсу за предоставленных улиток, использованных в этом исследовании.
Заявление о финансировании
Финансируется Австралийским исследовательским советом: DP120104360.
Доступность данных
Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.
Ссылки
1. Chase RB (2002) Поведение и его нервный контроль у брюхоногих моллюсков: Oxford University Press.[Google Scholar] 2. Casadio A, Fiumara F, Sonetti D, Montarolo PG, Ghirardi M (2004) Распределение иммунореактивности сенсоринов в центральной нервной системе Helix pomatia : Функциональные аспекты. Журнал исследований нейробиологии 75: 32–43. [PubMed] [Google Scholar] 3. Куроки Ю., Канда Т., Кубота И., Фудзисава Ю., Икеда Т., Миура А. и др. (1990) Нейропептид моллюска, родственный гормону ракообразных, RPCH. Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях 167: 273–279. [PubMed] [Google Scholar] 4.Ван Голен Ф.А., Ли К.В., Де Ланге РПЖ, Ван Кестерен РЭ, Ван Дер Шорс РС и др. (1995) Совместно локализованные нейропептиды конопрессин и ALA-PRO-GLY-TRP-Nh3 обладают антагонистическим действием на семявыносящий проток lymnaea . Неврология 69: 1275–1287. [PubMed] [Google Scholar] 5. De Boer P, Ter Maat A, Pieneman AW, Croll RP, Kurokawa M, Jansen RF (1997) Функциональная роль пептидергических нейронов передней доли в мужском половом поведении улитки Lymnaea stagnalis . Журнал нейрофизиологии 78: 2823–2833.[PubMed] [Google Scholar] 6. Чансела П., Сайтонгди П., Стюарт П., Сункланг Н., Стюарт М., Супхамунгми В. и др. (2008) Наличие APGWamide в семенниках и индукция его спермиации у Haliotis asinina Linnaeus. Аквакультура 279: 142–149. [Google Scholar] 7. Chiu A, Hunkapiller M, Heller E, Stuart D, Hood L, Strumwasser F (1979) Очистка и первичная структура нейропептидного гормона яйцекладки Aplysia californica . Труды Национальной академии наук 76: 6656–6660.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Ebberink R, Van Loenhout H, Geraerts W, Joosse J (1985) Очистка и аминокислотная последовательность нейрогормона овуляции Lymnaea stagnalis . Труды Национальной академии наук 82: 7767–7771. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 9. Ли Л., Гарден Р. У., Флойд П. Д., Мороз Т. П., Глисон Дж. М., Свидлер СП и др. (1999) Пептиды гормона яйцекладки в семействе aplysiidae. Журнал экспериментальной биологии 202: 2961–2973. [PubMed] [Google Scholar] 10.Cummins SF, Nuurai P, Nagle GT, Degnan BM (2010) Сохранение нейропептида гормона яйцекладки и феромона аттрактина у пятнистого морского зайца, Aplysia dactylomela . Пептиды 31: 394–401. 10.1016 / j.peptides.2009.10.010 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Veenstra JA (2010) Нейрогормоны и нейропептиды, кодируемые геномом Lottia gigantea, применительно к другим моллюскам и насекомым. Общая и сравнительная эндокринология 167: 86–103. 10.1016 / j.ygcen.2010.02.010 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12.Стюарт М.Дж., Фаврель П., Ротганс Б., Ван Т., Чжао М., Сохаил М. и др. (2014) Нейропептиды, кодируемые геномами Akoya pearl oyster Pinctata fucata и Pacific oyster Crassostrea gigas : биоинформатический и пептидомный обзор. BMC геномика 15: 840 10.1186 / 1471-2164-15-840 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Heifetz Y, Vandenberg LN, Cohn HI, Wolfner MF (2005) Два продукта расщепления овулина вспомогательного белка железы Drosophila могут независимо вызывать овуляцию.Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки 102: 743–748. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Salzet M, Verger-Bocquet M, Vandenbulcke F, Van Minnen J (1997) Гормон, напоминающий яйцекладку пиявки: структура, нейрональное распределение и филогения. Молекулярное исследование мозга 49: 211–221. [PubMed] [Google Scholar] 15. Morishita F, Furukawa Y, Matsushima O, Minakata H (2010) Регулирующие действия нейропептидов и пептидных гормонов на размножение моллюсков.Канадский зоологический журнал 88: 825–845. [Google Scholar] 16. Baker GH, Hawke BG (1990) История жизни и динамика популяции Theba pisana (Mollusca: Helicidae) в чередовании злаков и пастбищ. Журнал прикладной экологии 27: 16–29. [Google Scholar] 17. Рох Г.Дж., Басби Э.Р., Шервуд Н.М. (2011) Эволюция гонадолиберина: погружение глубже. Общая и сравнительная эндокринология 171: 1–16. 10.1016 / j.ygcen.2010.12.014 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Osada M, Treen N (2013) Molluscan GnRH, связанный с репродукцией.Общая и сравнительная эндокринология 181: 254–258. 10.1016 / j.ygcen.2012.09.002 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]19. Леонард Э., Бейкер Г, Хопкинс Д. (2003) Bash’em, burn’em, bait’em. Южно-Австралийский научно-исследовательский институт (SARDI), Аделаида.
20. Watt S (2012) Биологическое оружие, направленное на улиток. Почвопокровное покрытие 97: 37. [Google Scholar] 21. Адамсон К.Дж., Ван Т., Чжао М., Белл Ф., Кубалла А.В., Стори К.Б. и др. (2015) Молекулярное понимание нейропептидов наземной улитки с помощью транскриптома и сравнительного анализа генов.BMC Genomics 16: 308 10.1186 / s12864-015-1510-8 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Петерсен TN, Brunak S, von Heijne G, Nielsen H (2011) SignalP 4.0: различение сигнальных пептидов из трансмембранных областей. Природные методы 8: 785–786. 10.1038 / nmeth.1701 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Southey BR, Amare A, Zimmerman TA, Rodriguez-Zas SL, Sweedler JV (2006) NeuroPred: инструмент для прогнозирования сайтов расщепления в предшественниках нейропептидов и определения масс образующихся пептидов.Исследование нуклеиновых кислот 34: W267 – W272. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 24. Ren J, Wen L, Gao X, Jin C, Xue Y, Yao X (2009) DOG 1.0: иллюстратор структур белковых доменов. Клеточные исследования 19: 271–273. 10.1038 / кр.2009.6 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 25. Simmerling C, Strockbine B, Roitberg AE (2002) Предсказание структуры всех атомов и моделирование сворачивания стабильного белка. Журнал Американского химического общества 124: 11258–11259. [PubMed] [Google Scholar] 26. Тамура К., Петерсон Д., Петерсон Н., Стечер Г., Ней М., Кумар С. (2011) MEGA5: анализ молекулярной эволюционной генетики с использованием методов максимального правдоподобия, эволюционного расстояния и максимальной экономии.Молекулярная биология и эволюция 28: 2731–2739. 10.1093 / molbev / msr121 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Beitz E (2000) TeXshade: затенение и маркировка множественных выравниваний последовательностей с использованием LaTeX2e. Биоинформатика 16: 135–139. [PubMed] [Google Scholar] 28. Saitou N, Nei M (1987) Метод объединения соседей: новый метод реконструкции филогенетических деревьев. Молекулярная биология и эволюция 4: 406–425. [PubMed] [Google Scholar] 29. Cummins SF, York PS, Hanna PJ, Degnan BM, Croll RP (2009) Экспрессия прогормоновой конвертазы 2 и генерация нейропептидов в развивающейся нервной системе брюхоногих моллюсков Haliotis .Инт Дж Дев Биол 53: 1081–1088. 10.1387 / ijdb.082791sc [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 30. Бернар А., Бонне В. (1930) Минеральная композиция химолимфа и этюда физиологического раствора для вывоза. CR soc biol 103: 1119–1120. [Google Scholar] 31. Gess S, Gess F (2007) Вторжение улиток: потенциальное воздействие инвазивной средиземноморской улитки, Theba pisana , на растительность прибрежных дюн. Вельд и Флора 93: 216–218. [Google Scholar] 32. Генри Дж., Затыльный С. (2002) Идентификация и картирование тканей пептидов, связанных с APGWamide, в Sepia officinalis с использованием LC-ESI-MS / MS.Пептиды 23: 1031–1037. [PubMed] [Google Scholar] 33. Henry J, Favrel P, Boucaud-Camou E (1997) Выделение и идентификация нового пептида, родственного Ala-Pro-Gly-Trp-амиду, ингибирующего подвижность зрелого яйцевода у каракатиц, Sepia officinalis . Пептиды 18: 1469–1474. [PubMed] [Google Scholar] 34. Генри Дж., Затыльный С., Фаврель П. (2000) ВЭЖХ и масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением как инструменты для идентификации пептидов, связанных с APGWamide, у брюхоногих и двустворчатых моллюсков: сравнительная активность на мышцах Mytilus .Исследование мозга 862: 162–170. [PubMed] [Google Scholar] 35. Koene JM (2010) Нейроэндокринный контроль воспроизводства у гермафродитных пресноводных улиток: механизмы и эволюция. Границы поведенческой нейробиологии 4. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 36. Де Ланге Р., Ван Миннен Дж. (1998) Локализация нейропептида APGWamide в брюхоногих моллюсках с помощью in situ гибридизации и иммуноцитохимии. Общая и сравнительная эндокринология 109: 166–174. [PubMed] [Google Scholar] 37.De Lange R, Van Golen F, Van Minnen J (1997) Разнообразие клеточно-специфической коэкспрессии четырех нейропептидных генов, участвующих в контроле поведения копуляции самцов в Lymnaea stagnalis . Неврология 78: 289–299. [PubMed] [Google Scholar] 38. Фаврел П., Матье М. (1996) Молекулярное клонирование кДНК, кодирующей предшественник нейропептидов, связанных с амидом Ala-Pro-Gly-Trp, из двустворчатого моллюска Mytilus edulis . Письма о неврологии 205: 210–214. [PubMed] [Google Scholar] 39. Ивакоши Э., Такува-Курода К., Фудзисава И., Хисада М., Укена К., Цуцуи К. и др.(2002) Выделение и характеристика GnRH-подобного пептида из Octopus vulgaris . Сообщения о биохимических и биофизических исследованиях 291: 1187–1193. [PubMed] [Google Scholar] 40. Zhang L, Tello JA, Zhang W, Tsai P-S (2008) Молекулярное клонирование, паттерн экспрессии и иммуноцитохимическая локализация молекулы, подобной гонадотропин-высвобождающему гормону, в брюхоногом моллюске, Aplysia californica . Общая и сравнительная эндокринология 156: 201–209. 10.1016 / j.ygcen.2007.11.015 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Амано М., Морияма С., Окубо К., Амия Н., Такахаши А., Ока Ю. (2010) Биохимические и иммуногистохимические анализы GnRH-подобного пептида в нервных ганглиях тихоокеанского морского ушка Haliotis Discus hannai (Gastropoda). Зоологическая наука 27: 656–661. 10.2108 / zsj.27.656 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Young KG, Chang JP, Goldberg JI (1999) Нейронная система гонадотропин-рилизинг-гормона пресноводных улиток Helisoma trivolvis и Lymnaea stagnalis : возможное участие в воспроизводстве.Журнал сравнительной неврологии 404: 427–437. [PubMed] [Google Scholar] 43. Goldberg JI, Garofalo R, Price CJ, Chang JP (1993) Присутствие и биологическая активность GnRH-подобного фактора в нервной системе Helisoma trivoluis . Журнал сравнительной неврологии 336: 571–582. [PubMed] [Google Scholar] 44. Tsai P-S, Maldonado TA, Lunden JB (2003) Локализация гонадотропин-высвобождающего гормона в центральной нервной системе и периферическом хемосенсорном органе Aplysia californica .Общая и сравнительная эндокринология 130: 20–28. [PubMed] [Google Scholar] 45. Накамура С., Осада М., Кидзима А. (2007) Вовлечение нейрона ГнРГ в сперматогониальную пролиферацию гребешка, Patinopecten yessoensiss . Молекулярное воспроизводство и развитие 74: 108–115. [PubMed] [Google Scholar] 46. Горбман А., Уайтли А., Кавано С. (2003) Феромонная стимуляция нерестового высвобождения гамет гонадотропин-высвобождающим гормоном в хитоне, Mopalia sp. Общая и сравнительная эндокринология 131: 62–65.[PubMed] [Google Scholar] 47. Амано М., Ока Ю., Нагаи Ю., Амия Н., Ямамори К. (2008) Иммуногистохимическая локализация GnRH-подобного пептида в мозге головоногих моллюсков-кальмаров, Loligo bleekeri . Общая и сравнительная эндокринология 156: 277–284. 10.1016 / j.ygcen.2008.01.008 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Di Cristo C, De Lisa E, Di Cosmo A (2009) ГнРГ в головном мозге и яичниках Sepia officinalis Пептиды 30: 531–537. [PubMed] [Google Scholar] 49. Нуураи П., Поляроен Дж., Тиникул Ю., Камминс С., Сретаругса П., Ханна П. и др.(2010) Существование пептидов, подобных гонадотропин-рилизинг-гормону, в нервных ганглиях и яичниках морского ушка, Haliotis asinina L. Acta histochemica 112: 557–566. 10.1016 / j.acthis.2009.06.002 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 50. Veenstra JA (1989) Выделение и структура коразонина, кардиоактивного пептида американского таракана. Письма Febs 250: 231–234. [PubMed] [Google Scholar] 51. Wicher D, Söhler S, Gundel M, Heinemann SH, Wollweber L, Stengl M и др. (2006) Дифференциальная активация рецепторов адипокинетическими гормонами тараканов оказывает различное влияние на ионные токи, активность нейронов и движения.Журнал нейрофизиологии 95: 2314–2325. [PubMed] [Google Scholar] 53. Ghabooli S, Zhan A, Sardiña P, Paolucci E, Sylvester F, Perepelizin PV, et al. (2013) Генетическое разнообразие интродуцированных популяций золотистой мидии соответствует активности переносчиков. PLoS ONE 8: e59328 10.1371 / journal.pone.0059328 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Hermann PM, de Lange RP, Pieneman AW, ter Maat A, Jansen RF (1997) Роль нейропептидов, кодируемых геном CDCH-1, в организации откладывания яиц у прудовой улитки, Lymnaea stagnalis .J Нейрофизиол 78: 2859–2869. [PubMed] [Google Scholar] 56. Стюарт М.Дж., Ван Т., Коэн Дж.М., Стори К.Б., Камминс С.Ф. (2016) Аллогормон «любовного» дротика, обнаруженный в слизистых железах наземных улиток-гермафродитов. J Biol Chem 291: 7938–7950. 10.1074 / jbc.M115.704395 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57. Dudek FE, Tobe SS (1978) Пептид мешочных клеток действует непосредственно на ovotestis Aplysia californica : основа для биоанализа in vitro. Gen Comp Endocrinol 36: 618–627. [PubMed] [Google Scholar] 58.Мацумото Т., Масаока Т., Фудзивара А., Накамура Ю., Сато Н., Авадзи М. (2013) Гены, связанные с воспроизводством, в геноме жемчужных устриц. Зоологическая наука 30: 826–850. 10.2108 / zsj.30.826 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Akalal D-B, Cummins SF, Painter SD, Nagle GT (2003) Пептидные продукты предсердной железы не передаются через воду репродуктивными феромонами во время откладки яиц в Aplysia . Пептиды 24: 1117–1122. [PubMed] [Google Scholar] 60. Kurosky A, Gorham EL, Van Heumen WR, Garcia AT, Smith JS, Mifflin RC (1997) Экспрессия и генетическая изменчивость семейства генов гормона яйцекладки Aplysia в предсердной железе.Неврология беспозвоночных 2: 261–271. [PubMed] [Google Scholar] 61. Branton WD, Arch S, Smock T, Mayeri E (1978) Доказательства опосредования нейронального взаимодействия с помощью поведенчески активного пептида. Труды Национальной академии наук 75: 5732–5736. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Heller E, Kaczmarek L, Hunkapiller M, Hood L, Strumwasser F (1980) Очистка и первичная структура двух нейроактивных пептидов, которые вызывают последующий разряд клеток мешка и откладывание яиц в Aplysia .Труды Национальной академии наук 77: 2328–2332. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 63. Painter SD, Chong MG, Wong MA, Gray A, Cormier JG, Nagle GT (1991) Относительный вклад яйцеклетки и кордона яиц в феромонное притяжение и индукцию спаривания и откладывания яиц у Aplysia . Биологический бюллетень 181: 81–94. [PubMed] [Google Scholar] 64. Koene JM, ter Maat A (2001) Аллогормоны: класс биоактивных веществ, одобренных половым отбором.Журнал сравнительной физиологии А 187: 323–326. [PubMed] [Google Scholar] 65. Adamo SA, Chase R (1990) «Любовный дротик» улитки Helix aspersa вводит феромон, который сокращает продолжительность ухаживания. Журнал экспериментальной зоологии 255: 80–87. [Google Scholar] 66. Rogers DW, Chase R (2001) Квитанция Dart способствует хранению спермы в садовой улитке Helix aspersa . Поведенческая экология и социобиология 50: 122–127. [Google Scholar] 67. Landolfa MA, Green DM, Chase R (2001) Стрельба из дротиков влияет на репродуктивный успех отцов у улитки Helix aspersa (Pulmonata, Stylommatophora).Поведенческая экология 12: 773–777. [Google Scholar] 68. Чейз Р. (2007) Функция дротика по спиралевидным улиткам. Американский малакологический бюллетень 23: 183–189. [Google Scholar] 69. Чейз Р., Бланшар К.С. (2006) Любовный дротик улитки выделяет слизь для увеличения отцовства. Труды Королевского общества B: биологические науки 273: 1471–1475. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 70. Koene JM, Montagne-Wajer K, Roelofs D, Ter Maat A (2009) Судьба полученной спермы в репродуктивном тракте улитки-гермафродита и ее значение для оплодотворения.Эволюционная экология 23: 533–543. [Google Scholar] 71. Adamo SA, Chase R (1988) Ухаживание и совокупление у наземной улитки Helix aspersa . Канадский зоологический журнал 66: 1446–1453. [Google Scholar] 72. Koene JM, Liew T-S, Montagne-Wajer K, Schilthuizen M (2013) Подобный шприцу любовный дротик вводит продукты мужской дополнительной железы в тропического гермафродита. PloS один 8: e69968 10.1371 / journal.pone.0069968 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]Крошечный компьютер выходит в поле, привязанный к спинам хищных улиток • The Register
Ученые из Мичиганского университета отпраздновали эксперимент, в котором к спинам улиток были прикреплены сверхмалые компьютеры, что позволило разгадать загадку вымирания, на которую давно не было ответа.
С 1970-х годов популяция улиток на островах Южно-Тихоокеанского общества пережила масштабное вымирание, в результате которого было уничтожено более 50 видов — жертв инопланетной улитки с хищными инстинктами, появившейся в экосистеме в то десятилетие.
«Эндемичные древесные улитки никогда не сталкивались с хищниками, подобными инопланетной розовой улитке-волку, до того, как их намеренно завели, — пояснил профессор Диармайд О Фойгил, куратор Зоологического музея Мичиганского университета.«Он может лазить по деревьям и очень быстро довел до местного исчезновения большую часть населения долины».
Большая часть населения, но не все. Partula hyalina выжила, и до сих пор никто не мог объяснить, почему эта улитка избежала участи своих местных собратьев. Представляем вашему вниманию компьютер-улитку: Michigan Micro Mote, или M3, который был представлен в 2014 году как самый маленький в мире полноценный компьютер, прикрепленный к спинкам исследуемых улиток.
YouTube видео
«Мы смогли получить данные, которые никто не мог получить», — сказал Дэвид Блаау, доцент кафедры электротехники и информатики Kensall D Wise. «И это потому, что у нас была крошечная вычислительная система, достаточно малая, чтобы ее можно было накинуть на улитку.«
M3 имеет размеры всего 2x2x4 мм и способен извлекать энергию из окружающей среды и обмениваться данными по беспроводной сети с использованием оптических сигналов. Несмотря на свой размер, он использует общий процессор: Cortex-M0 + от Arm, недавно выбранный для питания значительно большего микроконтроллера RP2040, лежащего в основе платы для разработки Raspberry Pi Pico.
Во время первого полевого эксперимента с M3 ученые приклеили модифицированные версии машин к раковинам розовых волчьих улиток, чтобы измерить интенсивность света в местах их обитания, следуя теории, что белая раковина P.hyalina может позволить ему выжить в областях, слишком ярких — и, следовательно, слишком жарких — для хищников с более темным панцирем.
Розовая волчья улитка, оснащенная микрочастицей из Мичигана (Изображение: Инхи Ли)
С P. hyalina , охраняемым видом, о прямом контакте не могло быть и речи, поэтому вместо этого команда использовала магниты, чтобы прикрепить M3 к верхней и нижней сторонам листьев, где в течение дня спали ночные улитки.
Результаты, кажется, подтверждают теорию.В районах, где спал P. hyalina , было зарегистрировано в 10 раз больше солнечного света, чем в охотничьих угодьях розовых улиток-волков — данные, которые было бы значительно сложнее собрать без помощи M3.
«M3 действительно открывает окно того, что мы можем сделать с поведенческой экологией беспозвоночных, — заявил Ó Фойгил, — и мы просто у подножия этих возможностей».
Следующим шагом является проект, запланированный с октября прошлого года, в котором M3 будет использоваться для отслеживания миграции бабочки-монарха, вместе с подробностями об условиях окружающей среды, с которыми они сталкиваются в пути — на случай, если приклеить компьютеры к улиткам слишком легко .®
Malone Jumping Slug | Орегон Уайлд
Около
Hemphillia malonei — один из нескольких видов прыгающих слизней, обитающих на северо-западе Тихого океана. Этот своеобразный брюхоногий моллюск является эндемиком районов Колумбийского ущелья и Маунт-Худ в Вашингтоне и Орегоне (что означает, что это единственные места на земле, где его можно найти). Прыгающих слизней Malone часто бывает трудно обнаружить, так как они маленькие и обычно прячутся на нижней стороне коры твердой древесины на лесной подстилке.Слизни играют важную роль в экосистемах как переработчики органических веществ, потребляя в основном разлагающуюся и живую листву. Одна из самых интересных характеристик этой пули — ее защитный механизм. Когда он сталкивается с хищником, таким как улитка, жук или саламандра, он сворачивается и быстро распрямляется, плюхаясь и позволяя себе упасть с того места, где он сидел. Это не только скрывает слизня от взгляда, но и прерывает его слизистый след, не позволяя хищникам определить, куда он пошел.
Зачем нужна наша помощь?
Прыгающему слизню Мэлоуну, чтобы выжить, требуется лесная среда обитания. Зрелые смешанные лиственные и хвойные леса на низких высотах в национальном лесу Маунт-Худ являются идеальной средой обитания для этой слизни. Поскольку он имеет такой небольшой географический диапазон, разрушение среды обитания может оказать на него особенно сильное воздействие, особенно из-за того, что его способность к рассеянию очень ограничена. Считается, что в лесах Тихоокеанского Северо-Запада обитает невероятное разнообразие беспозвоночных, но оно оставалось относительно неизвестным до принятия Северо-Западного лесного плана и исследований, связанных с ним.Чтобы защитить прыгающего слизняка Мэлоуна и других чувствительных моллюсков и насекомых, им подобных, крайне важно, чтобы лесные экосистемы, на которые они опираются, а которые, в свою очередь, зависят от них для правильного функционирования, были как можно более нетронутыми и нетронутыми.
Знаете ли вы?
- Прыгающие слизни — единственные наземные брюхоногие моллюски в США, которые демонстрируют такой защитный механизм.
- В отличие от улиток, которые прячут свои внутренние органы в раковинах, и других слизней, которые удерживают их в полости в ноге, прыгающие слизни имеют мягкий горб на спине, по которому они несут свои органы.На горбине есть небольшая, частично обнаженная раковина, которая не служит никакой цели.
Слизень, прыгающий на верблюдах, в Британской Колумбии, виден в действии:
Спираль Шекспира: По следам улитки в «Короле Лире» и живописи эпохи Возрождения
Университетское издательство Америки
Страниц: 300 • Отделка: 6¼ x 9⅛
978-0-7618-4137-1 • Мягкая обложка • Март 2010 • 56 долларов.99 • (44 фунта стерлингов)
978-0-7618-4893-6 • электронная книга • март 2010 г. • 54,00 долл. США • (42,00 фунта стерлингов)
Франсуа-Ксавье Глейзон — доцент английского языка в Американском университете Бейрута. Его публикации включают «Кристин Бучи-Глюксманн: Шекспир и археология теней», а также статьи об английской литературе эпохи Возрождения в связи с изобразительным искусством.Его текущие исследования сосредоточены на Шекспире, религии и терроре.
Глава 1 Список иллюстраций
Глава 2 Благодарности
Глава 3 Введение
Часть 4 Часть первая: взгляд Шекспира на улитку
Глава 5 1. Знакомство с улиткой
Глава 6 2. От лачуги до раковины
Глава 7 3. Мутатис Мутандис I: От улитки к червю
Глава 8 4. Упадок садовой улитки
Глава 9 5.Mutatis Mutandis II: От червя к раковине
Глава 10 6. Оболочка воскрешения
Глава 11 7. Улитка Девы Марии
Глава 12 8. Открытие спирального квеста
Часть 13 Часть вторая: Возрождающаяся спираль: ослепительно-затемнение
Глава 14 1. Введение: Слепое видение и мышление
Глава 15 2. Ослепительное затемнение в King Lear
Глава 16 3. Заключение: Глаз-спираль: Шекспир — Шарко — Дюрер
Часть 17 Часть третья: Под оком Горго или Медуза-Улитка
Глава 18 1.Перепросмотр и Re: Capitulation
Глава 19 2. Теоретические и апоретические соображения
Глава 20 3. Сон и Макбет
Глава 21 4. Возвращение в Король Лир: Медуза-Улитка
Глава 22 Библиография
— Джулия Рейнхард Луптон, Калифорнийский университет, Ирвин
Спираль одновременно красива и редка.
— Джульетта Флеминг, Нью-Йоркский университет и Кембриджский университет
Захватывающее, по-настоящему исследовательское исследование — объемное и удивительное. Глейзон сочетает в себе необычайный диапазон теоретических оснований, инстинкт к невероятному и освещающему соединению — Шарко и Дюрера, западную мысль и брюхоногие моллюски — с утонченным вниманием к поэтике текста и языка.
— Кристофер Пай, Колледж Уильямса
Спираль Шекспира заслуживает того, чтобы ее прочитали ученые, относящиеся и не относящиеся к шекспировскому «снайперу» (стр. Xix). Книга предлагает критикам выйти из своей методологической оболочки; по этой причине, возможно, — выражаясь словами одного из первых обзоров «Уловки-22», это окажется «великолепным спектаклем, который возмутит почти столько же читателей, сколь и восхитит».
— Английский язык
Что под капотом? Ответ может быть тревожным — Mercury News
ДОРОГАЯ ДЖОАН: У меня проблема с животными, и мне нужно ее решение.
Недавно я немного поработал с машиной, и когда механик поднял мой капот, он обнаружил тайник с дюжиной или около того пустых раковин улиток, лежащих на моем двигателе. Поскольку не было никаких признаков того, что проводка была пережевана, он решил, что это, должно быть, белки.
После недавнего дождя я обнаружил небольшие отпечатки лап на капоте и переднем бампере. Что я могу сделать, чтобы удержать их от использования моей машины в качестве хранилища продуктов? Я считаю, что белки милые и не хотели бы причинять им вред.
Шерил Санчес
Район залива
ДОРОГАЯ ШЕРИЛЛ: Как вы относитесь к крысам? Потому что я думаю, что это скорее крысы, чем белки.
Белки в основном вегетарианцы, они предпочитают орехи, семена и овощи. Они будут есть мясо, в том числе улиток, но не так часто. Если бы это было так, люди, вероятно, с большим энтузиазмом относились бы к суетящимся по их садам белкам.
С другой стороны, крысы любят улиток и любят есть их в темных уютных местах. То, что они не свили гнезда в вашей машине или не пережевывали проводку, вероятно, только потому, что они еще не дошли до этого.
Вы можете попробовать припарковать машину в гараже, предварительно сделав гараж максимально защищенным от крыс, заделав отверстия и подъезды. Однако если ваш гараж похож на мой, это не вариант. Если вы паркуетесь на подъездной дорожке, уберите поблизости вещи, которые могут привлекать крыс, например кормушки для птиц, корм для собак и мусорные баки.
Некоторые люди оставляют свои капоты поднятыми, что лишает двигатель теплого и уютного вида. Другие ставят под машину ведро с шариками от моли. Шарики от моли могут быть токсичными, поэтому, если вы пойдете по этому пути, я бы порекомендовал положить их в нейлоновый мешок и на ночь класть на охлаждаемый двигатель.
ДОРОГАЯ ЖАННА: Чтобы сохранить влагу, мы разбрасываем компост во всех наших садах, но какие-то твари — вероятно, птицы — продолжают выкапывать его на наши тротуары.
Наши тротуары всегда засорены в течение нескольких часов после их подметания. Есть ли что-нибудь нетоксичное, что мы можем разложить возле всех наших тротуаров, чтобы устранить эту проблему?
Дайан Фельдхаммер
Район залива
ДОРОГАЯ ДИАНА: Если это птицы, я не могу придумать ничего, что могло бы помешать им копаться в компосте или мульче.У них нет острого обоняния, поэтому средства для отпугивания запахов не сработают.
Я думаю, однако, что это другое существо. Если в течение дня компост потревожить, вероятно, белки ищут места, где можно закопать орехи. Также это могло быть сочетание птиц и белок. Если в течение дня компост не нарушен, а подстилка производится ночью, скорее всего, это еноты, скунсы или опоссумы, ищущие насекомых.
Возможно, вам лучше всего будет поставить короткую прочную границу забора вдоль тротуара, чтобы предотвратить попадание компоста на тротуар тем, что выходит за пределы вашего двора.
Лапы в нужде
Бутик для любителей животных в медицинском центре для кошек, 3160 Санта-Рита-роуд, Плезантон, проводит 15-ю ежегодную праздничную распродажу животных с 10:00 до 16:00. Суббота.
Поступления от продажи используются для программы «Лапы в нужде», которая помогает оплачивать больных и раненых домашних животных, когда их владельцы не могут себе этого позволить.
Зайдите и посмотрите, что у них есть.
Свяжитесь с Джоан Моррис по адресу [email protected]. Следуйте за ней на Twitter.com/AskJoanMorris.
Индекс видов улиток
Программа просмотра увеличения работает правильно только после загрузки ВСЕХ изображений на этой странице.
Индекс вида
Индекс видов
Blue Topsnail
Calliostoma ligatum
Типичный размер : длина 0,75–1,5
ID: Параллельные синие и белые завитки на раковине
Комментарии: Я часто замечаю синие морские улитки в водах северо-запада, особенно на мысе Область лести.Известно, что эта многочисленная улитка питается губками и другими беспозвоночными. Здесь он изображен на желтой покрытой коркой губке. Время ужина!
Алеутская лунная улитка
Cryptonatica aleutica
Типичный размер : длина 4-5
ID: Белая ступня с коричневыми пятнами или пятнами, светлая раковина.
Комментарий: Уменьшенная версия лунного улитки Льюиса, алеутский лунный ноготь, как правило, покрыт пятнами или коричневыми пятнами на мягком теле.Снято на пляже Санрайз в южной части Пьюджет-Саунд.
Leafy Hornmouth
Ceratastoma foliatum
Типичный размер : длина 2-4
ID: Три характерных изогнутых лезвия.
Комментарий: Листовой рогатый пасть — частый завсегдатай рифов Вашингтона, особенно Пьюджет-Саунд. Эта улитка, как известно, питается банаками и двустворчатыми клапанами. Листовой рогатый пасть в зимние месяцы откладывает почти художественно выглядящие массы квадратных желтых яиц по спирали.
Морское ушко
Haliotis kamtschatkana
Типичный размер : диаметр 6-7
ID: Красновато-коричневый удлиненный панцирь с 5 или 6 отверстиями.
Комментарии: Когда-то изобилующий в водах Северо-Запада, чрезмерно выловленный северный морской морской ушек теперь редко встречается при нырянии.Я никому не скажу, где я нашел эти экземпляры, так как уверен, что какой-нибудь близорукий ныряльщик тоже собирал их.
Oregon Triton
Fusitriton oregonensis
Типичный размер : длина 3-5
ID: Белый панцирь с рядами волосков, образующих спираль.
Комментарии: Орегонский тритон, кажется, очень чувствует себя в водах Вашингтона, поскольку я часто замечаю эту крепкую на вид улитку на большинстве рифов. Раковина этой улитки имеет опушенный вид. Часто наблюдают, как собираются откладывающие колонии желтых яиц на скалах.
Purple Ringtop Snail
Calliostoma Annualatum
Типичный размер : 1-2 высота
ID: Раковина с фиолетовыми и золотыми полосами.Цвет животного оранжевый с коричневым.
Комментарии: Красивая фиолетовая улитка с кольцевой вершиной — излюбленный объект многих фотографов Северо-Запада благодаря своим ярким цветам и тому факту, что она не может уплыть. Отмечу только фиолетовую вершину рифа, населяющую районы скалистых рифов с хорошим течением в районе мыса Лести.
Гладкая бархатная улитка
Velutina prolomgata
Типичный размер : длина 1
ID: Полосатая мантия и ярко-оранжевый край вокруг ступни.
Комментарии: Я заметил эту маленькую, но характерную улитку только во время погружения в районе мыса Лести. Этот экземпляр был найден у Грибной скалы на глубине около 40 футов.
Amphissa морщинистая
Amphissa columbiana
Типичный размер : длина 1
ID: Многотонный панцирь с небольшими «волосками» на части раковины, небольшого размера.
Комментарии: Это изображение является предположением, но я считаю, что это морщинистая амфисса. Я отмечаю этот или аналогичный вид в водах Вашингтона. Снимок сделан у Грибной скалы на мысе Фалттери.
Лунный гвоздь Льюиса
Euspira lewisii
Типичный размер : длина 6-11
ID: Широкая ножка. Раковина большая, обычно белая. Открытая «трубка» (пупок). Выдвижные «рожки» (operculum) на коричневой подкладке. Никаких пятен на теле.
Комментарий: Эта огромная улитка отвечает за откладывание яиц в «песочных воротниках», которые выглядят как круглые выброшенные пластиковые воротники. Этот луковичник продирается сквозь песчаные грунты и питается моллюсками. Зубы лунного ногтя могут пробивать твердые клановые раковины. Снимок сделан на пляже Санрайз, Саут-Пьюджет-Саунд.
|
Различный Topsnail
Calliostoma variegatum
Типичный размер : 1-1.5 длина
ID: Беловатый корпус с коричневыми круговыми отметинами. Нога животного белого цвета с коричневыми отметинами.
Комментарии: Я видел эту улитку только при нырянии в водах Британской Колумбии, хотя она простирается до Мексики. Питается гидрокораллом и мшанками. Снято в заливе Эсперанса на западной стороне острова Ванкувер.
Baetic Olive
Olivella baetica
Типичный размер : 0.5 длина
ID: Блестящий удлиненный корпус.
Комментарий: Я не уверен, влюблены ли эти две оливки баэтики или дерутся, но они вместе оставляют следы на песке у мыса Три дерева на глубине около 100 футов. Раковины этих и других подобных оливковых улиток высоко ценились коренными американцами.
Клетчатый волосяной гвоздь
Trichotropsis cancellata
Типичный размер : 1-1.5 длина
ID: Уникальная оболочка с щетинками, расходящимися в одном направлении.
Комментарии: Я должен очень внимательно искать этих маленьких улиток, чтобы найти их — и когда я их нахожу, они находятся в непосредственной близости от трубчатых червей. Снято в Браунинг-Пасс, Британская Колумбия.
Dusky Turbin
Tegula pulligo
Типичный размер : 1-2 ширины
ID: Гладкая оболочка, инкрустированная красно-коричневой краской.
Комментарии: Я часто замечаю этот снейп на открытых участках и обычно неглубокий. Я обычно нахожу его на камнях или водорослях, как здесь. Снято в Хант-Рок, Британская Колумбия.
Nuccella lamellosa
Типичный размер : 2-3 длины
ID: Раковина с оборками, но размеры оборок могут варьироваться. Цвет от белого до коричневого, иногда с полосами.
Комментарии: Я лишь изредка замечаю витиевато выглядящий оборчатый борзый винтик. Чаще нахожу коричневые вариации этого вида. Снимок этого рюшечника был сделан над валом Далко в Пьюджет-Саунд.
Channeled Dogwinkle
Nucella canaliculata
Типичный размер : длина 0,75-1,5
ID: Видимые гребни или канал в раковине, без цветных полос.