Телевизоры хайер кто производитель: Haier: бренд, производитель, дистрибьюторы Haier

Содержание

Samsung, Sony или китайский Haier? В Минске провели слепой тест телевизоров

Телевизор — это центр семьи, и с этим утверждением трудно поспорить. Вокруг него многие члены семьи проводят половину своего домашнего времени. Мы смотрим по телевизору новости, проигрываем с флешки или подключенного компьютера сериалы, фильмы или мультики, смотри ролики из Ютуба… Но как выбрать телевизор? Прислушаться к совету друзей? Читать в интернете многочисленные профессиональные тесты и отзывы покупателей? Прислушаться к советам консультанта в магазине? А как узнать, стоит ли платить за дорогой Sony? Или выбрать что-то среднее, типа LG или Samsung? А может, вообще сэкономить и выбрать китайский бренд, говорят, они сейчас не хуже других? Чтобы ответить на все эти вопросы, сеть магазинов бытовой техники «5 элемент» организовала необычный эксперимент — слепой тест телевизоров. Для этого в тестовой зоне установили десять телевизоров двух популярных в Беларуси размеров: пять 32-дюймовых телевизоров и еще пять телевизоров с диагональю в 55 дюймов. Логотипы телевизоров заклеили — и понять, где какой телевизор, стало невозможно.

— Все тестируемые телевизоры одного класса, а их экран сделан по одной и той же LED-технологии, у всех стандартные заводские настройки, — рассказали организаторы. — Тестируем только картинку. На всех телевизорах будет запущен одинаковый ролик.

Для участия в тесте пригласили два десятка белорусских журналистов, известных блогеров и тех, кто к телевидению имеет самое непосредственное отношение, — телеведущих. В тесте принял участие и корреспондент «Комсомолки». Всем нам предстояло оценить каждый телевизор по пятибалльной шкале по четырем параметрам: контрастность, яркость, угол обзора и качество отображения динамических сцен. Надо отметить, что это оказалось не так просто. И если с яркостью и контрастностью проблем не возникало, то для определения лучшего угла обзора пришлось обойти все телевизоры не один раз.

Самый субъективный параметр, на наш взгляд, — это качество отображения динамических сцен.

То есть плавность в быстрых моментах фильма — драках, погонях. Тем не менее все участники сделали свой выбор, и организаторы занялись подсчетом результатов. А с телевизоров сняли «маскировку» — оказалось, что мы оценивали телевизоры пяти брендов: «Витязь», Haier, LG, Samsung, Sony и TCL.

Наконец, результаты подсчитаны. Лидером среди 32-дюймовых телевизоров предсказуемо оказался Sony. А второе место неожиданно завоевал телевизор китайского бренда TCL. Лишь на один пункт от него отстал LG. Среди 55-дюймовых моделей лучшим оказался телевизор марки LG. И здесь тоже второе место неожиданно занял китайский бренд TCL, на два пункта отстал телевизор марки Sony.

Белорусский «Витязь» в тройку призеров не попал. Однако анализ полученных данных показал, что по отдельным параметрам он не уступает некоторым своим собратьям. Так, по яркости он не уступил телевизорам LG и Samsung, а по качеству отображения динамических сцен находится на уровне LG. Еще один аутсайдер нашего теста — китайский Haier.

Но по контрастности он сравнялся с Samsung, а по яркости и вовсе обогнал.

— Для нас результаты оказались неожиданными, — рассказал коммерческий директор ЗАО «Патио» Александр Авакян. — Потому что результаты нашего сегодняшнего слепого тестирования абсолютно не совпадают с марками, которые лидируют по продажам. Абсолютным сюрпризом для нас стала марка TCL, которая сейчас занимает по продажам только четвертое место, причем с огромным отрывом, а в слепых тестах он стал вторым. Это как раз тот самый случай, когда, можно отбросить давление рекламы и сложившейся репутации. Оказалось, что сила бренда все еще влияет на покупательское поведение. И это повод еще раз задуматься о таком показателе, как «цена-качество».

Реклама.

Китайская компания Haier откроет в Татарстане производство телевизоров

Производитель бытовой техники из Китая Haier («Хайер») откроет в Татарстане производство телевизоров. Оно будет расположено на территории Камского индустриального парка (КИП) «Мастер» в Набережных Челнах, где специалисты Haier заканчивают строительство завода по производству холодильников. Об этом сегодня сообщил журналистам премьер-министр Татарстана Ильдар Халиков.

«Компанией Haier принято решение о начале на этой же площадке производства не только холодильников, но и телевизоров, а также о создании в Набережных Челнах в непосредственной близости от основного завода центра разработок Haier», — сказал господин Халиков. По его словам, Татарстан заинтересован в расширении сотрудничества с Haier. «Компания Haier является лидером по производству бытовой техники с объемом производства более 33 млрд долларов и которая еще и более укрепилась на американском рынке после приобретения подразделения «Дженерал Электрик» по производству бытовой техники», — пояснил Халиков.

По данным Агентства инвестиционного развития Татарстана, компания Haier заканчивает монтаж оборудования на площадке завода по выпуску холодильников в Набережных Челнах, запуск производства запланирован на апрель 2016 года. Производственные мощности завода составят 250 тыс. холодильников в год с увеличением до 500 тыс. холодильников в год, объем инвестиций в проект составляет более $55 млн. Часть продукции компания планирует экспортировать в страны Евразийского экономического союза, локализации компонентов на заводе холодильников Haier на первом этапе составит 40% с увеличением до 60-70% на втором этапе.

Haier — производитель бытовой техники из КНР, входит в 100 крупнейших брендов мира по версии World Brand Laboratory. Корпорация имеет более 7 тыс. сертификатов на запатентованные технологии, включая 1234 инновационных изобретения и права интеллектуальной собственности в отношении 589 типов современного программного обеспечения.

КИП «Мастер» создан в 2004 году в Набережных Челнах на бывших заводских площадях «Камаза». В 2013 году после завершения пятого этапа развития, площадь парка составила более 643,6 тыс. кв. метров, здесь работают более 250 резидентов, на новых производствах трудоустроено около 5 тысяч человек.

ТАСС


Производитель бытовой техники Haier презентует

Производитель бытовой техники Haier делится новостью — телевизор Smart TV DX с диагональю 32”.
Эта модель идеально подойдет для небольших гостевых комнат, детских спален, кухонь или для обустройства дач. В ближайшее время появятся и другие диагонали — от 43” до 65” — следите за новостями!

Кондиционеры Haier можете купить в магазине или с установкой можете купить у нас. 

Время работы магазина Haier в Нижнем Новгороде
— Пн — Вс — 10.00 — 22.00
Адрес магазина Haier в Нижнем Новгороде
— ТЦ «МЕГА Нижний Новгород»
Нижегородская обл., Кстовский р-н., д. Федяково, трасса «Москва-Казань», СТЦ «МЕГА»

Как добраться в магазин Haier

  • От ст. м «Щербинки»: автобус №215, 216
  • От ст. м.«Пролетарская»: маршрутное такси №300
  • От ст. м. «Автозаводская»: автобус №370
  • От ост. «Сенная»: автобус №371
  • От ост. «Щербинки»: автобус №374
Из г. Кстово: автобус №272 .
С телевизором Smart TV DX под кондиционером Haier будете проводить вечера в комфортной обстановке.

ДЛЯ КИНОВЕЧЕРОВ
Благодаря Android TV вы можете смотреть сериалы и фильмы на самых популярных сервисах: OKKO, ivi, Megogo, Netflix и не только. Или найти что-то в интернете с помощью Google Ассистента .

ДЛЯ ИДЕАЛЬНОГО ЗВУКА
Функция Simulated Surround Sound создает эффект объемного звучания с помощью программного обеспечения. Это особенно понравится любителям музыкальных программ и каналов.

ДЛЯ ПОДКЛЮЧЕНИЯ УСТРОЙСТВ
Bluetooth 5.0 поможет подключать различные устройства и передавать данные со смартфона или планшета. Большое количество портов подойдет для игровых консолей, саундбаров или домашних кинотеатров.

3 ГОДА ГАРАНТИИ НА ТЕЛЕВИЗОРЫ
При покупке телевизоров до 31 декабря 2021 года вы получаете 3 года гарантии.

ТОП-15 лучших моделей и какую выбрать

Автор Максим Кириченко На чтение 17 мин Просмотров 3.4к. Обновлено

В последнее время многих покупателей стали интересовать телевизоры фирмы Haier. Ассортимент их настолько большой, что люди начинают теряться, какой лучше выбрать.

Хочется, чтобы он был высокого качества, надежный, прослужил долгое время и имел приемлемую стоимость.

Если вы хотите приобрести экземпляр, который не выйдет из строя спустя несколько лет, то познакомьтесь с нашим обзором.

В нем мы расскажем только о тех телевизорах фирмы Haier, покупка которых вас не разочарует в 2021 году.

Рейтинг составлен на основе анализа отзывов потребителей и оценок специалистов.

Рейтинг ТОП-15 лучших телевизоров Haier 2021 года

Как выбрать телевизор Haier?

Прежде чем покупать китайский телевизор Haier в 2021 году, необходимо обратить внимание на следующие параметры:

  • Тип экрана. Здесь важны матрица, разрешение, контрастность, частота и яркость.
  • Дизайн. Кроме плоских панелей есть еще и полукруглые, с ободком или подсветкой.
  • Качество звука. Влияет на восприятие кино.
  • Вид операционной системы для Смарт-ТВ. Здесь речь идет об удобстве интерфейса и наличии дополнительных опций.

ТОП-3 лучших телевизоров Haier в соотношении цена/качество

Предлагаем вам рейтинг лучших телевизоров фирмы Haier, составленный на основе отзывов потребителей в соотношении цена/качество.

Haier LE24K6000S 23.6″ (2018)

Телевизор LED Haier LE24K6000S имеет тонкий черный корпус и экран на основе матрицы Direct LED с разрешением 1366х768 пикселей.

Устройство подходит для установки на кухне или в спальне и имеет цифровой тюнер DVB-T2. За счет тюнера модель принимает кабельный, эфирный, спутниковый цифровой телесигналы даже без помощи внешних ресиверов.

Углы обзора экрана устройства составляют 160 градусов по вертикали и 150 градусов по горизонтали.

Установить устройство в комнате можно как при помощи настольной подставки, так и установить на стену креплением VESA.

Телевизор имеет порт USB, к которому можно подсоединить накопитель для записи телевизионных передач или проигрывания мультимедийных файлов.

Два порта HDMI обеспечивают взаимодействие устройства с компьютером или игровой консолью.

Характеристики:

  • Диагональ — 24 дюйма.
  • Разрешение — 1366х768.
  • Частота обновления — 50 Гц.
  • Мощность акустики — 6 Вт.

Четкая картинка.

Невысокая цена.

Чистый звук.

Тихие динамики.

Неудобный пульт.

Haier LE43K6000SF 42.5″ (2018)

LED-устройство Haier удобно тем, что под пользователя подстраиваются не только формат и контрастность картинки, но и воспроизведение каналов

. Благодаря функции TimeShift вы можете поставить просмотр на паузу и позднее продолжить с того же момента.

Изделие снабжено встроенным таймером отключения и запуска. Кроме телевизионных телеканалов вы можете проигрывать медиафайлы со сторонних устройств, подсоединённых через USB.

Экран, диагональю 43 дюйма поддерживает формат Full HD, а это значит, что вы будете просматривать фильмы в высоком разрешении без потери качества.

Модель Haier имеет опцию Plug&Play, поэтому при первом включении настройки не потребуются. Встроенный телетекст поможет сориентироваться при выборе телеканалов и в целом в процессе использования.

Характеристики:

  • Диагональ — 43″.
  • Разрешение — 1920х1080.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность звука — 8 Вт.

Красивая картинка.

Хороший звук.

Удобное меню.

Не работает цифровой тюнер.

Углы обзора с полутонами.

Haier LE24K6500SA 24″ (2019)

Порадуйте себя просмотром любимого кино с телевизором марки Haier LE24K6500SA. Вас приятно удивит хорошее качество изображения. Картинка на экране будет контрастной и яркой.

Оценить ее в полной мере вам позволит экран в 24 дюйма.

Модель оснащена понятным русифицированным меню и функцией Смарт-ТВ, которая обеспечивает возможность поиска фильмов, видеозаписей и другого контента в интернете.

Для максимального удобства эксплуатации устройство дополнено встроенным таймером автоматической активации и отключения в установленное время.

Устройство обладает встроенной акустической системой NICAM, которая представлена двумя динамиками мощностью 6 Вт. HDMI-разъем и два USB порта позволяют воспроизводить видео с флеш-накопителей или подключать внешние устройства.

Характеристики:

  • Диагональ — 24″.
  • Разрешение — 1366х768.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность — 6 Вт.

Хорошая картинка.

Понятное меню.

Приемлемая цена.

Смарт-ТВ тормозит.

Нет голосового управления.

ТОП-3 лучших телевизоров Haier 4K UHD

Телевизоры с 4К Ultra HD фирмы Haier отличаются доступной ценой и отличными техническими характеристиками. Ниже представлены лучшие модели этой компании в высоком разрешении.

Haier LE43K6700UG 43″ (2020)

Телевизор марки Haier LE43K6700UG имеет диагональ 43 дюйма и обладает безрамочным дизайном, что позволяет получить больше пространства экрана для удобного просмотра и погружения в происходящее на нем.

В модели предусмотрено голосовое управление, позволяющее найти необходимый контент в зависимости от личных предпочтений. Благодаря поддержке Смарт-ТВ есть возможность выбрать качественный контент для просмотра, фильтровать видео, чтобы вы смогли получить то, что хотите.

Технология Chromecast позволяет модели транслировать видео с мобильного телефона, планшета или компьютера, применяя любое приложение с поддержкой данной технологии.

Устройство под управлением Андроид не требует дополнительного оборудования за счет встроенных тюнеров, для просмотра каналов достаточно включения автопоиска.

Характеристики:

  • Диагональ — 43″.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность звука — 16 Вт.

Хорошая картинка.

Невысокая цена.

Удобное меню.

Неудобный пульт.

Временами пропадает звук при воспроизведении больших файлов в 4К.

Haier LE55K6500U 54.6″ (2018)

С устройством Haier LE55K6500U вы полностью погрузитесь в происходящее на экране. Модель имеет супер узкую рамку, изящную подставку и идеально впишется в дизайн любой гостиной.

Вы будете смотреть фильмы на огромном 55 дюймовом экране и полностью погрузитесь в атмосферу происходящего.

За счет высокого разрешения 1080 Full HD картинка будет четкой и в ней будут проработаны все детали. Вам больше не нужно ждать выхода любимого шоу, со Смарт-ТВ вы в любое время посмотрите контент согласно вашим предпочтениям.

За счет поддержки стандарта DVB-T2 у вас появится возможность смотреть цифровые каналы с изумительной картинкой и при этом вам не нужно покупать дополнительную приставку.

Характеристики:

  • Диагональ — 54,6″.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Мощность звука — 20 Вт.
  • Частота обновления — 50 Гц.

Хорошее изображение.

Качественный звук.

Удобное меню.

Нет блютуза.

Не самый удобный Смарт.

Haier LE55K6700UG 55″ (2020)

Телевизор с поддержкой 4К обеспечивает невиданную глубину и детализацию, благодаря 33 миллионам пикселей, это в два раза больше, по сравнению с 2К устройствами.

Встроенная технология Hisense 4K Al Upscaler позволяет вам насладиться детализированным и четким изображением независимо от разрешения контента.

При помощи алгоритмов на основе искусственного интеллекта данная технология анализирует картинку кадр за кадром и подстраивает пиксели с подходящими тенями и яркостью, создавая идеальное 4К-изображение.

Модель оборудована акустической системой, которая представлена двумя динамиками, мощностью 8 Вт. Это позволяет слушать музыку и смотреть кино с оптимальной громкостью без применения колонок или гарнитуры.

При помощи разъемов USB и HDMI к устройству можно подключить внешние носители информации.

Характеристики:

  • Диагональ — 55″.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность звука — 8 Вт.

Хорошая картинка.

Большой экран.

Приемлемая стоимость.

Неудобный пульт.

Тормозит Смарт-ТВ.

ТОП-3 лучших телевизоров Haier 32-43″

Компактные модели телевизоров отлично подойдут для установки в спальне или малогабаритной гостиной, а более крупные могут стать центром внимания в зале или гостиной.

Haier LE43K6500SA 43″ (2019)

Модель Haier LE43K6500SA показывает четкое и яркое изображение с реалистичными цветами. Благодаря технологии цифрового шумоподавления устраняются шум и помехи, поэтому картинка на экране безупречно качественная.

Аудиосистема устройства состоит из двух восьми ваттных динамиков и стерео тюнера.

Она воспроизводит разборчивую и четкую речь актеров в кино, дикторов в новостях и убедительные спецэффекты в блокбастерах.

Данная модель оборудована разъемами LAN и модулем Wi-Fi. Они обеспечивают беспрепятственный доступ в интернет по кабелю и беспроводным методом. Вы можете выбрать подходящий для себя вариант для просмотра кино, сериалов и другого медиаконтента с интернет-ресурсов.

Для взаимодействия с разными внешними устройствами в телевизоре предусмотрены порты HDMI и USB. Они позволяют соединить флешки и портативные жесткие диски игровые консоли и плееры.

Характеристики:

  • Диагональ — 43″.
  • Разрешение — 1920х1080.
  • Мощность звука — 16 Вт.
  • Мощность — 84 Вт.

Качественная картинка.

Отличный звук.

Хорошая цена.

Хлипкая рамка.

Смарт-ТВ тормозит.

Haier LE32K6600SG 32″ (2020)

Модель Haier LE32K6600SG займет достойное место в небольшой гостиной, спальне, на кухне. Ее также можно использовать как компьютерный монитор.

Устройство устанавливается на подставке или размещается на стене при помощи креплений VESA, которое нужно приобретать отдельно.

С этим телевизором в разрешении HD вы будете наслаждаться любимыми программами в высокой четкости. За счет USB разъемов устройство Haier воспроизводит музыку, видео и фотографии прямо на вашем телевизоре.

За счет многопозиционных разъемов HDMI вы сможете подключить все свои устройства для дополнительного развлечения. Также легко вы сможете переключиться с одного устройства на другое, чтобы ваши близкие наслаждались мультимедиа.

Функция Time Shift позволит поставить фильм или передачу на паузу.

Характеристики:

  • Диагональ — 32″.
  • Разрешение — 1366х768.
  • Частота обновления — 50 Гц.
  • Мощность звука — 16 Вт.

Качество сборки.

Хороший звук.

Удобное меню.

Цветовая палитра.

Нет DVB-T2.

Haier LE32K6500SA 32″ (2019)

Устройство Haier отлично подойдет для маленькой гостиной, кухни или спальни. Благодаря встроенным цифровым тюнерам вам откроется доступ к сотням увлекательных каналов.

А чтобы просматривать фильмы прямо с флешки вы можете использовать USB разъем.

Наслаждайтесь своими любимыми сериалами в HD качестве на контрастном дисплее 32 дюйма. Звучать они будут также изумительно за счет мощных фронтальных динамиков.

За счет таймера сна модель отключится сама, если вы укажете время отключения заранее. А чтобы не пропустить ни одной секунды любимой передачи примените функцию TimeShift и ставьте прямой эфир на паузу.

Встроенные Wi-Fi обеспечивает устройству беспроводной доступ в интернет. Это даст возможность подключить его к глобальной сети, даже если роутер находится в другой комнате.

Характеристики:

  • Диагональ — 32″.
  • Разрешение — 1920х1080.
  • Частота обновления — 50 Гц.

Приемлемая стоимость.

Качественный звук.

Удобное меню.

Неудобный пульт.

Хлипкие ножки.

ТОП-3 лучших телевизоров Haier 50-55″

Ниже представлены лучшие телевизоры с диагональю 50 дюймов, которые сегодня являются самым популярным сегментом. Описания в ТОПе составлены, опираясь на отзывы покупателей и учет соотношения цены и качества.

Haier 55 SMART TV BX 55″ (2020)

Телевизор Haier 55 SMART TV BX устанавливается на подставку и обладает возможностью крепления на стене. Это функциональное устройство, предназначенное не только для трансляции телевизионных программ: за счет использования системы Андроид вы получите идеальную модель для поиска и воспроизведения контента из онлайн-ресурсов, а также с мобильных телефонов.

Благодаря встроенному Wi-Fi обеспечивается быстрое соединение с беспроводными сетями, что позволяет устройству легко находить информацию в интернете.

Изделие обладает простым оформлением и не содержит никаких изысков, что делает его незаменимым атрибутом для дизайна любой гостиной.

Матрица экрана имеет диагональ 55 дюймов и подсвечивается светодиодами, что позволяет достичь оптимального уровня яркости и контрастности.

Характеристики:

  • Диагональ — 55 дюймов.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность акустики — 20 Вт.

Четкая картинка.

Хороший звук.

Приемлемая стоимость.

В меню бывают подвисания.

Не самый удобный Смарт-ТВ.

Haier LE50U6900UG 50″ (2020)

Устройство Haier LE50U6900UG построено на основе современной ЖК-панели и имеет сверхвысокое разрешение. Оно делает ролики, видеофильмы и передачи реалистичными, благодаря ярким и насыщенным краскам и отличной детализации.

За счет поддержки технологии HDR модель в точности передает кинематографические спецэффекты.

Кроме этого, она увеличивает статическую контрастность и создает эффект глубины изображения.

Телевизор выполнен на основе операционной системы Андроид, которая предоставляет быстрый доступ к популярным сервисам онлайн-трансляций. Вы можете добавлять в меню устройства любые приложения, загружая их из Плей Маркета.

Встроенный голосовой помощник распознает команды и позволяет вам сразу найти интересный контент. Также модель поддерживает дистанционное управление при помощи мобильного телефона.

Характеристики:

  • Диагональ — 50 дюймов.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления экрана — 60 Гц.
  • Мощность звука — 16 Вт.

Предельно легкое меню.

Хорошая картинка.

Качественный звук.

Неудобный пульт ДУ.

Хлипкие ножки.

Haier LE55U6900UG 55″ (2020)

Блеклая и плоская картинка на экране ТВ портит половину удовольствия от просмотра любимого кино. С телевизором Haier LE55U6900UG вы сможете забыть об этом, ведь он имеет подсветку Direct LED, которая добивается от изображения лучшей контрастности. И это только начало его достоинств.

Модель поддерживает разрешение сверх чёткого изображения 4К, поэтому каждый кадр детализированный как в кинотеатре.

Также устройство поддерживает режим с широким динамическим диапазоном: вы насладитесь идеальной передачей цветов.

Функция Смарт-ТВ позволит прямо с телевизора выйти в интернет. Вы можете посещать онлайн-кинотеатры и просматривать на большом экране уникальный контент, играть в приложения и общаться в социальных сетях.

Смарт-ТВ расширяет возможности управления контентом и превращает устройство в развлекательный мультимедийный центр.

Характеристики:

  • Диагональ — 55 дюймов.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность акустики — 20 Вт.

Качественное изображение.

Современный дизайн.

Быстрый Смарт-ТВ.

Неудобный пульт.

Хлипкие ножки.

ТОП-3 лучших телевизоров Haier со Smart-TV

Мы собрали рейтинг лучших моделей телевизоров со Смарт-ТВ, которые даже при своей невысокой стоимости смогут подарить вам много часов приятного просмотра любимых сериалов и шоу.

Haier LE65K6700UG 65″ (2020)

Haier LE65K6700UG обладает классическим дизайном: глянцевая черная панель с соотношением сторон 16:9 и узкими рамками около дисплея.

Устройство можно установить на две комплектные ножки. Они достаточно широкие и находятся друг от друга на расстоянии 140 см, что обеспечивает устойчивость модели.

На задней панели телевизора находятся разъемы, расположенные в двух раздельных зонах. ИК-приемник расположен в нижнем левом углу. На нем есть небольшой джойстик для управления, если пульт ДУ случайно разрядится.

Сам пульт изготовлен в обычном форм-факторе, но есть отдельные кнопки для быстрого запуска YouTube. За звучание устройства отвечают два динамика, мощностью 20 Вт.

В телевизор встроена матрица Direct LED, которая обеспечивает контрастное и яркое изображение по всей поверхности экрана с глубоким черным цветом.

Характеристики:

  • Диагональ — 65″.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность акустики — 20 Вт.
  • Мощность — 170 Вт.

Современный дизайн.

Супер звук.

Качество изображения.

Нет HDR поддержки.

Меню тормозит.

Haier LE65S8000UG 65″ (2020)

Выполненный в корпусе серого цвета телевизор марки Haier LE65S8000UG может украсить любое помещение. Размер диагонали его экрана составляет 65 дюймов, а разрешение самого устройства 3840х2160 пикселей.

Модель функционирует под управлением платформы Андроид. Применяя Смарт-ТВ вы получите доступ к неограниченному количеству телевизионных каналов и мультимедийного контента.

Устройство поддерживает функции воспроизведения с внешних носителей и записи видео. Также обращает на себя внимание присутствие слота для карт памяти SD и Bluetooth-модуля.

Устройство также поддерживает много дополнительных функций. Настенное крепление телевизора осуществляется при помощи специального крепления VESA, но ничто не помешает вам использовать и настольную подставку.

Характеристики:

  • Диагональ — 65 дюймов.
  • Разрешение — 3840х2160 пикселей.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность акустики — 20 Вт.

Шустрый Смарт-ТВ.

Приемлемая цена.

Нет засветов.

Тяжело закрепить на стене.

Неудобный пульт.

Haier LE65Q6500U 64.5″ (2018)

С LED телевизором Haier LE65Q6500U вы придете в восторг от потрясающей графики. Смотрите любимые кино и шоу на большом 65 дюймовом экране. Устройство подарит вам прекрасную передачу цветов и несравненный контраст.

Благодаря высокому разрешению 4К UHD вам гарантируется максимально четкая картинка с проработкой всех деталей.

Вы можете смотреть все, что пожелаете с функцией Смарт-ТВ и в любое время найти контент, который будет соответствовать вашим желаниям. При помощи Wi-Fi вы без труда подключите телевизор к интернету.

Благодаря поддержке стандарта DVB-T2 у вас появится возможность смотреть цифровые каналы с качественной картинкой и вам не потребуется дополнительная приставка.

Два USB входа дадут вам возможность воспроизводить кино с флешки, жесткого диска или мобильного устройства. Также вы можете остановить эфир и вернуться к просмотру в любое удобное для вас время.

Характеристики:

  • Диагональ — 64.5″.
  • Разрешение — 3840х2160.
  • Частота обновления — 60 Гц.
  • Мощность звука — 16 Вт.

Хорошая картинка.

Объемный звук.

Приемлемая цена.

Трудно закрепить на стене.

Неудобный пульт ДУ.

Отзывы покупателей

Рейтинг бренда/модели Количество проголосовавших Будьте первым, чтобы оставить отзыв.

{{{ review.rating_title }}} Показать еще Добавьте свой отзыв!

Заключение

Прежде чем выбрать телевизор для дома, советуем учесть все перечисленные рекомендации.

Следуя им, вы выберете ту модель, которая оптимально подойдет под ваши требования.

Но прежде чем решить, какой телевизор вам лучше купить, определитесь с размером экрана, а потом уже переходите к изучению других параметров.

Полезное видео

Из видео вы ознакомитесь с обзором телевизора Haier:

О компании Haier.

История и развития • Кондиционеры Haier

   Компания Haier пришла на российский рынок в 2007 году. К этому моменту Haier уже был одним из ведущих производителей бытовой техники в мире, глобальной корпорацией с производственными площадками и научно-исследовательскими центрами в Европе, Северной Америке, Азии, на Ближнем Востоке и в Африке.

   Первое знакомство российских потребителей с продукцией компании Haier состоялось на масштабной Национальной выставке Китая в России. В то время компания поставляла на российский рынок в основном крупную бытовую технику – холодильники и стиральные машины. За 9 лет официальное представительство Haier Group в России проделало огромную работу. Теперь ассортимент продукции Haier представлен более чем 100 моделями бытовой техники и электроники, от морозильных камер и газовых котлов до телевизоров и смартфонов. Сейчас Haier прочно ассоциируется с безупречным качеством по разумной цене.

   Однако цель компании — не только повышение продаж, но и локализация Haier в России. Именно поэтому в марте 2014 года компания Haier начала строительство своего первого российского завода. В качестве производственной площадки был выбран Камский индустриальный парк «Мастер» в Набережных Челнах. Этот завод стал первым совместным российско-китайским проектом, не имеющим отношения к сырьевой промышленности.

   Завод Haier в Набережных Челнах поистине масштабный проект. Инвестиции в него превыcили 55 миллионов долларов США. Сверхсовременное производство оборудовано итальянскими линиями и инновационными роботизированными системами. На первом этапе производственные мощности завода составили 250 тысяч единиц, на втором — мощности планируется довести до 500 тысяч единиц. Технику, созданную на новом заводе Haier в России, смогут приобрести не только отечественные потребители, но и покупатели из стран ближнего зарубежья.

   Суть стратегии Haier во всем мире — новейшие технологии и передовой опыт. Поэтому компания уделила особое внимание не только высокотехнологичному оснащению завода (на предприятии используется уникальная производственная модель, не имеющая аналогов в России), но и обеспечению сотрудников уникальными знаниями. Так, например, для обучения квалифицированных кадров специально открылся учебный центр Haier в Набережных Челнах, кроме того, российские специалисты прошли стажировку на заводах Haier в КНР, в провинции Шаньдун. К 2017 году на заводе в Набережных Челнах планируется создать более 1800 рабочих мест, как за счет собственных мощностей, так и за счет аутсорсинга.

   При производстве техники Haier также заботится об охране окружающей среды. Ради защиты экологии компания отказалась от технологии окраски, загрязняющей воду. Вместо нее применяется металл с особым сверхпрочным покрытием. Более того, на заводе используются методы, которые сводят к минимуму потребление воды и количество выделяемого углекислого газа — а следовательно, и негативное влияние на природу.

   Как и на всех заводах компании Haier в мире, продукция из Набережных Челнов проходит многоступенчатую проверку на каждом этапе, от сборки до отправки покупателю. Возможность брака сведена к минимуму — Haier дорожит своей репутацией и c особой тщательностью относится к вопросам качества. Контролируется не только само производство, но и логистика — для этого в Haier применяют уникальную технологию «Tracebility», позволяющую отследить партию и детали на их пути от момента производства до конечного клиента. Более того, в структуру завода Haier входят две лаборатории, одна из которых проверяет качество товаров, а вторая занимается разработками в области инновационных технологий. Однако проверка качества проводится не только своими силами — и продукция, и все технологические процессы будут регулярно проходить независимый аудит. Недавно Haier приступила к созданию R&D центра в городе Набережные Челны.

   Развивая производство, Haier уделяет особое внимание покупателям и заботится о том, чтобы они могли приобрести надежную бытовую технику без лишних хлопот. В 2016 году был открыт официальный интернет-магазин Haier (haieronline.ru), который предлагает не только весь ассортимент Haier по самым выгодным ценам, но и ряд уникальных сервисов. Например, клиенты интернет-магазина Haier могут заказать доставку покупки на дом совершенно бесплатно. Кроме того, онлайн-магазин предоставляет увеличенные сроки гарантии, услуги бесплатной установки и вывоза старой техники.

   Также Haier серьезно относится и к пост-продажной поддержке клиентов. На сегодняшний день Haier открыл 196 сервисных центров в более чем 120 городах России. Каждый сервисный центр оказывает поддержку на расстоянии от 50 до 100 км в радиусе от своего города. Техника Haier ломается крайне редко, но если такое случится, у покупателей не возникнет проблем с ремонтом и поиском комплектующих.

   Компания активно развивает не только потребительский сегмент — корпорация также активно сотрудничает с российскими компаниями. Сегодня в число партнеров Haier входят такие крупные игроки, как концерн КРОСТ, группа компаний ПИК, МТС, ТЕЛЕ2, МАГНИТ, ДИКСИ и другие.

   Haier – узнаваемый и уважаемый бренд, надежный партнер и производитель, всецело ориентированный на потребности и пожелания покупателей. Эти качества позволили Haier занять почетное 28 место в списке самых конкурентных компаний планеты, и на протяжении семи лет удерживать первое место в рейтинге Euromonitor International среди производителей крупных бытовых приборов. На российском рынке компания Haier достигла впечатляющих результатов – с 2010 года по 2015 год оборот компании в России увеличился в 10 раз. И это не предел — у Haier большие планы, и развитие компании продолжается.

Запчасти и аксессуары для телевизоров Haier

720p 4
4
000 4 9000D
дюймов 720p Led HDTV 720p Led Hdtv дюймов 720p Led HDTV 9 0003 ch 4 4 4
11

14 120003 HDTV

9000C Smart Roku Led 40-дюймовый 1080p Smart Roku Led HDTV L 16 дюймов
1
1
11 48DR3505A
4
56 4 4 A
1 Roku Tv 9000


9000 11 500003 Светодиодный HDTV

5
1080p Led HDTV 9000 9000 50-дюймовый телевизор Chromecast 4k Led Tv Led Tv Chromecast 55D3550A

000 Smart Ro0003 Smart 9000 4 55-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 55E4500RB
D D
1
1
1 Class 9000 Slim Tv
90 011
1
1
1 9000E 900U 900U 4k Ultra Hd Tv Ultra Led
90 011
1
000
000 9005 12 56 14 9004 750004 9004 750004 4k Ultra Hd Led Tv
1 75-дюймовый
1 75-дюймовый
1 75-дюймовый «Lcdtv Combo Best Buy 9000 0004 DVD-плеер оптический и коаксиальный O ЖК-телевизор Wide 911

9S

HL 05 000 000 000 000 000
1 9L0005000 9L0005000 9 000/ HL22FO1A
0004000 000
1
1 9000W
000 000
23 0009 : haier / bg / ntsc / 721 + + + + + + + +0006 9186 9186 9186 # ЖК-телевизор 000 000 9001 Телевизор / mtsc / mt000 / m L26R1A
1 900GA 9L0002
ЖК-телевизор nch 6000 000 000 00 000 000 000 000 ЖК-телевизор Full Hd 10 00 4 16 0006 4 16 9000 Tv / Atsc-тюнер : 40 # ЖК-телевизор Atsc-тюнер 9000 9000 TUNV42 000 9000 9000 TUNV42 000 9000 9000 : 42 # ЖК-телевизор / atsc-тюнер 00 00
00 00 000 Hl42xr1: Haier / BG / ATSC / MTK 9186 1 DVD D ED D D

93

94 HLC Lcd Hd Tv / dvd Расческа

9196 9000Wd Ком 0004000 9183 9183
26
23 9000WR + + + +
1
1
1 HLC6 4 000 5 9000rd4000 HLC6 9000rd4 932R 932R 000 000 000 000 000 000 000 000 000 9116 9116 9116 9116 9116 9114 9114 # ЖК-телевизор Atsc-тюнер AT AT AT плазменный телевизор
1 HTA # Pure Flat Crt Auto 4 HTAR 000 000 000
9000 H4 1 9000 H4 1 9000 21000 # Crt Flat Tele Серебро 000R
15HL25S
15hl25s: 15 # Lcd TV Silver / blac 17
20AL25S
20al25000 9000 9000 blcd 9000 9000 9000 9000 Lcd Tv 24D2000A
24-дюймовый светодиодный HDTV 720p 11
24D2000B
24-дюймовый светодиодный экран 720p HDTV 11
24D2000Tv
24D3000A
24 дюйма 720p Led HDTV 11
24E2000A
24 дюйма 720p Led Hdtv 10
24F20006
24G2000A
24-дюймовый ЖК-телевизор класса 11
24G2000B
24-дюймовый ЖК-телевизор класса 11 90 006
24G2000C
24-дюймовый ЖК-телевизор класса H 11
28E2000A
28-дюймовый светодиодный телевизор 720p 10
32D2000A
32D2000A 11
32D2000B
32-дюймовый 720p Led Hdtv 14
32D2000C
32-дюймовый 720p Led Hdtv 12
12
13
32D2000F
32-дюймовый 720p Led HDTV 13
32D2000G
32-дюймовый 720p Led Hdtv 32-дюймовый 720p Led Hdtv
14
32D3000A
32 дюйма, светодиодный 720p HDTV 11
32D3000B
32 дюйма 7 20p Led Hdtv 9
32D3000BA
32-дюймовый 720p Led HDTV 11
32D3000C
32-дюймовый 32-дюймовый 720p Led 11
32D3000E
32-дюймовых 720p Led HDTV 11
32D3005A
32 дюймов Lcd4000 32 дюймов Lcd4 13
32D3005C
32-дюймовый 720p Led HDTV 13
32D3005D
32-дюймовый 32-дюймовый 720p Led 9005 13
32D3005F
32 дюйма 720p Led HDTV 12
32D3005G 90 005 32-дюймовый светодиодный HDTV 720p 13
32D3005H
32-дюймовый светодиодный HDTV 720p 13
32E2000A
-дюймовый
32-дюймовый светодиодный телевизор 12
32E3000A
32-дюймовый светодиодный HDTV 720p 13
32E3000B
32E3000B
1472011
32-дюймовый светодиодный HDTV 720p 14
32E3000D
32-дюймовый светодиодный HDTV 720p 13
32E3000E
ed 32E3000F
32-дюймовый 720p Led HDTV 13
32E4000RA
32-дюймовый Haier Roku Tv 14
32F2000B
32-дюймовый ЖК-дисплей с разрешением 720p 11
32G2000A
32-дюймовый ЖК-дисплей Hdtv 13
32G2000C
32-дюймовый светодиодный ЖК-телевизор класса (720p) 11
32G2000MA
32-дюймовый светодиодный HDTV класса 32 дюйма 17
39D3005B
39-дюймовый 720p Led HDTV 14
39F2000A
39-дюймовый 720p Led HDTV
40D2500A
40-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 11
40D2500B
40-дюймовый светодиодный 1080p HD телевизор 11
40D3500MA
40 дюймов 1080p Led Hdtv 10
40D3500MB
40 дюймов 1080p Led Hdtv 100004 100004 14
40D3505B
40-дюймовый 1080p Led Hdtv 14
40D3505C
40-дюймовый 1080p Led Hdtv 400003 12
40DR3505A
40-дюймовый 1080p Smart Roku Led Hdtv 14
40DR3505B
40-дюймовый 1080p 12
40E2500A
40-дюймовый светодиодный телевизор 11 9 0006
40E3500A
40-дюймовый 1080p Led Hdtv 12
40E3500B
40-дюймовый 1080p Led Hdtv 16
40G2500A
40-дюймовый светодиодный HDTV класса 18
40G2500B
1080p 60 Гц Led Tv 20
42E3500A
42-дюймовый 1080p Led Hdtv 14
42EP14S
42ep14s: 42-дюймовый плазменный 27
42EP24S
42EP24STV
42-дюймовый плазменный телевизор / ntsc Tun 19
42EP25BAT
42ep25bat: 42-дюймовый плазменный телевизор Enhanc 45
42EP25SAT
42ep25sat: 42 # плазменный телевизор Enhanc 39
42F3500V
42F3500V 42HP25BAT
42hp25bat: 42 # Plasma Tv High D 40
42HP25SAT
42hp25sat: 42 # Plasma Tv High D 000 43 000 43
43E4500RA
43-дюймовый телевизор Haier Roku 14
43E4500RB
43-дюймовый 1080p Led Roku Smart Tv 14
56
1
14
56
1
Светодиодный телевизор Ultra Hd 13
43UF2500B
43-дюймовый светодиодный телевизор Ultra HD класса 4k 15
43UG2500A 900 05 43-дюймовый ЖК-телевизор класса 11
46EP14S
46ep14s: 46-дюймовый плазменный телевизор 2
48D3500A
48D3500A
1080p
48-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 12
48D3500C
48-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 12
48D3505A
48-дюймовый 1080p Smart Roku Led Hdtv 14
48DR3505B
48-дюймовый 1080p Smart Roku Led Hdtv 16
48E2500B
48-дюймовый светодиодный телевизор 11
48E2500C
48-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 10
48E2500D
48 дюймов 1080p Led Hdtv 10
48G2500A
48 дюймов Class Led Hdtv 18 00 Ultra Телевизор 12
49186
49186: 20-дюймовый телевизор Reg Crt 27
49E3505A
49-дюймовый телевизор со светодиодной подсветкой 13 14
49E4500RB
49-дюймовый Haier Roku Tv 16
49UF2500A
49-дюймовый 4k Ultra Hd -дюймовый 4K Ultra Hd Led Tv 14
49UF2500C
49-дюймовый 4K Ultra HD Led Tv 14
49U F2500D
49-дюймовый 4k Ultra Hd Led Tv 14
49UG2500A
49-дюймовый ЖК-телевизор Class 11
49UG2500B
49UG2500B
49UG2500C
49-дюймовый ЖК-телевизор класса 11
49UG2500D
49-дюймовый телевизор класса 4k Ultra HD Tv 11
11
50D3505B
50-дюймовый 1080p Led HDTV 16
50D3505C
50-дюймовый 1080p Led
13
50h3500A
50-дюймовый ЖК-экран HDTV класса 11
50UG2500MA
50-дюймовый HDTV класса 18
50UG2500MB
50-дюймовый HDTV класса 18
50UG3550GMA
55-дюймовый Class Lcd GA 9000 9000G 9000 12
50UG6550GB
50-дюймовый телевизор Chromecast 4k Led Tv 12
50UG6550GC
50UG6550GC
50-дюймовый
55 дюймов 1080p 120 Гц Led Lcd Hdtv 13
55DA5550A
55 дюймов 1080p 120 Гц Led Hdtv 18
18
16
55E3500A
55-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 13
55E3500B
15
55E3500C
55-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 13
55E3500D
55-дюймовый 1080p
55-дюймовый светодиодный HDTV 1080p 15
55E3500F
55-дюймовый светодиодный 1080p 60 Гц HDTV 14
55E4500RA
55-дюймовый телевизор Haier Roku Tv 13
55E4550RA
55-дюймовый Haier Roku Tv 11
55E55 9000 Ultra
55E5500UB
55-дюймовый светодиод класса 4k Ultra HDTV 11
55E5500UC
55-дюймовый светодиод класса 4k U ltra Hdtv 11
55E5500UE
55-дюймовый светодиод класса 4k Ultra Hdtv 13
55E5500UF
55-дюймовый класс Led 4k 9006 9000 Ultra Hdt4 55-дюймовый светодиод класса 4k Ultra Hdtv 13
55E5500UH
55-дюймовый светодиод класса 4k Ultra HDTV 13
55E5500UI
55E5500UI
55
55F3500A
55-дюймовый светодиодный телевизор 1080p 60 Гц 13
55UFC2500A
55-дюймовый Class Curved 4k Ultra Hdtv 130003 13FC 13FC 4k Ultra Hdtv 12
55UG2500A
55-дюймовый телевизор Ultra HD класса 4k 11
55UG 2500B
55-дюймовый телевизор Class 4k Ultra Hd 11
55UG2500C
55-дюймовый телевизор Class 4k Ultra Hd 11
55UG2500D
11
55UG3550GA
55-дюймовый HDTV, класс 12
55UG6550GA
55-дюймовый Chromecast 4k Led Tv
000 9006 Led Tv
12
55UGX3500A
55-дюймовый Ultra HD Slim Tv класса 4k 11
55UGX3500B
55-дюймовый Class 4k
55-дюймовый тонкий телевизор класса 4k Ultra Hd 11
65D3550
65-дюймовый светодиодный 120 Гц HDTV 8
65E3550A
65-дюймовый 1080p 120 Гц, светодиодный HDTV 16
65E3550B
65-дюймовый 1080p 120 Гц светодиод 65-дюймовый 1080p 120 Гц 65-дюймовый HDTV 15 15 15 15
65E3550D
65 дюймов 1080p 120 Гц Led Hdtv 16
65UF2505A
65 дюймов 4k 4k Ultra Hd Tv 11
65UF2505C
65-дюймовый 4K Ultra Hd Tv 11
65UF2505D
65-дюймовый Class 4k 65-дюймовый светодиодный телевизор Ultra HD класса 4k 10
65UF2505F
65-дюймовый телевизор 4K Ultra Hd 12
65UF2505I
65-дюймовый HD-телевизор класса 4k со светодиодной подсветкой 12
65UFC2500A
65-дюймовый ЖК-дисплей Hdtv 12
65UG2500A
65-дюймовый телевизор Ultra HD класса 4k 12
65UG2500B
65-дюймовый телевизор класса 4k Ultra Hd Tv 12 00
000GA Chromecast 4k Led Tv
12
65UG6550GB
65-дюймовый Chromecast 4k Led Tv 12
65UGX3500A
65-дюймовый Tv Class 4k 9000 9000 Ultra Hd 9000 9000 9000 Slim
65-дюймовый тонкий телевизор Class 4k Ultra Hd Slim 12
65UGX3500C
65-дюймовый тонкий телевизор Class 4k Ultra Hd Slim 900 06 12
75G2500A
75-дюймовый ЖК-телевизор класса 15
75UF2500A
75-дюймовый 4K Ultra Hd Tv
16
75UF5550B
75-дюймовый светодиодный телевизор Ultra HD класса 4k 16
75UG6550GA
75-дюймовый 9000 Tv 9000 Ultra Hd 9000 Smart 4k Ultra Hd 9000
75UGX3550A
Тонкий светодиодный телевизор 4K Uhd с диагональю 75 дюймов 14
75UGX3550B
75-дюймовый телевизор Slim 4k Uhd со светодиодной подсветкой 13 13 13 HD Led Tv 14
78UG5550A
78-дюймовый светодиодный HDTV класса 15
86UG5550A
86-дюймовый Class 4k Телевизор Ultra Hd 24
Bh2304D
Bh2304d: 13 # Television (durabr 2
Bh3004D
Bh3004d 00 9000 Durabrand6 Bh3404d: 24 Televison (durabran 3
CETV24214
Cetv24214: континентальный 14-дюймовый телевизор 1
CPA14XHJ
9 Pac000
14k
14k Pac Heat & Cool A / c 78
CTV1418
13 дюймов / 14 дюймов (автоматическое напряжение) 2
DVD101
DVD Player 5: DVD1 канал 4
DVD400
DVD-плеер, 2 караоке Rem Ea 6
DVD4800
DVD-проигрыватель 1
9000 Dvd Player DVD 7
DVD62002
Dvd6200-2: 5. 1 DVD-проигрыватель / программа 2
DXLCDTV19
Dx-lcdtv19: 19 # Lcd Hdt410 26
DXLDVD2210A
Dx-ldvd22-10a: dynex 22 # Lcdtv 40
DXLTDVD000
DXLTDVD9000 DXLTDVD9000 DXLTDVD9000 DXLTDVD 9000 9000 9000 DXLTDVD 9000 DXLTDVD9000 9000 9000 17
DXR20TR
Dx-r20tr: 20 # Round Crt TV / DVD 20
DXRCRT2009
Dx-rcrt20-09: 20 # Crt Round T ub 13
EN131AUV
13-дюймовый цветной телевизор (для Eljuri) 233
EN201AUV
20-дюймовый цветной телевизор (для Eljuri) 4
HL15B
Hl15b: 15 # Lcd Tv Atsc-тюнер 9
HL15BA
000 20
HL15ED
Hl15e-d: 15 # ЖК-телевизор 14
HL15R
Hl15r: 15 # ЖКД HL15R: 15 # Lcd 9000 9/9000
Hl15t: 15 # Lcd Hdtv 29
HL15WHITE
Hl15white: 15 # Lcd Tv / Atsc Tu 10
HL19D2 Hl19d2: 19-дюймовый ЖК-телевизор Hdtv 13
HL19E
Hl19e: 19 # Широкий ЖК-телевизор 20
HL19EA

96

HL19EA

96

HL19K1A
19
HL19K2A
21
HL19KN1
Hl19KN1000 961
HL19KN2
Hl19kn2: 19-дюймовый ЖК-телевизор — Ntsc Tune 23
HL19LE2A
13
HL196R
HL196R HL196R
HL19R1
Hl19r1: 19 # Lcd Hdtv Atsc / ntsc 14
HL19R1A
15
Hl19sl2: светодиод / сша / hac 25
HL19SL2A
29
HL19SLW2A
22
HL19W
Hl19w: 19 # Широкий ЖК-телевизор / Atsc Tu 15
HL19WA
Hl19w-a: 19 # Широкий ЖК-телевизор / Atsc
Hl22f1: 22 # Lcd Hdtv Новый дизайн 11
HL22F1A
11
HL22F2A
10 00 HL22F2A
10
HL22FB1A
9
HL22FEP1
Hl22fep1: 22 # ЖК-дисплей Hdtv New Desi 11
HL22FG1
Hl22fg1: haier / bg / atsc / mtk 9
HL22FG1A
9
HL22FO1 0003000/000 000 000/000 000/000 000 10
HL22FP1
Hl22fp1: 22 # ЖК-дисплей Hdtv Новый дизайн 8
HL22FP1000
HL22FP1000 00 9183 00 00 9183
Hl22fpb1: 22 # ЖК-телевизор Hdtv New Desi 11
HL22FR1
Hl22fr1: haier / bg / atsc / mtk 16 9 16 11 16 9 16 9 Hl22fri1: 22 # Lcd Hdtv New Desi 12
HL22FRI1A
15
HL22FRR 1
Hl22frr1: 22 # ЖК-дисплей Hdtv New Desi 11
HL22FW1
Hl22fw1: 22 # ЖК-дисплей Hdtv New Desig 11 11 12
HL22K1
Hl22k1: 22 # ЖК Hdtv 19
HL22K1A
19
000
000 19
HL22KN1A
19
HL22R
Hl22r: 22 # Lcd Hdtv Hdtv 180004 ЖК-телевизор 18
HL22R1A
19
HL22T
Hl22t: 22 # ЖК-жесткий диск 25
HL22XLE2A
15
HL22XLT2A
13
HL22XLTW2A
12
HL22XSL2
Hl22xsl2: водить / США / HAC 25
HL22XSL2A
24
HL22XSLW2A
34
HL24XD2A
14
HL24XK2A
23
HL24XLE2A
15
HL24XP1
Hl24xp1: hac / 24t3 / черный 22
HL24XSL2A
16
16
23
HL26B
Hl26b: 26 # ЖК-ТВ / Atsc-тюнер 13
HL26BA
Hl26b-a: 17
HL26BG
Tuner
12
HL26BGA
Hl26bg-a: 26 # Lcd Tv / Atsc Tune 11
HL26K
Hl26k: 26 # Lcd TvL 000 Hl26k: 26 # Lcd TvL Hl26k1: 26 # Lcd Hdtv 28
HL26K1A
28
HL26P2
Hl26p2: 26 дюймов Lcd6 000 000 Hl26P2 000 000 000 000 Lcd 6 000 000 000 23
HL26R
Hl26r: 26 # Lcd Hdtv 27
HL26R1
HL26R1: haier / bg114 12
HL26RB
12
HL26S
Hl26s: 26 # ЖК-телевизор / Atsc HL 000 18000 18000 ЖК-телевизор / Atsc Tune 18
HL32ATB
32-дюймовый ЖК-телевизор / atsc-тюнер 11
HL32B
HL324000 9000 Atsc 9000 Atsc 9000 Atsc 9000 Tv324 9000 ATS HL32BA
Hl32b-a: 32 # ЖК-телевизор / Atsc Tune 18
HL32BG
Hl32bg: 32 # ЖК-телевизор / Atsc-тюнер
HL32D1
Hl32d1: haier / oem / atsc / bg / 32 10
HL32D2
32-дюймовый ЖК-телевизор 14
000 14
HL32D2B
32-дюймовый ЖК-телевизор 10
HL32D2C
32-дюймовый ЖК-телевизор ЖК-телевизор Atsc-тюнер 10
HL32K1
Hl32k1: 32 # ЖК-жесткий диск 21
HL32K1A
00
000
000 20
HL32LE2A
22
HL32P1
Hl32p1: haier / bg / atsc / mtk
000 000 000 13
HL32R
Hl32r: 32 # ЖК-дисплей HDTV 25
HL32R1
Hl32r1: haier / bg / atsc / mtk 18
HL32R1A
18
HL32RB
Hl326 9000 bt11 HL32S
Hl32s: 32 # ЖК-телевизор / тюнер Atsc 14
HL32SA
HL32S-A: 32 # ЖК-телевизор / Atsc Tune 15
15
26
HL32XK1A
26
HL32XK2A
22
HL326000 00 00 00 00 00 00 00 00
HL37B
Hl37b: 37 # ЖК-телевизор / тюнер Atsc 25
HL37BG
Hl37bg: 37 # ЖК-телевизор / тюнер Atsc
HL37BGB
Hl37bg-b: 37 # ЖК-телевизор / Atsc Tune 12
HL37E
Hl37e: 37 # ЖК-жесткий диск 1080p 52 20
HL37SB
7
HL37XLE2A
24
HL40BBC 11000 B3 9000 b000 Tv406 9000 b 9000 b 9000 b 9000 bb 9000 b 9000 b 9000 b 9000 bb
HL40BG
Hl40bg: 40 # ЖК-телевизор / тюнер Atsc 18
HL40BGB
Hl40bg-b: 40 # ЖК-телевизор / Atsc 11
HL40XP1
Hl40xp1: hac / канада / rohs 20
HL40XSL2
HL40XSL2A
26
HL40XSLW2A
32
HL42B
Hl42bL4 9000 TUNV4 13
HL42BG
Hl42bg: 42 # ЖК-телевизор / Ats 17
HL42BGB
-HL42BGB
-b Hl 12
HL42E
Hl42e: 42 # ЖК-дисплей HDTV 1080p 42
HL42R
Hl42r: 42 # ЖК-дисплей Full HD Tv 1080 14 # Lcd Full Hd Tv 1080 38
HL42XD1
Hl42xd1: haier / oem / atsc / bg / 42 15
HL42XD2
Hl00042x 1080p
L00042xd2
xd2 ЖК-дисплей 24
HL42XD2A
13
HL42XK1
Hl42xk1: 42 # ЖК-дисплей Полный ЖК-экран 10 00 29
HL42XLE2
Hl42xle2: haier / led / америка 29
HL42XLE2A
29 00 000 00 13
HL42XR1A
13
HL42XZK2A
30
HL42XZK42A
62
HL46XSL2
Hl46xsl2: светодиод / hac / сша 20
HL46XSL2A
20
HL46XSL2B
15
HL46XSLW2B
14
HL47E
HL47E
HL47E
: 47 # ЖК-телевизор 1080p 13
HL52E
Hl52e: 52 # ЖК-телевизор Hdtv 1080p 40
HL55XZK22A
000
000 HLA15
Hla15: 15 # ЖК-телевизор / монитор Aut 6
HLA19
Hla19: 19 # ЖК-телевизор / монитор 10
# HLA26c Телевизор / монитор 14
HLA32
Hla32: 32 # Hd ЖК-телевизор / монитор 16
HLA37
Hla37: 37 # Hd ЖК-телевизор / монитор 16
HLA42
Hla42: 42 # HD ЖК-телевизор / монитор 15
HLC15B
# ddvd6
HLC15B 8
HLC15BA
4
HLC15E
Hlc15e: 15 # Lcd Tv / dvd Combo 31
31
21
HLC15R
Hlc15r: 15 # ЖК-телевизор HD / DVD Combo 21
HLC15T
Hlc15t: 15 # Lcd6 9000 HD Tv / dvd 9000 9000 9000 9000 9000 9D HD Tv / 9000 Hlc19e: 19 # Широкий ЖК-телевизор / DVD Com 35
HLC19EA
Hlc19e-a: 19 # Широкий ЖК-телевизор / DVD C 23
21
HLC19K1A
20
HLC19K1C
5
HLC19K2A
000
22
HLC19KW1A
21
HLC19KW2A
23
HLC19R
9000c6
HLC19R
9000c6
HLC19
9000c6
Hl
Hlc19r1: 19 # Комбинация ЖК-телевизора / DVD-диска 17
HLC19R1A
17
HLC19RW
HLC19RW
HLC19RW
Hlc19 HLC19SL2A
20
HLC19SLW2A
18
HLC19T
9000 6
Hlc19t: 19 # Комбинированный ЖК-телевизор / DVD 30
HLC19W
HLC19w: 19 # Широкий ЖК-телевизор / DVD Com 29
HLC19 HLC19
HLC19 Широкоформатный ЖК-телевизор / DVD C 14
HLC22K1
Hlc22k1: 22 # Lcd HD Tv / DVD Гребень 22
HLC22K1A 000
HLC22KW1
Hlc22kw1: haier / bg / atsc / mtk 2
HLC22KW1B
21
21
HLC50004 HLC50004
26
HLC50004 19
HLC22R1
Hlc22r1: 22 # Комбинация ЖК-HD для телевизора / DVD 16
HLC22R1A
16
HLC5000 HLC5 TV / DVD Гребень 17
HLC22XSL2A
19
HLC22XSLW2A
21
HLC24XK2A
26
HLC24XLP2A
16
HLC24XLPW2A
16
HLC24XSL2A
17
HLC24XSLW2A
c6 c 19 c 19
HLC26A
11
HLC26B
Hlc26b: 26 # Lcd / tv тюнер Atsc 13
HLC26BB000 Tuner

15

HLC26R1
Hlc26r1: 26 # Lcd HD Tv / DVD Comb 13
HLC26R1A
13
HLC26R1B
14
HLC32
Hlc32: 32 # ЖК / DVD Комбинированный Atsc T
000 000
HLC32B
Hlc32b: 32 # ЖК-телевизор / DVD-диск, комбинированный 13
HLC32K2A
21
Dvd4 19
HLC32R1A
19
HLE20BB
Hle20bb: 20 # ЖК-телевизор Черный 27
HLh256000 L900
HLh256000



HLh29BB
Hlh29bb: 19 # ЖК-телевизор 16
HLh29W
Hlh29w: 19-дюймовый широкоформатный ЖК-телевизор 16
HLh366BB
Hlh366bb: 26 # ЖК-телевизор Atsc тюнер 13
HLh36ATBB
Hlh36atbb: 26 # ЖК-телевизор Atsc Tune
HLh36BBTV
26-дюймовый ЖК-телевизор / Ntsc-тюнер 13
HLh426BB
Hlh426bb: 32 # Lcd TV Atsc Tuner 000 000 Tune 32
HLh42BB
Hlh42bb: 32 ЖК-монитор 19
HLh42BBTV
32-дюймовый Lcdtv / ntsc
18
HLh47ATBB
Hlh47atbb: 37 # ТВ-тюнер Atsc 15
H Lh47BBTV
37-дюймовый Lcdtv / ntsc тюнер Auto Volt 12
HLh506BB
Hlh506bb: 40 # Lcd Tv Atsc Tuner 18
000 Tv Atsc Tuner
18
000
000 26
HLT10
Hlt10: 10. 2-дюймовый ЖК-телевизор с Atsc T 4
HLT71
Hlt71: 7 ЖК-телевизор с Atsc-тюнером 3
HLTD7
HLTD7
Hltd7:
HLTDC15
Hltdc15: 15 # Lcd Tv / dvd Combo 14
HLTDC19
Hltdc19: 19 # Lcd Tv / dvd 9000 9000 00 9000 9000 9000 9000
00 9000 9000
00 ЖК-телевизор / DVD Combo
5
HM06R750B
Hm06r750b :.6 Cuft Microwave / b 28
HP42BB
Hp42bb: 42 # Плазменный телевизор Hd / Atsc 10
HP50B
Hp50b4 T000 9000 T000 T000
HP60B
Hp60b: 60 # Плазменный телевизор Hd / atsc T 6
HTAF15
Htaf15: 15 # Pure Flat Crt Autov 10 00 10 12
HTAF21C
Htaf21c: 21 # Crt Tv / Flat Tube 16
HTAF21S
Htaf21s 150003 9000 9000 Slim Flat HTAF29C
Htaf29c: 29 # Flat Crt Tv 19
HTAF29S
Htaf29s: 29 # Pure Flat Slim Crt 15
HTAR614 : 14 # Традиционный Crt Au 13
HTAR21
Htar21: 21 # Обычный Crt Au 14
HTAR21B
Htar21b: 21 # Convential
Htar29: 29 # Convention Crt Auto 16
HTF20
Htf20: 20 # Flat Crt Television 10
HTF201
Htf20
HTF20R21
Htf20r21: телевизор с плоским экраном 291
HTF21S33
Htf21s33: 20/21 «Crt Flat Teliv 00 # 00 # 12
HTF24R21
Htf24r21: 24-дюймовый плоский экран Crt T 301
HTF27R11
Htf27r11: 27 Crt с плоским экраном Te 289
HTF29S34
Htf29s34: 27 # / 29 # Crt Flat Tele 30
HTF34S31
Htf 34 # Telecom # 34 #
12
HTN13G11F
Htn13g11f: 13 Frog Tv 2
HTN13R12
Htn13r12: 13 «Color Tv12N4 10
HTN19R12R
Htn19r12r: 19-дюймовый телевизионный кабель 2
HTN20R12
Htn20r12: 20 «Tv
9009: 20″ Tv C
04 Reg Televisio 900 04 Htr13: 13 # Crt Television 900
4 HtX14S34

46

4 Ht 10
27
HTN24R12
Htn24r12: 24 «Crt Reg Televisio 1
HTR13
24
HTR13A
13-дюймовый телевизор Crt 15
HTR15
24
HTR 24
HTR18
24
HTR20
Htr20: 20 # Crt Television 19
HTR206A
206000
HTR206A HTR21
24
HTR21S34
Htr21s34: 21 # Crt Tv Круглая трубка 16
HTR22
00 000
000 000 000 HTR24
24
HTR25
24
HTR26
24
HTVF20R72
Htvf20r72: 20/21 Crt Flat Telev 14
HTX14S31
HTX14S31
HTX14S31
14-дюймовый телевизор Silver Ntsc 50/60 Гц 10
HTX14S33
Htx14s33: 13 # Crt Reg Televisio 30
HTX14S34

46

HTX20S31
Htx20s31: 20 «Crt Reg Televisio 19
HTX20S32
Htx20s32: 19/20 Crt Reg Televis 000 HT5 Crt Reg Televisio 300
HTX25S31
Htx25s31: 24/25 # Crt Reg Televi 5
HTX29S31 90 005 1

Кто на самом деле убил Малкольма Икса?

Более полувека ученые утверждали, что прокуроры признали виновными в убийстве Малкольма X не тех людей.

Сейчас, спустя 55 лет после того кровавого дня в феврале 1965 года, окружная прокуратура Манхэттена рассматривает вопрос о возобновлении расследования убийства.

Некоторые новые доказательства получены из документального фильма из шести частей под названием «Кто убил Малкольма Икс?», Транслируемого на Netflix 7 февраля, в котором утверждается, что двое из осужденных мужчин не могли быть на месте происшествия в тот день.

Вместо этого он указывает пальцем на четырех членов мечети «Нация ислама» в Ньюарке, штат Нью-Джерси, изображая их участие в жизни своего города как секрет полишинеля.Один даже появился в рекламной кампании 2010 года тогдашнего мэра Ньюарка Кори Букера.

«Что нас зацепило, — сказала Рэйчел Дретцин, режиссер документального фильма вместе с Филом Бертельсеном, — так это представление о том, что вероятный убийца из дробовика Малькольма Икса живет у всех на виду в Ньюарке, и что многие люди знали о его причастность, и он не был расследован, не преследовался, не подвергался сомнению ».

Это дело давно соблазняет ученых, которые видят заговор, скрытый в неизданных правительственных документах.Сыщик по этому делу Энтони Боуза несколько лет назад категорически написал: «Расследование было неудачным».

Тем не менее, это никогда не вызывало всеобщего навязчивого интереса к убийству Кеннеди или столь же наглому убийству Тупака Шакура. Попытки возобновить дело — раскрыть возможные роли ФБР, Департамента полиции Нью-Йорка и руководства «Нации ислама», включая Луиса Фаррахана, ни к чему не привели.

«Подавляющее большинство белых в то время считали, что это преступление черных против черных и, возможно, преступление черных экстремистов против черных экстремистов», — сказал Дэвид Гарроу, историк гражданских прав, лауреат Пулитцеровской премии.«И в течение десятилетий в черных сообществах существовал консенсус, что мы не собираемся поднимать этот камень, чтобы увидеть, что под ним».

В то время, когда Малькольм выступал в бальном зале Одюбона 21 февраля 1965 года, он был заметным человеком — за ним шпионило ФБР. и полиция, которую руководство нации объявило предателем, внутренне ненавидела и любила. Г-н Фаррахан объявил его «достойным смерти». За неделю до его убийства в его дом в Квинсе взорвали бомбу, в то время как он, его жена и четыре дочери спали внутри.

Через несколько секунд после того, как Малькольм вышел на кафедру, раздались выстрелы, а затем царил хаос.

Талмадж Хайер, член «Нации ислама» из мечети Нью-Джерси, был арестован, бежав из бального зала, с обоймой от пистолета, использованного при убийстве. Позже полиция арестовала двух мужчин из бывшей мечети Малькольма в Гарлеме, Нормана 3X Батлера и Томаса 15X Джонсона, известных как силовики.

На суде г-н Хайер, впоследствии ставший Муджахидом Абдул Халимом, признал свою вину, но сказал, что двое других мужчин невиновны.Все трое были осуждены и приговорены к пожизненному заключению. Г-н Джонсон, ставший Халилом Исламом, умер в 2009 году; Г-н Батлер, ныне Мухаммад Абдул Азиз, был условно-досрочно освобожден в 1985 году и до сих пор заявляет о своей невиновности.

В конце 1970-х г-н Халим подал письменные показания под присягой, назвав четырех членов мечети Ньюарка своими соучастниками в преступлении. Адвокат по гражданским правам Уильям Кунстлер ходатайствовал о возобновлении дела, но ему было отказано.

С тех пор беготня ложится на плечи биографов и независимых исследователей, в том числе Вашингтон, Д.К., гид по имени Абдур-Рахман Мухаммад, центральная фигура в новом документальном сериале.

«Меня беспокоило то, что это никого не волновало, — сказал г-н Мухаммед. «Мне не платили ни за что из этого. Я продавал машины. Я просто парень из рабочего класса ».

Г-н Мухаммед в 2010 году раскрыл личность одного из предполагаемых убийц, названных в показаниях г-на Хайера, Уильяма Брэдли, который сменил имя на Альмустафа Шабазз и был женат на известном ньюаркском активисте. Исследователи утверждают, что именно выстрел из дробовика мистера Брэдли убил Малькольма.

Г-н Шабазз, умерший в 2018 году, отрицал свою причастность к убийству и жил у всех на виду. «Я хорошо его знал», — говорит Кори Букер в документальном фильме, добавляя, что ему не было известно о прошлой личности г-на Шабаза.

Г-н Мухаммад опубликовал имя и фотографию г-на Шабаза в своем блоге в 2010 году, а затем поделился своим исследованием с Мэннингом Мараблом, который работал над своей удостоенной Пулитцеровской премии биографией «Малкольм Икс: жизнь переосмысления». Г-н Мухаммед считает, что трое других мужчин, упомянутых в имени г-наПоказания под присягой Хайера мертвы.

После выхода книги Элвин Сайкс, активист из Канзас-Сити, помогавший убедить ФБР. и министерство юстиции, чтобы создать отдел по расследованию убийств в эпоху гражданских прав, лоббировали федеральных прокуроров с целью повторного расследования убийства Малкольма. Департамент отказался. Когда г-н Шабазз умер, последним оставшимся нерешенным делом был г-н Азиз, бывший Норман 3X Батлер, которому сейчас 81 год, отсидевший 20 лет за преступление, которое, как он утверждает, он не совершал.

Адвокаты г-на Азиза теперь надеются, что окружной прокурор Манхэттена очистит его имя. Представитель прокуратуры Сайруса Р. Вэнса-младшего заявил в своем заявлении, что предварительная проверка «проинформирует офис о том, какие дальнейшие следственные действия могут быть предприняты». Один из прокуроров, проводивших проверку, Питер Казоларо, сыграл жизненно важную роль в отмене обвинительных приговоров пяти мужчинам, незаконно заключенным в тюрьму за изнасилование бегуна в Центральном парке в 1989 году.

Г-н Азиз, который отклонил запрос об интервью, сказал в тот день он не мог быть в Одюбоне, потому что охрана заблокировала бы его вход, и что в любом случае он был почти неподвижен из-за того, что недавно избила полиция.В документальном фильме он выражает мало надежды на этот процесс. «Я просто не верю в этих людей», — говорит он. «У меня есть 20 лет жизни, чтобы показать, что я не должен в них верить».

Не все убеждены. Карл Эванзз, автор книги «Фактор Иуды: заговор с целью убить Малкольма Икса», процитировал кадры из фильма, в которых, по его словам, изображен г-н Азиз в Одюбоне, и отклонил исследование г-на Мухаммеда как ненадежное.

Дэвид Шенис, который в «Проекте невиновности» представляет г-на Азиза, сказал только, что юристы рассчитывают на сотрудничество с прокуратурой, «чтобы добиться справедливости».В их случае фигурирует ФБР. документы, которые никогда не передавались в местную полицию или прокуратуру. Барри Шек из «Проекта невиновности» заявил, что на основании этих доказательств «мы обеспокоены тем, что приговор не был отменен в 1978 году», когда г-н Хайер подал письменные показания под присягой.

Если окружной прокурор поддерживает обвинительный приговор, юристы могут подать возражение в Верховный суд штата.

Но даже если господин Азиз победит, это не решит вопросов о более крупных силах, которые, по мнению многих, способствовали смерти Малькольма — правоохранительных органах, которые шпионили за ним, но не смогли его защитить, лидерах нации, которые молчаливо призывали его голову. .Эта часть истории вместе с неизданными томами ФБР. файлы, могут никогда не всплыть полностью.

«Когда вы имеете дело со сложным преступлением и упрощаете его до пяти членов Нации Ислама, идущих в бальный зал, вы не даете людям нужный контекст», — сказал Зак Кондо, автор книги «Conspiracys» : Раскрытие убийства Малкольма Икса ».

«Целое поколение ушло в могилы, зная важную информацию, которую такие люди, как я, никогда не узнают», — сказал он. «Это самая неприятная часть.»

The Recorder — Местные студенты принимают участие в программе« Доктор на день »

ГРИНФИЛД — Джеффри Хейер, в возрасте 8 или 9 лет, смотрел передачу по телевизору вместе со своим отцом, адвокатом. Часть увиденного он видел, как врачи помогают детям-инвалидам.

Хайер повернулся к отцу и сказал, что, если он не возражает, он хотел бы стать костным доктором, чем он и стал.

Хайер занимается медициной в течение четырех десятилетий, но все еще может быстро вспомнить свои сны, разговаривая с двумя студентами, которые следили за ним в течение дня.

«Я не говорю, что это лучшая вещь в мире для врача, но в то же время это призвание», — сказал Хайер, уроженец Гринфилда.

Программа слежки была частью программы «Доктор на день», спонсируемой местным отделением Массачусетского медицинского общества. Во вторник слежка проводилась в кабинете Хейера на Ридделл-стрит, а также в медицинском центре Бэйстейт Франклин. Хайер сказал, что участвует в программе примерно последние 20 лет.

«Вы имеете дело с молодыми умами, их глаза широко открыты, и вы имеете дело с невероятными мечтами», — сказал Хайер.«Я пытаюсь дать им дозу реальности».

Это включало в себя пропуск двух студентов в палаты с пациентами, которых он принимал, при условии, что пациенты были в порядке с этим. После нескольких посещений Хайер привел студентов в свой кабинет для подведения итогов. Он спросил их, что они считают самым сложным из того, что они видели, и затем объяснил им это.

«Это действительно укрепило мою идею о том, что да, я действительно хочу заниматься медициной», — сказала 18-летняя ученица региональной школы Mohawk Trail Брианн Кузино, следя за Хейером часть дня.«Это другое, чем просто быть пациентом и смотреть, что происходит».

Брианна сказала, что ее мечта стать врачом началась около двух лет назад, когда член семьи заболел, и она часто лежала с ними в больнице.

Ученик средней школы Гринфилд 15-летний Виктор Иванцев много лет хотел стать врачом. Оба его родителя работают в поле.

«Мне всегда нравятся их профессии, и я стремлюсь быть похожими на них», — сказал Виктор, который также следил за Хейером.Он сказал, что хочет быть кардиологом, и слежка «действительно открыла мне глаза на то, что есть и чем может стать медицина».

Хайер сказал, что работать врачом может быть непросто, потому что нет регулярного графика. Он назвал это «жонглированием» и может вызвать стресс для вашей семьи.

«Я не говорю, что это лучшая вещь в мире для врача, но в то же время это призвание», — сказал он. «На Уолл-стрит можно заработать намного больше денег».

Напротив, Хайер пытался научить ценить не только то, что он врач, но и то, как лучше всего справиться с этим жонглированием.Он рассказал Брианне и Виктору о своем пчеловодстве и других увлечениях, которые помогают ему не увязнуть в карьере.

«Я сказал им, что если вы начнете заниматься этой профессией, сохраняйте смирение, потому что вы будете унижаться каждый день».

Свернувшись в кучу, как группа врачей в дискуссии, Хайер рассказал двум студентам один из своих самых важных уроков, который не имел ничего общего с костями, но все касался людей. Он сказал всегда помнить имена людей, говоря, что это единственное, что нельзя отнять у человека.«Найдите время, чтобы поздороваться с людьми и послушать, что они говорят, — сказал он, — потому что это будет бесценно».


Некитайские телевизионные бренды, которые вы можете покупать и смотреть свои любимые фильмы и шоу на

Из-за растущей напряженности между Индией и Китаем люди в Индии отказываются от использования китайских продуктов, чтобы не отдавать бизнес китайским компаниям. Есть много некитайских телевизионных брендов, которые можно использовать вместо того, чтобы покупать телевизор, произведенный в Китае. Некоторые из них также производятся телевизионными брендами «Сделано в Индии».

Также читают | Сделано в Индии Холодильники: вот несколько холодильников индийского производства для охлаждения продуктов

Вот список некитайских телекомпаний

LG Electronics

LG Electronics — один из ведущих производителей телевизоров за пределами Китая. Это южнокорейская транснациональная электронная компания. Штаб-квартира компании находится в Ёвидо-донге, Сеул, Южная Корея. LG Electronics занимает прочную позицию на индийских рынках, и ее телевизоры обеспечивают отличные впечатления от просмотра с потрясающими функциями.Существуют различные типы телевизоров LG, такие как LED, OLED и плазменные телевизоры. LG E9 OLED — одна из лучших моделей бренда, а LG B9 OLED по очень разумной цене, согласно новостному онлайн-порталу.

(Источник: Facebook компании LG)

Panasonic Corporation

Panasonic Corporation ранее называлась Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Компания базируется в Кадоме, Осака, и является японской многонациональной компанией по производству бытовой электроники. Компания Panasonic была основана в 1935 году, а затем переименована в 2008 году.Самая любимая модель телевизора Panasonic — Panasonic TX-55GZ2000. Его превосходная яркость OLED-панели и реализация Dolby Atmos дают лучшие результаты, несмотря на высокую цену. Еще одна удачная модель — TX-50GX700B.

(Источник: Facebook Panasonic)

Samsung

Samsung — корейский многонациональный конгломерат. Штаб-квартира находится в городе Самсунг, Сеул. Она была основана Ли Бён Чулем в 1938 году как торговая компания и к 1960-м годам вошла в электронную промышленность. Компания Samsung представила широкий спектр светодиодных и интеллектуальных телевизоров, которые не только доступны по цене, но и обладают лучшими функциями.Цены варьируются от 14990 до 31990 вон. Это TE50A Smart HD TV — модель, на которую стоит обратить внимание.

(Источник: Facebook Samsung)

Также читают | Индийские телевизионные бренды: вот список телевизоров, произведенных в Индии

Корпорация Sharp

Sharp Corporation также является одной из некитайских телекомпаний, расположенных в Японии. Эта японская корпорация разрабатывает и производит различную электронную продукцию. Его штаб-квартира находится в Сакаи-ку, Сакаи, префектура Осака, и была основана в 1912 году.В 1950-х компания Sharp также создала несколько удивительных портативных телевизоров. Он имеет полный спектр телевизоров от 32 до 70 дюймов по разумным ценам.

(Источник: Facebook Sharp)

Sony Corporation

Sony Corporation также является японской транснациональной корпорацией, производящей бытовую и профессиональную электронику. Штаб-квартира находится в Конане, Минато, Токио. Она была основана в 1946 году. Продукция Sony также является одной из самых востребованных на индийских рынках. Sony X950H и Sony Z9F — две отличные модели компании.

(Источник: Sony Facebook)

Toshiba

Компания Toshiba также является японским транснациональным конгломератом со штаб-квартирой в Минато, Токио. Наряду с электроникой компания предлагает различные продукты в области информационных технологий и связи. Toshiba 49U7763DB с 4K-телевизором — отличная модель телевизора от компании. Он предоставляет одни из лучших телевизоров по доступным ценам и потрясающим функциям.

(Источник: Facebook Toshiba)

Также читают | Индийские мобильные компании: вот список сотовых телефонов, которые сделаны в Индии

Сделано в Индии Телевизоры брендов

Онида

Onida — индийская электронная компания, начавшая свой путь в 1981 году.Они начинали исключительно как телевизионную брендовую компанию, а затем постепенно перешли на производство другой бытовой техники. «Это зависть соседа», слоган гордости владельца — один из самых запоминающихся в истории индийской рекламы. Компания имеет два производственных предприятия в Ваде, Махараштре и Рурки в Уттаракханде. Они производят более 3,4 миллиона телевизоров. Onida предлагает широкий выбор великолепных телевизоров, интеллектуальных светодиодных телевизоров с FIRE TV от 20 000 до 99 000 единиц.

(Источник: Facebook Ониды)

Videocon Industries

Одна из популярных индийских телекомпаний — Videocon Industries, основанная в 1985 году в Аурангабаде.Его начал Нандлал Мадхавлал Дхут. По словам Анирудха Дхута, его внука, Videocon была первой компанией, которая привезла цветные телевизоры в Индию. Он имеет более 100 моделей телевизоров с дисплеями от 24 до 98 дюймов. Высококачественные телевизоры Videocon включают в себя Ai Smart TV, жидкокристаллический дисплей, Ultra HD, возможность беспроводного подключения дисплеев и даже имеют звездный рейтинг, что означает, что они экономят электроэнергию.

Также читают | Индийские производители ноутбуков: вот список ноутбуков, произведенных в Индии

Кавеолин-1 убиквитинирован и нацелен на внутрипросветные пузырьки в эндолизосомах для деградации

Abstract

Кавеолы ​​- это долгоживущие микродомены плазматической мембраны, состоящие из кавеолинов, кавинов и богатой холестерином мембраны.Мало что известно о том, как разбираются кавеолы ​​и как разрушаются компоненты их оболочки. Мы изучили деградацию кавеолина-1 (CAV1), основного кавеолярного белка, в клетках CV1. CAV1 деградировал очень медленно, но оборот можно было ускорить, нарушив сборку кавеол. Теперь CAV1 стал обнаруживаться в поздних эндосомах (LE) и лизосомах, где он деградировал. Нацеливание на путь деградации требует убиквитинирования и эндосомного сортировочного комплекса, необходимого для транспортного механизма (ESCRT) для включения во внутрипросветные пузырьки в эндосомах.Стратегия двойной метки позволила нам отслеживать воздействие CAV1 на кислый просвет отдельных созревающих LE в живых клетках. Важно отметить, что мы обнаружили, что «кавеосомы», ранее описанные нашей группой как независимые органеллы, отличные от эндосом, на самом деле соответствуют поздним эндосомным компартментам, модифицированным накоплением сверхэкспрессированного CAV1, ожидающего деградации. Полученные данные привели нас к пересмотренной модели эндоцитарного переноса CAV1.

Введение

Кавеолы ​​представляют собой небольшие инвагинации плазматической мембраны на поверхности многих типов клеток млекопитающих.Они участвуют в различных физиологических процессах, включая эндо- и трансцитоз, проникновение патогенов, регуляцию липидов, передачу сигналов и рак (Razani et al., 2002; Parat, 2009). Они могут проникать в клетку в форме эндоцитозных пузырьков, которые стыкуются с эндосомными органеллами для доставки грузов (Pelkmans et al., 2004; Parton and Simons, 2007). В плазматической мембране и во время цикла везикулярного транспорта кавеолярная оболочка остается плотно связанной с мембраной, что резко контрастирует с другими оболочками везикул, такими как клатрин или COPI / II (Tagawa et al., 2005).

Кавеолярная оболочка состоит из двух основных слоев белка. Внутренний слой немышечных клеток состоит из CAV1 (кавеолин-1) и CAV2. Кавеолины представляют собой интегральные мембранные белки с центральным гидрофобным доменом, вставленным в виде петли внутри мембраны. Когда оба конца N и C обращены к цитоплазме, CAV1 принимает топологию шпильки (Dupree et al., 1993; Monier et al., 1995). С CAV1 в качестве основной организующей субъединицы два кавеолина образуют взаимосвязанный каркас, который определяет размер и многие из общих свойств микродомена.Недавно обнаруженные полости обеспечивают внешний периферический цитозольный белковый слой. Они составляют большие гетеролигомерные комплексы, которые покрывают сильно изогнутую мембрану кавеол плазматической мембраны (Bastiani et al., 2009; McMahon et al., 2009; Hayer et al., 2010). Считается, что они стабилизируют кавеолиновый каркас, способствуют кривизне мембран и регулируют отрастание кавеол (Hill et al., 2008; Liu and Pilch, 2008; Bastiani et al., 2009; Hansen et al., 2009; McMahon et al. , 2009). Липидный бислой, связанный с кавеолами, представляет собой специализированный микродомен, обогащенный холестерином и сфинголипидами.

Кавеолины синтезируются в ER, где они быстро образуют SDS-устойчивые 8S олигомеры, содержащие 7-10 молекул CAV1 и CAV2 (Scheiffele et al., 1998; Fernandez et al., 2002; Hayer et al., 2010). После COPII-зависимого транспорта к комплексу Гольджи, 8S олигомеры связываются с холестерином и друг с другом, чтобы сформировать вышеупомянутый заделанный мембраной каркас, состоящий из 15-25 8S комплексов. Каркасы осаждаются в виде частиц 70S при извлечении из мембраны и делипидировании (Hayer et al., 2010). Особый везикулярный путь отвечает за транспортировку каркасов кавеолинов к плазматической мембране, где кавины связываются с ними в форме больших 60S комплексов (Hayer et al., 2010).

После правильного формирования кавеолы ​​в плазматической мембране представляют собой стабильные структуры, в которых ни кавеолины, ни кавины не подвергаются быстрому обороту. Они могут быть активированы и подвергаться эндоцитарной интернализации (Kirkham et al., 2005; Tagawa et al., 2005), и есть доказательства, что они могут участвовать в циклах слияния и деления с плазматической мембраной (Pelkmans and Zerial, 2005).Холестерин необходим не только для сборки кавеол, но и для стабильности (Rothberg et al., 1992). Кавины также вносят вклад в стабильность кавеол, поскольку подавление кавина-1 укорачивает период полужизни CAV1 (Hill et al., 2008; Hansen et al., 2009). Поскольку деградация CAV1 после подавления регуляции cavin-1 чувствительна к лизосомным ингибиторам, возможно, что это происходит в лизосомах (LYS; Hill et al., 2008). Однако сообщалось, что мутанты CAV1, которые не могут собираться в кавеолы ​​и, таким образом, остаются в ловушке Гольджи, и CAV2, экспрессируемые в отсутствие CAV1, разлагаются протеасомным путем (Galbiati et al., 2000; Разани и др., 2001).

В этом исследовании мы обращаемся к процессам, с помощью которых кавеолы ​​и CAV1 подвергаются сборке, разборке и особенно деградации. Изменяя баланс различных компонентов кавеол в клетке (CAV1, cavin-1 и холестерин), мы могли ингибировать сборку кавеол, тем самым ускоряя деградацию CAV1. Таким образом, сгенерированный несобранный CAV1 был нацелен на эндосомы, убиквитинирован, секвестрирован во внутрипросветных пузырьках (ILV) эндосомным сортировочным комплексом, необходимым для механизма транспорта (ESCRT), и разложился в LYS.Вакуоли, ранее описанные как кавеосомы, можно было идентифицировать как поздние эндосомы (LE) и LYS (LE / LYS), обогащенные CAV1, предназначенные для деградации.

Результаты

Несобранный кавеолин в плазматической мембране

Чтобы узнать больше о жизненном цикле кавеол и о деградации CAV1, мы проанализировали последствия нарушения соотношений и доступности кавеолярных компонентов в клетках CV1. Манипуляции выполнялись тремя способами: истощение клеток холестерина, сверхэкспрессия CAV1 и подавление экспрессии cavin-1.

Истощение холестерина проводили в клетках CV1, стабильно экспрессирующих CAV1-мономерный EGFP (mEGFP). Эта клеточная линия продуцировала CAV1-mEGFP гомогенно на уровнях, сходных с уровнем эндогенного CAV1, что приводило к умеренной сверхэкспрессии (фиг. S1 A). С помощью флуоресцентной микроскопии CAV1-mEGFP наблюдали как знакомые пятна субразрешения на плазматической мембране, соответствующие кавеолам (), и как диффузное окрашивание комплекса Гольджи.

Несобранный кавеолин в плазматической мембране. (A и B) Клетки CV1-CAV1-mEGFP не обрабатывали (A) или обрабатывали 5 мкг / мл U18666A в течение 16 часов (B), фиксировали и просматривали с помощью конфокальной микроскопии. Обработка U18666A привела к некавеолярному пулу CAV1 в плазматической мембране. (справа) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. (C) FRAP-анализ некавеолярного поверхностного пула CAV1. Квадраты размером 4 × 4 мкм подвергали фотообесцвечиванию на периферии либо клеток CV1-CAV1-mEGFP (5 мкг / мл U18666A, обработанных в течение 16 часов [ n = 10 клеток]; и необработанных [ n = 5 клеток]), либо линия клеток CV1, стабильно экспрессирующая GFP-GPI ( n = 15 клеток).Планки погрешностей указывают среднее значение ± SEM. (D) Клетки CV1, предварительно обработанные 5 мкг / мл U18666A (16 ч), трансфицировали CAV1-mEGFP и визуализировали после переноса Гольджи с помощью покадровой визуализации TIR-FM (1 Гц). Мимолетное поле было отрегулировано таким образом, что плазматическая мембрана и часть Гольджи были освещены. Видны трубчатые носители, прибывающие на поверхность и высвобождающие CAV1-mEGFP при слиянии с плазматической мембраной. Обратите внимание, что CAV1-mEGFP распространился латерально, и не осталось кавеолярных пятен (см. Видео 1).(вверху) На вставках показано увеличение области, выделенной рамкой. (E – G) Обработка клеток CV1-CAV1-mEGFP 5 мкг / мл U18666A (16 ч) или сверхэкспрессия CAV1-mEGFP в клетках CV1 (16 ч) индуцировали несобранный CAV1 в плазматической мембране и нацеливание CAV1-mEGFP на Lamp1- положительный LE (единичные конфокальные срезы). (внизу) На вставках показаны увеличенные области соответствующих рамок. Стрелки указывают на Lamp1-положительный LE, что указывает на отсутствие (E) или присутствие (F и G) совместной локализации с CAV1-mEGFP. Штанги: (B, D [внизу] и E – G) 10 мкм; (D [вверху]) 2 мкм.

Чтобы снизить уровень холестерина в плазматической мембране и комплексе Гольджи, мы использовали U18666A, амфифильный амин, который ингибирует синтез холестерина и нарушает транспорт холестерина. Он вызывает накопление холестерина в набухшем LE / LYS, тем самым истощая холестерин в других местах (Cubells et al., 2007). CAV1-mEGFP в плазматической мембране клеток CV1, обработанных U18666A, был преимущественно равномерно распределен только с несколькими определенными пятнами, характерными для кавеол (). В соответствии с отсутствием кавеол, анализ FRAP показал, что CAV1-mEGFP в плазматической мембране был значительно более подвижным, чем в необработанных клетках ().В нормальных условиях кавеолы ​​стабильны и неподвижны, если не активированы (Thomsen et al., 2002; Tagawa et al., 2005).

Произошел ли несобранный CAV1 из кавеол плазматической мембраны или из-за дефекта сборки кавеол? Мы провели флуоресцентную микроскопию полного внутреннего отражения (TIR) ​​(TIR-FM) в живых клетках, чтобы различить эти возможности. В контрольных клетках кавеолярные каркасы прибывают к плазматической мембране от Гольджи в предварительно собранной форме в везикулярных носителях, отличных от тех, которые используются большинством других мембранных грузов (Tagawa et al., 2005; Hayer et al., 2010). Когда везикулы сливаются с плазматической мембраной, CAV1 не диффундирует, а сохраняется в виде неподвижных плотных пятен. То, что транспорт CAV1-mEGFP отличался в клетках CV1, предварительно обработанных U18666A, было показано двумя наблюдениями. Во-первых, CAV1-mEGFP доставлялся к поверхности клетки в трубчатых, а не в небольших везикулярных носителях (и Video 1; Tagawa et al., 2005). Такие трубчатые носители типичны для конститутивного пути транспорта от Гольджи к плазматической мембране (Toomre et al., 1999). Во-вторых, CAV1-mEGFP быстро диспергировался от места слияния везикул латерально в окружающую плазматическую мембрану (и Видео 1). Это говорит о том, что он прибыл в разобранном или легко диссоциированном виде. Наиболее вероятным объяснением диффузного окрашивания плазматической мембраны было то, что за счет истощения холестерина сборка интактных кавеолиновых каркасов ингибировалась в комплексе Гольджи. По-видимому, несобранный или не полностью собранный CAV1 транспортировался на поверхность посредством конститутивного пути транспорта везикул, а не альтернативного пути, обычно используемого кавеолярными каркасами (Hayer et al., 2010). Хотя в видеороликах TIR-FM это не было очевидно, возможно, что разборка кавеол на плазматической мембране могла способствовать фенотипу. Ранее мы показали потерю кавеолярных пятен и усиление диффузного окрашивания CAV1, когда холестерин удаляется из плазматической мембраны с помощью метил-β-циклодекстрина (Tagawa et al., 2005).

Помимо диффузного окрашивания плазматической мембраны CAV1 в клетках, обработанных U18666A, CAV1 был обнаружен в некоторых больших набухших цитоплазматических органеллах, которые ингибитор индуцировал в клетках.Конфокальная микроскопия показала, что они были положительными для маркера поздней эндосомной / лизосомной лампы1 (). Они были разбросаны по цитоплазме и имели вид кавеосом, как описано в клетках, экспрессирующих CAV1-EGFP (Pelkmans et al., 2001).

Эффекты сверхэкспрессии CAV1 и подавления кавина-1

Сверхэкспрессия CAV1-mEGFP, индуцированная временной трансфекцией, обеспечила другое возмущение с аналогичными эффектами на сборку кавеол и распределение CAV1 в клетке.Когда CAV1-mEGFP временно сверхэкспрессировался и позволял накапливаться в течение 16 часов в клетках CV1, распределение CAV1 показало, в дополнение к равномерной флуоресценции в плазматической мембране, накопление метки в комплексе Гольджи и в Lamp1-положительном LE / LYS. (). Совместная сверхэкспрессия cavin-1 с CAV1 не изменила этот эффект (рис. S1 C).

Важно отметить, что через несколько часов после трансфекции конструкциями CAV1 большая часть экспрессируемого CAV1 уже локализовалась в некавеолярном поверхностном пуле и в эндосомных органеллах; я.е. их локализация отличалась от наблюдаемой для эндогенного CAV1 в контрольных клетках. Таким образом, временно сверхэкспрессируемый CAV1 не является подходящим маркером для кавеол после определенного времени экспрессии. Степень неправильной локализации также зависела от типа клеток и метода трансфекции. Например, после трансфекции методами электропорации или трансфекции на основе липидов (см. Материалы и методы) экспрессии в течение 4–5 часов было достаточно, чтобы показать неправильную локализацию в клетках CV1. Когда была необходима экспрессия конструкций CAV1, как это было при визуализации CAV1 в живых клетках, было лучше использовать клеточные линии, стабильно экспрессирующие конструкции CAV1.Уровень экспрессии был ниже, и распределение CAV1 в целом соответствовало тому, которое наблюдалось для эндогенного CAV1 в контрольных клетках.

Третья манипуляция сборки CAV1 касается cavin-1, другого важного компонента кавеолярной оболочки. Поскольку нокдаун cavin-1 с помощью siRNA вызывает сопутствующее подавление эндогенного CAV1 (Hill et al., 2008; Hansen et al., 2009; Hayer et al., 2010), siRNA, нацеленная на cavin-1, была трансфицирована в HeLa. клетки, стабильно экспрессирующие CAV1-мономерный RFP (mRFP; HeLa-CAV1-mRFP).Это привело к эффективному нокдауну cavin-1 с лишь частичной потерей экспрессии CAV1-mRFP (). CAV1-mRFP теперь присутствовал в виде однородного пула в плазматической мембране и в цитоплазматических вакуолях, которые можно было окрашивать LysoTracker, маркером для LE / LYS (). Кроме того, центрифугирование экстрактов HeLa-CAV1-mRFP в градиенте скорости сахарозы показало, что нокдаун кавина-1 привел к почти полной потере комплексов 70S CAV1, что согласуется с наблюдаемым перераспределением CAV1-mRFP из кавеолярного в некавеолярный поверхностный пул состоит из комплексов 8S ().По-видимому, CAV1 в вакуолях также присутствует в виде комплексов 8S. Поскольку cavin-1 не нужен для сборки кавеолинового каркаса в комплексе Golgi (Hayer et al., 2010), эффект нокдауна cavin-1, скорее всего, объясняется нестабильностью собранных кавеолярных каркасов в отсутствие кавинов.

Нокдаун Кавин-1. (A) Нокдаун Cavin-1 в клетках HeLa-CAV1-mRFP вызвал почти полное перераспределение собранного 70S-CAV1 в несобранный 8S-CAV1, как было определено центрифугированием в градиенте скорости сахарозы.(B и C) Клетки HeLa-CAV1-mRFP, обработанные контрольной siRNA (B) или siRNA, нацеленной на cavin-1 (C), загружали 100 нМ LysoTracker (зеленый) в течение 1 ч и визуализировали вживую с помощью конфокальной микроскопии. Нокдаун Cavin-1 вызывал потерю кавеолярных пятен в плазматической мембране и накопление CAV1-mRFP в кислых, LysoTracker-положительных органеллах. (B и C, внизу) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. Кляксы и изображения представляют не менее трех независимых экспериментов. Прутки, 10 мкм.

В совокупности результаты показали, что вмешательство в сборку кавеол приводит к появлению несобранного, быстро диффундирующего пула кавеолинов в плазматической мембране, вероятно, представляющих комплексы 8S.Кроме того, CAV1 накапливается в LE / LYS, где он не обнаруживается при нормальных условиях. Истощение холестерина, сверхэкспрессия CAV1 и молчание cavin-1 имели сходные эффекты.

Подкисление необходимо для деградации CAV1

Для определения периода полужизни CAV1 мы использовали метаболическое мечение [ 35 S] Cys / Met и метод отслеживания импульсов. Количество меченого CAV1 определяли в разное время преследования с использованием иммунопреципитации с антителом против CAV1 (N20), SDS-PAGE и авторадиографии.В нормальных условиях эндогенный CAV1 оказался чрезвычайно долгоживущим белком в клетках CV1 и HeLa. Период полураспада был намного больше 36 часов (и не показан). Это согласуется со стабильностью, продемонстрированной для кавеолярных доменов в плазматической мембране клеток (Thomsen et al., 2002; Tagawa et al., 2005). Однако временно сверхэкспрессированный CAV1-HA разлагался с гораздо большей скоростью, и мы могли оценить его период полураспада до 13,6 ч ().

Деградация CAV1 требует подкисления эндосом. (A) Динамика деградации эндогенного CAV1 и временно трансфицированного CAV1-HA в клетках CV1, как определено в эксперименте с отслеживанием импульсов (см. Материалы и методы). t 1/2 CAV1-HA составило 13,6 часа, как определено экспоненциальным приближением к точкам данных из n = 3 независимых эксперимента. Эндогенный CAV1 разлагался намного медленнее ( t 1/2 > 36 часов). (B) Разложение CAV1-HA ингибировалось 0,2 мкМ BafA и 20 мМ NH 4 Cl, которые нейтрализуют закисление эндосом, и 10 мкМ MG132, ингибитором системы убиквитин-протеасома.Планки погрешностей указывают среднее значение ± стандартная ошибка среднего ( n = 3-5 независимых экспериментов). (C) Обработка клеток HeLa-CAV1-mRFP BafA, NH 4 Cl или MG132 вызвала накопление CAV1-mRFP в эндосомных органеллах. Отдельные конфокальные секции живых клеток, фокус на перинуклеарные эндосомы. На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. Прутки, 10 мкм.

Более короткий период полужизни сверхэкспрессированного CAV1-HA позволил нам изучить путь деградации с использованием ингибиторов. Разложение CAV1-HA полностью ингибировалось бафиломицином A 1 (BafA) и NH 4 Cl, которые ингибируют лизосомную деградацию за счет повышения pH просвета ().Ингибитор протеасом MG132 оказывает частичное действие, что согласуется с косвенной ролью, описанной для протеасом в созревании эндосом и лизосомной деградации рецептора EGF (Longva et al., 2002). U18666A и лейпептин практически не влияли на деградацию. В соответствии с профилем ингибитора, клетки HeLa, стабильно экспрессирующие CAV1-mRFP и обработанные BafA, NH 4 Cl или MG132, показали повышенное накопление CAV1-mRFP в эндосомных структурах по сравнению с контрольными клетками (2).Вместе эти данные указывают на то, что CAV1 нацелен на LYS для деградации. Это также происходило в стабильно экспрессирующих клетках с нормальным внутриклеточным распределением CAV1 и лишь слегка сверхэкспрессирующими CAV1-mRFP (рис. S1 B).

CAV1 в эндо / лизосомном пути

Когда CAV1-мономерный Cherry (mCherry) временно коэкспрессировался в клетках CV1 с ​​EGFP-меченными Rab5, Rab7 или Lamp1, колокализация наблюдалась в цитоплазматических вакуолях с использованием конфокальной флуоресцентной микроскопии с использованием конфокальной флуоресцентной микроскопии. ячейки ().Мы провели количественный анализ колокализации на основе изображений, полученных из живых клеток, коэкспрессирующих CAV1-mCherry и эндосомный маркер, меченный GFP. Всего было проанализировано ∼6 × 10 4 эндосом из клеток, экспрессирующих CAV1-mCherry / EGFP-Rab5 ( n = 68), CAV1-mCherry / EGFP-Rab7 ( n = 68) и CAV1-mCherry / Лампа1-EGFP ( n = 43). Результаты показали, что из CAV1-mCherry-положительных эндосомных структур 27% совместно локализованы с EGFP-Rab5, 61% с EGFP-Rab7 и 67% с Lamp1-EGFP (и рис.S2 A). В живых клетках CAV1-mCherry совместно локализуется с EGFP-Rab5 в ограничивающей мембране ранних эндосом (EE), тогда как в LE / LYS, положительных по EGFP-Rab7 или Lamp1-EGFP, он в основном присутствует в просвете. Следовательно, LE / LYS выглядели как красные (CAV1-mCherry) пятна с зеленой (EGFP-Rab7 и Lamp1-EGFP) границей (). Поскольку CAV1 является мембранным белком, он, скорее всего, был изолирован в ILV, заполняющем просвет LE / LYS. Эти результаты показали, что CAV1-mCherry не только достигал ранних эндосомных компартментов, но и продолжал путь деградации эндоцитарного пути с накоплением в ILV LE / LYS.

CAV1 и cavin-1 в эндосомном пути. (A – C) CAV1-mCherry локализован на Rab5-положительном EE и на Rab7- и Lamp1-положительном LE / LYS. Отдельные конфокальные срезы фиксированных (A) или живых (B и C) клеток получали через 12 ч после трансфекции. (внизу) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. (D) Увеличенные изображения отдельных органелл. В EE CAV1-mCherry присутствовал в ограничивающих мембранах, а в LE / LYS — в просвете органелл. (E и F) Cavin-1-mCherry локализован на Rab5-положительном EE, но не на Rab7-положительном LE.Cavin-1-mCherry коэкспрессировался с GFP-меченными эндосомными производителями и CAV1-HA (не изображен), а изображения были получены через 12 часов после трансфекции из живых клеток с использованием установки эпифлуоресценции. (внизу) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. Стрелки указывают на эндосомные органеллы, указывая на присутствие (A – C и E) или отсутствие (F) совместной локализации между маркерами. (G) Анализ совместной локализации эндосомных структур CAV1-mCherry с эндосомными маркерами. Долю эндосом CAV1-mCherry на клетку, совместно локализующуюся с EGFP-Rab5 ( n = 68 клеток), EGFP-Rab7 ( n = 68 клеток) и Lamp1-EGFP ( n = 43 клетки), определяли как подробно в Материалы и методы (рис.S2 A) из изображений, полученных от живых клеток с использованием установки эпифлуоресценции. На прямоугольных диаграммах показаны медианы, нижний и верхний квартили (линия и прямоугольник), 10-й и 90-й процентили (усы) и выбросы (•). Штанги: (A – C, E и F) 10 мкм; (D) 1 мкм.

Cavin-1 ассоциирует с полностью собранными кавеолярными каркасами в плазматической мембране, но не с биосинтетическими промежуточными продуктами или несобранными формами CAV1 (Hill et al., 2008; Hayer et al., 2010). Поэтому мы использовали cavin-1 в качестве сенсора для оценки состояния сборки CAV1 в эндосомном пути.Когда коэкспрессируется с EGFP-Rab5 и CAV1-HA, cavin-1-mCherry, как было обнаружено, колокализуется с CAV1 в EE, указывая тем самым, что ранний эндосомный CAV1, по крайней мере частично, все еще собирается в кавеолярных каркасах (). Напротив, когда коэкспрессируется с EGFP-Rab7 и CAV1-HA, cavin-1-mCherry не колокализируется с поздним эндосомным маркером, скорее всего потому, что каркасы CAV1 были разобраны до достижения LE / LYS (). Следовательно, разборка кавеолярных каркасов может быть связана с прогрессированием CAV1 в эндолизосомном пути.

Визуализация CAV1 в LE / LYS в фиксированных клетках оказалась проблематичной из-за плохой фиксации этих органелл в клетках CV1 с ​​различными фиксаторами на основе формальдегида (FA). Наиболее отчетливо это наблюдалось при наблюдении за процессом под микроскопом; большая часть Lamp1-EGFP-положительных LE / LYS теряет CAV1-mCherry после добавления FA (рис. S2B и видео 2). Просветной CAV1-mCherry был выпущен в окружающую цитоплазму, оставив после себя пустой Lamp1-EGFP, помеченный как «призрак».Ограничивающие мембраны LE / LYS, по-видимому, были закреплены должным образом, но содержимое многих вакуолей было потеряно. Как следствие, мы избегали фиксации при визуализации поздних компартментов эндоцитарного пути и вместо этого использовали микроскопию живых клеток с флуоресцентно мечеными белками и грузом.

CAV1 в кислом просвете LE / LYS

CAV1 встроен в цитоплазматический листок мембран, причем оба конца N и C обращены к цитозолю. Чтобы разложиться, он должен подвергаться воздействию гидролаз в просвете LE / LYS.По аналогии с деградацией рецепторов клеточной поверхности это может происходить путем включения во внутрь отрастающих пузырьков во время образования ILV с последующим лизисом или деградацией ILV в LYS.

Чтобы проверить, подвергался ли CAV1 воздействию кислого просвета LE / LYS, мы использовали разницу в чувствительности pH флуоресценции mCherry и EGFP. Хотя флуоресценция EGFP гасится при значениях pH <6 (pK a 6,0), mCherry остается ярко флуоресцентной в кислой среде вплоть до pH 4.5 (pK a <4,5; Kneen et al., 1998; Shaner et al., 2004; Shaner et al., 2005). Значение pH колеблется от 6,0 до 6,5 в EE и от 5,5 до LE до 4,7 в LYS (Kielian, Cohn, 1982; Zen et al., 1992).

Было показано, что за подкислением эндосом можно следить, используя белковый груз с тандемным тегом, который содержит как EGFP, так и mCherry (Pankiv et al., 2007). Флуоресценция EGFP гасится в LYS, тогда как mCherry — нет. Следуя аналогичной стратегии, мы коэкспрессировали CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry в клетках CV1 и выполнили конфокальную визуализацию живых клеток.Кавеолярные пятна на плазматической мембране и в ограничивающей мембране эндосом были желтыми, как и ожидалось от смешанной флуоресценции, испускаемой CAV1-mEGFP и -mCherry (пунктирная вставка). Диффузное окрашивание плазматической мембраны, представляющей свободный CAV1, также было желтым.

CAV1 подвергается воздействию кислого просвета LE / LYS. (A) CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry совместно локализованы в кавеолярных пятнах плазматической мембраны (пунктирная вставка, контраст скорректирован), но не во многих внутриклеточных органеллах при визуализации вживую.(B) Клетки CV1, экспрессирующие CAV1-mCherry, окрашивали 100 нМ LysoTracker (зеленый) в течение 1 ч и визуализировали вживую для идентификации кислых органелл. Большинство кислых органелл оказались положительными на CAV1-mCherry. (C) Совместная локализация между CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry в эндосомах восстанавливалась обработкой клеток 0,2 мкМ BafA (12 ч), что указывает на кислотное тушение флуоресценции mEGFP. (A – C) Отдельные конфокальные срезы живых клеток. (вверху) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. (D и E) Покадровая визуализация живых клеток клеток CV1, коэкспрессирующих CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry, для мониторинга кислотозависимого тушения флуоресценции CAV1-mEGFP во время созревания эндосомы.(D) Эндосома, изначально положительная для CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry, отслеживалась в течение 42 минут, как показано в E, и профили интенсивности флуоресценции были нанесены на график в зависимости от времени. Флуоресценция CAV1-mEGFP со временем затухала, тогда как флуоресценция CAV1-mCherry была стабильной. Чтобы исключить фотообесцвечивание mEGFP, измеряли и наносили на график общую перинуклеарную флуоресценцию mEGFP (E, синий пунктирный контур; D, профиль интенсивности). Серии покадровой съемки записывались с эпифлуоресцентным освещением с частотой 0,2 Гц. (F) Кадры CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry-положительной эндосомы, отслеживаемые в D (видео 3).Штанги: (A – C) 10 мкм; (E) 5 мкм; (F) 0,5 мкм.

Однако многие цитоплазматические вакуоли имели ярко-красный цвет mCherry, соответствующий избирательному тушению mEGFP (Pankiv et al., 2007). Чтобы проверить, вызвано ли это низким pH, клетки, экспрессирующие CAV1-mCherry, загружали 100 нМ LysoTracker green в течение 1 часа и визуализировали вживую. Большинство, если не все кислые органеллы, помеченные LysoTracker, были положительными на CAV1-mCherry (). Когда клетки, коэкспрессирующие CAV1-mCherry и CAV1-mEGFP, обрабатывали 0,2 мкМ BafA (12 ч) для нейтрализации рН просвета, все вакуоли были флуоресцентными как в каналах mCherry, так и в mEGFP ().Аналогичные результаты были получены при использовании 20 мМ NH 4 Cl (12 ч) вместо BafA (неопубликованные данные).

Поскольку mEGFP и mCherry были помечены на C-конце CAV1, топология диктовала, что они должны находиться внутри ILV. Следовательно, потеря зеленой флуоресценции должна была включать лизис ILV и подвергать внутреннюю часть этих пузырьков воздействию низкого pH. Чтобы проследить этот процесс в отдельных эндосомах, клетки, коэкспрессирующие CAV1-mEGFP и CAV1-mCherry, визуализировали вживую в течение 45 минут с помощью эпифлуоресцентного микроскопа.Было замечено, что многочисленные эндосомы, изначально желтые, теряли свою зеленую флуоресценцию mEGFP со временем, тогда как красная флуоресценция mCherry оставалась постоянной (и видео 3). Важно отметить, что потеря флуоресценции mEGFP не была вызвана фотообесцвечиванием, поскольку общая перинуклеарная флуоресценция mEGFP оставалась постоянной (). Таким образом, использование конструкций CAV1 обеспечило метод отслеживания поздних стадий созревания отдельных эндосом и мультивезикулярных тел в живых клетках.

Вместе наши данные свидетельствуют в пользу модели, в которой CAV1, присутствующий в эндосомах, секвестрируется в ILV.Когда эндосомы созревали и сливались с LYS, он подвергался воздействию кислого просвета и в конечном итоге деградировал. Сверхэкспрессия CAV1 и отсутствие эффективной сборки кавеол усиливали этот процесс, так что CAV1 стал легко обнаруживаемым компонентом в просвете LE / LYS.

CAV1 убиквитинируется, и убиквитинирование необходимо для деградации

Нацеливание мембранных белков на ILV обычно контролируется добавлением убиквитиновых групп к их цитозольному домену (Raiborg and Stenmark, 2009).Чтобы определить, был ли CAV1 убиквитинирован, меченый HA CAV1 был экспрессирован в клетках HEK293 и иммунопреципитирован из экстрактов с использованием антитела против CAV1 (N20). Вестерн-блот-анализ с использованием антитела против НА выявил присутствие множества более медленно мигрирующих видов CAV1 в дополнение к основной полосе CAV1-HA (). Зондирование эквивалентных мембран с помощью антиубиквитина (FK2) для обнаружения убиквитина выявило несколько соответствующих полос ().

CAV1 убиквитинирован. (A) Клетки HEK293 трансфицировали CAV1-HA или CAV1-K * R-HA, и CAV1 иммунопреципитировали с использованием антитела против CAV1 (N20).Зондирование блотов с антителом против убиквитина (FK2) выявило убиквитинированные виды CAV1 в иммунопреципитатах, полученных из клеток, экспрессирующих CAV1-HA дикого типа, но не из клеток, экспрессирующих мутантный лизин-нуль-CAV1-K * R-HA. Миграция стандартов молекулярной массы указывается в килодальтонах. (B) Анализ отслеживания импульсов показал, что оборот CAV1-K * R-HA был замедлен на 47% по сравнению с CAV1 дикого типа (CAV1-HA). Планки погрешностей указывают среднее значение ± стандартное отклонение для трех образцов, собранных за два экспериментальных дня.(C) Окрашивание убиквитином накапливалось и совместно локализовалось с сверхэкспрессированным CAV1-HA в Rab5-положительном EE клеток CV1. (D – F) Накопление убиквитина в EE не наблюдалось в клетках, трансфицированных лизин-нулевым мутантом CAV1-K * R-HA (D), в нетрансфицированных клетках (E) или в клетках, трансфицированных mRFP-Rab5 / EGFP. -Раб7 (F). Показаны единичные конфокальные срезы фиксированных клеток. (C – F, внизу) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой. Прутки, 10 мкм.

Чтобы подтвердить, что CAV1 был убиквитинированным видом, наблюдаемым в экспериментах с понижением, мы сконструировали версию CAV1, которая больше не могла быть убиквитинирована в результате мутации всех 12 лизинов в аргинины (CAV1-K * R; рис.S3 A). При экспрессии в клетках CV1, GFP-меченная форма мутанта легко достигала плазматической мембраны, где ее можно было обнаружить в виде пятен субразрешения, типичных для кавеол (рис. S3 B). Успешная сборка кавеол мутанта была также подтверждена центрифугированием на скорости сахарозы лизатов, полученных из клеток, экспрессирующих GFP- или HA-меченный CAV1-K * R (Fig. S3 C; Hayer et al., 2010). Когда CAV1-K * R-HA использовался в эксперименте с понижением уровня, убиквитинированных видов не наблюдалось, что подтверждает, что CAV1 действительно убиквитинирован.Было также обнаружено, что CAV1 убиквитинируется при иммунопреципитации из лизатов клеток HEK293, коэкспрессирующих CAV1-myc и HA-убиквитин, как в нативных, так и в денатурирующих условиях, чтобы исключить нековалентную ассоциацию конъюгатов убиквитина (фиг. S3 D).

Чтобы определить, присутствует ли убиквитинированный CAV1 в EE, клетки CV1, коэкспрессирующие CAV1-HA и EGFP-Rab5, окрашивали как антителами против CAV1 (N20), так и против убиквитина (FK2). Конфокальная микроскопия выявила обширную совместную локализацию между CAV1 и убиквитином в Rab5-положительных EE ().Поразительно, что накопление сигнала против убиквитина наблюдалось только тогда, когда клетки были трансфицированы CAV1 дикого типа, но не мутантом CAV1-K * R () с нулевым лизином. Нетрансфицированные клетки или клетки, трансфицированные только меченым Rab5 / Rab7, демонстрировали типичное гомогенное распределение убиквитина в цитоплазме и ядре (). Следовательно, убиквитинированный CAV1 обнаруживался только тогда, когда большое количество CAV1 присутствовало в эндолизосомном пути.

Для непосредственного рассмотрения значимости убиквитинирования для деградации CAV1 мы проверили, влияет ли лизин-нулевая мутация на кинетику деградации CAV1.Действительно, когда CAV1-K * R-HA тестировался в экспериментах с импульсной погоней, деградация мутанта была снижена на 47% по сравнению с CAV1-HA дикого типа, демонстрируя, что убиквитинирование важно для деградации CAV1 ().

В совокупности результаты показали, что CAV1 убиквитинирован. В клетках, сверхэкспрессирующих CAV1, убиквитинированные формы накапливаются в Rab5-положительных EE. Убиквитинирование было особенно необходимо для деградации CAV1, потому что мутант CAV1, который не мог быть убиквитинирован, демонстрировал ослабленную кинетику деградации.

Компоненты убиквитинирования и ESCRT Hrs и Tsg101 необходимы для нацеливания ILV на CAV1

Если убиквитинирование требовалось для нацеливания ILV на CAV1, ожидалось, что истощение свободного убиквитина путем обработки клеток ингибитором протеасом MG132 предотвратит нацеливание на ILV и экспозицию CAV1 в кислый просвет эндосом. Чтобы устранить эту возможность, мы изменили нашу стратегию двойного тегирования, при которой CAV1-mCherry, но не CAV1-mEGFP, был виден в кислых LE / LYS, построив CAV1, помеченный mEGFP и mCherry на его конце C (тандемный тег, CAV1-тандем).Хотя тандемная метка не влияет на субклеточную локализацию CAV1, она обеспечивает более высокую интенсивность флуоресценции и более постоянное соотношение сигнала GFP / mCherry, чем совместная экспрессия индивидуально меченой CAV1. Присутствие красных эндосом использовалось в качестве считывания для успешного нацеливания тандема CAV1 на кислый просвет эндосом.

Как и ожидалось, многие эндосомы были красными в контрольных клетках, тогда как эндосомы были красными и зелеными в клетках, обработанных NH 4 Cl (). Поразительно, что в присутствии 10 мкМ MG132 (12 ч) большинство эндосом оставались как красными, так и зелеными, что согласуется с убиквитин- или протеасомозависимым включением CAV1 в ВЛК во время позднего созревания эндосом (), но также и со сниженной скоростью. деградации CAV1, наблюдаемой в присутствии MG132 ().

Убиквитинирование CAV1 и механизм ESCRT необходимы для нацеливания на ILV. (A) В клетках CV1, экспрессирующих CAV1 с mEGFP-mCherry (тандем), флуоресценция mCherry не перекрывалась с флуоресценцией mEGFP во многих эндосомных структурах, что указывает на кислотозависимое тушение mEGFP в LE / LYS (). (B и C) Обработка клеток 20 мМ NH 4 Cl (B) или 10 мкМ MG132 (C) восстанавливала флуоресценцию mEGFP, что согласуется с нейтрализованным pH просвета и дефектами нацеливания на ILV, соответственно.Клетки HeLa, предварительно обработанные в течение 48 часов контрольной siRNA (D) или siRNA, нацеленной на компоненты ESCRT Hrs и Tsg101 (E; двойной нокдаун), трансфицировали тандемом CAV1 в течение 12 часов и просматривали вживую с помощью конфокальной микроскопии. Присутствие желтых эндосом после нокдауна Hrs и Tsg101 показало участие аппарата ESCRT в нацеливании ILV на CAV1. (F) Вестерн-блоттинг показал успешный нокдаун Hrs и Tsg101. (A – E) Показаны отдельные конфокальные срезы живых клеток. (внизу) На вставках показаны увеличенные области, выделенные рамкой.Прутки, 10 мкм.

Сходная стратегия была применена для проверки участия аппарата ESCRT в нацеливании ILV на CAV1. Клетки HeLa, предварительно обработанные миРНК (48 ч), нацеленные на компоненты ESCRT Hrs и Tsg101 или контрольную миРНК, трансфицировали тандемом CAV1, и эндосомальный CAV1 визуализировали с помощью конфокальной микроскопии. Первоначальные эксперименты, в которых индивидуально подавляли Hrs или Tsg101, не дали сильного фенотипа (неопубликованные данные). Однако после двойного нокдауна и Hrs, и Tsg101, серьезные дефекты в нацеливании ILV на CAV1-тандем наблюдались с CAV1-тандем-положительными эндосомами, оставшимися как красными, так и зелеными ().Вместе не только убиквитинируется CAV1 и убиквитинирование необходимо для его деградации, но убиквитин служит сигналом сортировки для нацеливания ILV на CAV1, процесса, который требует компонентов ESCRT Hrs и Tsg101.

Обсуждение

Кавеолы ​​в плазматической мембране представляют собой стабильные структуры, а CAV1, соответственно, является чрезвычайно долгоживущим белком. Однако, когда сборка кавеол была нарушена, мы обнаружили, что доля несобранного CAV1 в клетках была увеличена, и оборот резко увеличился.Белок был нацелен на эндосомы, убиквитинирован, секвестрирован в ILV с помощью аппарата ESCRT и разложился в LYS (). Результаты позволили нам объяснить наблюдения, касающиеся жизненного цикла CAV1 и природы богатых кавеолином вакуолей, называемых кавеосомами, ранее описанных после сверхэкспрессии CAV1 нашей группой.

Модель разборки кавеол и деградации CAV1. Разборка включает высвобождение кавина-1 из интактной кавеолы ​​с последующей диссоциацией дестабилизированного кавеолярного каркаса 70S на кавеолярные комплексы 8S.Это может происходить в EE после кавеолярного эндоцитоза или в плазматической мембране (PM), откуда разобранный CAV1 доставляется в EE в качестве эндоцитарного груза. Несобранный CAV1 может также возникать, когда сборка кавеолярных каркасов в Golgi нарушена и CAV1 поступает в плазматическую мембрану в форме 8S комплексов. В эндосомах убиквитинированные кавеолярные комплексы 8S распознаются аппаратом ESCRT и направляются на ILV, обращенный к просвету. После лизиса ILV в LYS, CAV1 подвергается воздействию кислого вакуолярного pH и разрушается протеолитическим расщеплением.

Одним из возмущений, используемых для увеличения оборота CAV1, действительно была его избыточная экспрессия. По-видимому, переизбыток этого кавеолярного компонента привел к насыщению сборки кавеол в комплексе Гольджи, образованию быстро диффундирующего пула свободного CAV1 в плазматической мембране и падению t 1/2 с> 36 часов для эндогенного до 13,6 ч для сверхэкспрессированного CAV1. Молчание CAVIN-1 привело к аналогичному эффекту с почти полной потерей 70S кавеолярных каркасов в клетке, накоплением промежуточных продуктов 8S кавеолина и, опять же, диффузным распределением CAV1 в плазматической мембране.Снижение клеточного холестерина с использованием U18666A также резко увеличивало уровень свободного, быстро диффундирующего CAV1 в плазматическую мембрану за счет кавеол. Холестерин необходим для сборки кавеол в Гольджи; он связывается непосредственно с кавеолинами и служит важным компонентом микродомена мембран, подобных липидным плотам (Murata et al., 1995).

Помимо увеличения свободного CAV1 в плазматической мембране, эти три условия вызывали накопление CAV1 в Lamp1-положительных эндолизосомных вакуолях в цитоплазме.Это указывает на то, что избыток несобранного CAV1 нацелен на деградационную ветвь пути эндоцитоза. Ингибирование NH 4 Cl и BafA подтвердило, что разложение происходит в LYS.

В нормальных, невозмущенных условиях CAV1 в плазматической мембране локализуется в кавеолах без детектируемого свободного пула. С помощью иммунофлуоресценции и визуализации живых клеток было показано, что некоторое количество CAV1 также находится в EE, где он образует определенные домены (Pol et al., 2000; Pelkmans et al., 2004). Связывание cavin-1 с ранним эндосомным CAV1 указывает на то, что CAV1 в EE обладает, по крайней мере частично, зрелой собранной конформацией.

Непрямая иммунофлуоресценция не показала присутствие эндогенного CAV1 в LE или LYS, возможно, не только из-за его низкой скорости обмена и его низкого содержания в этих органеллах, но также из-за артефакта фиксации, который затрудняет демонстрацию присутствия антигенов. в ILV клеток CV1. Хотя EE были должным образом зафиксированы с использованием различных фиксаторов на основе FA, большинство органелл, содержащих Lamp1, разорвалось во время фиксации и высвободило свое содержимое, включая CAV1, в цитоплазму.Следовательно, для анализа поздних эндосомных компартментов визуализация живых клеток была более надежной, чем иммунофлуоресцентная микроскопия, но могла выполняться только с помеченными формами CAV1 и эндосомными маркерами. В невозмущенных, стабильных клеточных линиях, экспрессирующих флуоресцентно меченый CAV1 на относительно низких уровнях, не наблюдалось окрашивания в LE / LYS. Напротив, временная сверхэкспрессия флуоресцентного CAV1 приводит к быстрому накоплению в Rab5-, Rab7- и Lamp1-положительных органеллах.

Электронная микроскопия с использованием мечения иммунным золотом в клетках HepG2 ранее показала, что эндогенный CAV1 может быть обнаружен в мультивезикулярных тельцах (Botos et al., 2008) и что стимуляция кавеолярного эндоцитоза альбумином увеличивает нацеливание CAV1 на этот компартмент, подтверждая корреляцию между кавеолярным транспортом и лизосомной деградацией CAV1. То, что деградация эндогенного CAV1 происходит в LYS, также подтверждается наблюдениями, что siRNA-опосредованный нокдаун флотилина-1 и кавина-1, а также обработка клеток PDGF вызывает ускоренную деградацию CAV1 и что это чувствительно к ингибиторам лизосомная деградация (Peterson et al., 2003; Hill et al., 2008; Васильева и др., 2009).

Когда CAV1 был сверхэкспрессирован, в EE наблюдался четкий сигнал убиквитина. Без сверхэкспрессии CAV1 или после сверхэкспрессии мутанта по лизину CAV1 такой сигнал отсутствовал. Биохимический анализ подтвердил, что большая часть CAV1, присутствующего в клетках, на самом деле поли- или моноубиквитинирована и что убиквитинирование важно для ускоренной деградации CAV1. Сходным образом истощение свободного убиквитина с помощью MG132 и нокдаун siRNA Hrs и Tsg101 показали, что убиквитин и аппарат ESCRT необходимы для нацеливания CAV1 на ILV.Перед закрытием ILV расщепляемые белки груза обычно деубиквитинируются. Таким образом происходит избирательное нацеливание активированного рецептора EGF и других мембранных белков для разрушения в LYS (Raiborg and Stenmark, 2009). Если рассматривать живые клетки, то CAV1, присутствующий в Rab7- и Lamp1-позитивных LE / LYS, на самом деле в основном локализован в просвете вакуолей, а не в ограничивающей мембране, тогда как в EE его локализация все еще совпадает с Rab5 в ограничивающей мембране. мембрана.

Тушение флуоресценции CAV1-mEGFP в LE / LYS, наблюдаемое в живых клетках, показало, что CAV1 в ILV подвергается воздействию низкого pH.Учитывая топологию мембраны CAV1 и расположение GFP на С-конце, этот сдвиг подразумевает, что защита GFP с помощью мембраны ILV была потеряна и GFP подвергался воздействию pH <6,0. После экспрессии CAV1, меченного mEGFP и mCherry по отдельности или в тандеме, мы могли проследить созревание отдельных эндосом в живых клетках, наблюдая переход от желтой к красной флуоресценции. Такая стратегия двойной метки может быть широко использована в исследованиях образования ILV, подкисления и созревания LE / LYS в живых клетках.

Ранние эксперименты в нашей лаборатории показали, что во время проникновения в CAV1-EGFP-экспрессирующие клетки CV1 входящий SV40 транзитом от плазматической мембраны к ER попадает в богатые CAV1 внутриклеточные органеллы (Pelkmans et al., 2001). Эти органеллы были названы кавеосомами, потому что они, по-видимому, отличаются от нормальных эндосом. Они характеризовались обильным присутствием CAV1-EGFP, они не содержали эндосомальных маркеров, а их рН просвета был нейтральным (Pelkmans et al., 2001).

Впоследствии мы обнаружили, что поступающие вирусы действительно проходят через EE и LE на пути к ER, где и происходит проникновение (неопубликованные данные).Ввиду новых данных SV40 и результатов, представленных в этом исследовании, мы больше не рассматриваем кавеосомы, независимые органеллы. В нормальных условиях мы обнаружили, что эндогенный CAV1 может наблюдаться в EE, но, как правило, не в LE / LYS. Однако при сильной сверхэкспрессии, как это было в наших исследованиях, описывающих кавеосомы, CAV1-EGFP и другие формы CAV1 накапливались в поздних органеллах эндоцитарного пути. Они содержат маркеры ILV и LE / LYS, такие как Rab7 и Lamp1. Это маркеры, которые не тестировались в первоначальных исследованиях кавеосом.

Может быть несколько причин, по которым оригинальные исследования, описывающие кавеосомы (Pelkmans et al., 2001, 2004), пришли к выводу, что pH их просвета является нейтральным. PH органелл, содержащих CAV1, не определялся напрямую, но был выведен из измерений общего pH с использованием SV40 в качестве зонда из клеток в суспензии. Более того, анализ динамики поступления SV40 и эксперименты по вымыванию лекарств теперь показывают, что момент времени, в который измеряли pH с использованием флуоресцентного вируса в качестве pH-зонда, был выбран неудачно, потому что большая часть вируса, возможно, уже достигла ER, т.е. нейтральная среда к моменту проведения измерений (неопубликованные данные).

Электронно-микрографические срезы, показывающие структуры со многими кавеолярными доменами, скорее всего, представляют структуры, все еще связанные с плазматической мембраной (Parton and Simons, 2007; Kiss and Botos, 2009). Мы подчеркиваем, что кавеосомы, согласно нашим настоящим данным, скорее всего, являются модифицированными LE / LYS и, следовательно, частью классического пути эндоцитоза. Мы предлагаем больше не использовать термин кавеосома.

В свете наших открытий мы предполагаем, что деградация CAV1 происходит в LE / LYS после включения CAV1 в ILV с помощью комплексов ESCRT, локализованных в EE (). Деградация происходит только в том случае, если CAV1 присутствует в комплексах 8S, потому что интактные кавеолярные каркасы слишком велики для включения в ILV. Более того, чтобы распознаваться аппаратом ESCRT и секвестрироваться после деубиквитинирования в ILV, комплексы 8S должны присутствовать в EE и быть убиквитинированными. Комплексы 8S могут быть образованы следующими различными способами: (а) кавеолярные каркасы в плазматической мембране могут быть дестабилизированы, например.g., потерей кавина-1 с последующей диссоциацией на комплексы 8S и эндоцитозом этих комплексов в EE. (b) Сборка кавеолярных каркасов в комплексе Гольджи может быть нарушена, например, из-за сверхэкспрессии CAV1 или недостатка холестерина, что приводит к прибытию несобранных, свободно диффундирующих комплексов 8S к плазматической мембране с последующим эндоцитозом и доставкой в ​​EE. . (c) В отсутствие кавина-1 кавеолярные каркасы все еще могут быть собраны в комплекс Гольджи, но, будучи нестабильными, они диссоциируют на комплексы 8S вскоре после встраивания в плазматическую мембрану (Hayer et al., 2010). (d) Диссоциация кавеолярных каркасов может также происходить в EE после эндоцитоза интактных кавеолярных доменов в форме кавеолярных пузырьков и их слияния с EE. В этом случае потеря кавина-1 может привести к диссоциации эндосомных кавеолярных каркасов. Деградация кавеол — это поэтапный процесс, в котором задействовано множество компонентов. Остается определить, как разборка высокостабильного, долгоживущего кавеолярного домена регулируется убиквитинированием, кавинами и др. Клеточными факторами.

Материалы и методы

Культура клеток и трансфекции

Клетки CV1 и HeLa (Американская коллекция типовых культур) выращивали в DME (Invitrogen) с добавлением 10% FCS и 5% Glutamax (Invitrogen). Клетки HeLa, стабильно экспрессирующие CAV1-mRFP (Tagawa et al., 2005), поддерживались как клетки HeLa, но в присутствии 0,5 мг / мл G418. Клетки HEK293 выращивали как CV1, но в присутствии пенициллина / стрептомицина. Клетки CV1, стабильно экспрессирующие CAV1-mEGFP (CV1-CAV1-mEGFP), были получены с использованием родительской клеточной линии CV1-Flp-In (Invitrogen) и плазмиды CAV1-mEGFP / FRT / TO, следуя протоколу производителя для рекомбинации Flp-In ( Invitrogen).Аналогичным образом были созданы клетки CV1-GFP-GPI с использованием плазмиды GFP-GPI / FRT / TO. Обе рекомбинантные клеточные линии выращивали как клетки CV1, но в присутствии 150 мкг / мл гигромицина. Клетки CV1 трансфицировали кДНК электропорацией в соответствии с рекомендациями производителя (Nucleofector kit V; программа A24; Lonza), а клетки HEK293 трансфицировали кальциево-фосфатным методом.

Плазмидные конструкции

CAV1-mEGFP, CAV1-mCherry, CAV1-HA и cavin-1-mEGFP были описаны ранее (Hayer et al., 2010). Для создания CAV1-mEGFP / FRT / TO кодирующую последовательность для CAV1-mEGFP вырезали из плазмиды CAV1-mEGFP как фрагмент HindIII-NotI и лигировали с соответствующим образом расщепленным pcDNA5 / FRT / TO (Invitrogen). GFP-GPI / FRT / TO был создан путем субклонирования GFP-GPI из EGFP-GL-GPI (Keller et al., 2001) в pcDNA5 / FRT / TO (Invitrogen) в виде фрагмента HindIII-NotI. CAV1-тандем был сконструирован сначала путем ПЦР-амплификации mEGFP, фланкированного сайтами BamHI и AgeI, с использованием праймеров (смысловой) 5′-ATGGATCCAGTGAGCAAGGCGAGGAGC-3 ‘и (антисмысловой) 5′-ATACCGGTTTTGTACAGCTCGTCCATGCCAVI-3’ и расщепления CAMI в AgeI-CAMI. mCherry (основа pcDNA5 / FRT / TO), в результате чего получается CAV1-mEGFP-mCherry (CAV1-тандем).КДНК, кодирующая мутант CAV1 со всеми 12 лизинами, мутированными в аргинины (CAV1-K * R), была синтезирована GENEART AG в виде последовательности, фланкированной сайтами HindIII-BamHI и C-концевой меткой HA, за которой следует сайт NotI. Лигирование расщепленного HindIII-NotI- или HindIII-BamHI фрагмента в соответствующим образом расщепленные фрагменты основной цепи pmEGFP-N1 давало CAV1-K * R-HA или CAV1-K * R-mEGFP, соответственно. Cavin-1-mCherry был создан на основе cavin-1-mEGFP путем замены mEGFP на mCherry в виде фрагмента AgeI-BsrGI. EGFP-Rab5 был предоставлен M.Zerial (Институт молекулярной клеточной биологии и генетики им. Макса Планка, Дрезден, Германия), EGFP-Rab7 и Lamp1-EGFP были предоставлены Дж. Грюнбергом (Женевский университет, Женева, Швейцария), HA-убиквитин предоставлен П. Де Камилли. (Медицинская школа Йельского университета, Нью-Хейвен, Коннектикут), а CAV1-myc был предоставлен Дж. Пессином (Медицинский колледж Альберта Эйнштейна, Нью-Йорк, штат Нью-Йорк). mRFP-Rab5 был описан ранее (Vonderheit and Helenius, 2005). Плазмидные конструкции, созданные в этом исследовании, будут доступны через Addgene после публикации.

Антитела и другие реагенты

Rabbit pAb anti-CAV1 (N20; sc-894), мышиное mAb против LAMP1 (sc-20011) и мышиное mAb против c-myc (9E10; sc-40) были получены из Santa Cruz Biotechnology, Inc., кроличьи pAb против PTRF (полимераза I и фактор высвобождения транскрипта; cavin-1) от Abcam (ab48824), кроличьи pAb против гигантина (PRB-114C) и mAb против HA от Covance (MMS- 101P), mAb против Hrs от Sigma-Aldrich (6D11; WH0009146M1), mAb против Tsg101 от Axxora (4A10; NB200-112), mAb против β-актина мыши от Sigma-Aldrich (AC-15; A1978), и мышиные mAb против убиквитина от Enzo Life Sciences, Inc.(FK2; BML-PW8810-0500). Кроличий анти-калнексин производился самостоятельно. Вторичные антитела для иммунофлуоресценции, конъюгированные с Alexa Fluor, и зеленый LysoTracker были получены от Invitrogen.

Центрифугирование в градиенте скорости

Центрифугирование сахарозы в градиенте скорости выполняли, как описано ранее (Hayer et al., 2010). Вкратце, клетки солюбилизировали при 25 ° C в 0,5% Triton X-100 (TX100) в TNE (20 мМ Tris-HCl, pH 7,4, 100 мМ NaCl и 5 мМ EDTA) с добавлением коктейля из комплексных ингибиторов протеаз (Roche). .Постнуклеарные супернатанты загружали в 10-40% линейные градиенты сахарозы, приготовленные в 0,5% TX100 / TNE, и вращали в роторе (SW55Ti; Beckman Coulter) при 50 000 об / мин (237 020 г ) и 4 ° C в течение 255 мин. Градиентные фракции анализировали SDS-PAGE / вестерн-блоттингом.

RNAi

Олигомеры siRNA, нацеленные на PTRF / cavin-1 (SI04178496), Hrs (SI00288239) и Tsg101 (SI02655184), были приобретены у QIAGEN и трансфицированы в клетки HeLa-CAV1-mRFPe at 10 LipofMAX или HeLa Invitrogen) в соответствии с рекомендациями производителя и как описано ранее (Hayer et al., 2010). Ненаправляющая миРНК (AllStarsNeg; QIAGEN) была использована в качестве контрольной миРНК. Клетки анализировали через 60–72 ч после трансфекции, как указано.

Метаболическое мечение, иммунопреципитация и авторадиография

На образец, 3 × 10 5 клеток, экспрессирующих варианты CAV1, в течение 6 часов после электропорации или нетрансфицированные клетки CV1 сначала голодали в течение 45 минут в DME, не содержащем Cys / Met (Sigma-Aldrich ) и пульс, помеченный в течение 1 или 4 часов, соответственно, с использованием 0,2 мКи / мл [ 35 S] Cys / Met Promix (NEG772007; PerkinElmer) в среде DMEM, в остальном дефицитной по Cys / Met.Клетки промывали и прогоняли в полной среде (DMEM, 10% FCS и 1% глутамакс) с добавлением 5 мМ Cys, 5 мМ Met, 50 мМ Hepes, pH 7,4 и 1 × пенициллин / стрептомицин. Для лечения лекарственными препаратами клетки CV1, экспрессирующие CAV1-HA, подвергали импульсной метке в течение 1 часа и преследовали в течение 1 часа перед добавлением лекарств (10 мМ лейпептин, 0,2 мкМ BafA в ДМСО, 20 мМ NH 4 Cl, 5 мкг / мл U18666A, и 10 мкМ MG132 в ДМСО), чтобы гарантировать, что лекарства не препятствуют доставке меченого CAV1 к плазматической мембране. Клетки, за которыми гнались в течение указанного времени (всего 15 часов для лечения лекарствами и CAV1-K * R-HA), солюбилизировали в 500 мкл буфера RIPA (50 мМ трис-HCl, pH 7.4, 150 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1% TX100, 1% дезоксихолата натрия и 0,1% SDS) с добавлением коктейля полного ингибитора протеазы (Roche) при 4 ° C. Для иммунопреципитации лизаты инкубировали 2 часа или в течение ночи при 4 ° C с 2 мкг антитела против CAV1 (N20), и комплексы выделяли с протеином G-сефарозой (GE Healthcare). Иммунопреципитаты промывали четыре раза с использованием буфера RIPA, элюировали кипячением в буфере для образцов SDS и разделяли с помощью SDS-PAGE. Меченый белок визуализировали с помощью фосфорно-визуализатора (STORM; MDS Analytical Technologies), а полосы количественно определяли с помощью ImageJ (Национальные институты здравоохранения).

Нативные и денатурирующие иммунопреципитации для обнаружения убиквитинированных CAV1

Клетки HEK293 трансфицировали CAV1-HA, CAV1-K * R-HA, пустым вектором или котрансфицировали CAV1-myc и HA-убиквитином (Ca 3 PO 4 ) 2 метод. Через 24 часа клетки соскребали в PBS, осаждали и солюбилизировали в 250 мкл буфера для иммунопреципитации (150 мМ KCl, 50 мМ Трис, pH 7,4, 5 мМ MgCl 2 , 1% TX100, 5% глицерин и 2 мМ β -меркаптоэтанол с добавлением коктейля полного ингибитора протеазы).Для денатурирующих иммунопреципитации экстракты, приготовленные в 100 мкл буфера для иммунопреципитации, сначала кипятили в присутствии 1% SDS в течение 5 минут, а затем разбавляли 1:10 с использованием буфера для иммунопреципитации, содержащего 1 мг / мл BSA, с получением конечной концентрации 0,1% SDS. Лизаты центрифугировали при 15 800 г в течение 10 мин при 4 ° C, супернатанты инкубировали с 2 мкг анти-CAV1 (N20) в течение 1,5 ч при 4 ° C и иммунокомплексы осаждали с использованием протеина G-сефарозы. 500 мкг белка в 250 мкл или 1 мл конечного объема использовали для нативных или денатурирующих иммунопреципитатов соответственно.Иммунопреципитаты разделяли с помощью SDS-PAGE и анализировали вестерн-блоттингом.

Иммунофлуоресцентная визуализация

Клетки, выращенные на покровных стеклах, фиксировали с использованием 4% FA в PBS. Клетки были пермеабилизированы с использованием 0,05% сапонина и 1% BSA в PBS и инкубированы с соответствующими первичными (1: 500) и вторичными (1: 1000) антителами, а покровные стекла были помещены на предметные стекла с использованием Immumount (Thermo Fisher Scientific). Визуализацию проводили на системе инвертированного конфокального микроскопа (LSM 510 Meta; Carl Zeiss, Inc.) с объективом 100 × 1,4 NA.

FRAP

Для экспериментов с FRAP использовали либо необработанные клетки CV1-CAV1-mEGFP, либо клетки, обработанные 5 мкг / мл U18666A (16 ч), либо клетки CV1-GFP-GPI. Покровные стекла с клетками переносили в специальную камеру для покровных стекол металлического микроскопа в CO 2 -независимой среде (Invitrogen) с добавлением 10% FCS. Анализ FRAP проводился при 37 ° C на системе инвертированного конфокального микроскопа (LSM 510 Meta), оснащенной предметным столиком с регулируемой температурой и 63 × 1.4 Цель НС. Определенная представляющая интерес область (4 × 4 мкм) была обесцвечена с использованием линии 488 нм 30 мВт Ar-лазера при высокой интенсивности лазера (100% мощность, 100% пропускание и 30 итераций), и восстановление флуоресценции регистрировалось с помощью сканирование при низкой интенсивности лазера (мощность 100% и пропускание 10%). Изображения были получены в виде 12-битных файлов LSM с разрешением 512 × 512 пикселей / кадр и боковым разрешением 0,14 мкм / пиксель. Серии изображений с небольшим или отсутствующим видимым движением ячеек были импортированы в ImageJ и автоматически выровнены с помощью плагина TurboReg (http: // bigwww.epfl.ch/thevenaz/turboreg/; Thévenaz et al., 1998). Среднюю интенсивность флуоресценции интересующей области определяли после вычитания фона и нормализации, как описано ранее (Phair and Misteli, 2000).

Флуоресцентная визуализация живых клеток

Клетки CV1, экспрессирующие конструкции с флуоресцентной меткой и высеянные на 18-миллиметровые покровные стекла, переносили в специальную камеру для покровного стекла для металлического микроскопа в CO 2 -независимой среде (Invitrogen) с добавлением 10% FCS.Покадровую визуализацию TIR и эпифлуоресценцию выполняли на микроскопе (IX71; Olympus), оборудованном камерой (IMAGO QE; TILL Photonics), двойным конденсатором (TIR / EPI; TILL Photonics), лазером ArKr (Spectra Physics), акустооптическим настраиваемые фильтры (Optoelectronics, Inc.), полихромный источник монохроматического света IV (TILL Photonics), светоделитель с двойным обзором (Optical Insights) на пути испускаемого света, объектив с числовой апертурой 60 × 1,45 и инкубационная камера с регулируемой температурой , и с помощью программного обеспечения MetaMorph (MDS Analytical Technologies).Для TIR-освещения CAV1-mEGFP использовалась лазерная линия с длиной волны 488 нм, а глубина исчезающего поля регулировалась таким образом, чтобы освещались как вентральная клеточная поверхность, так и части комплекса Гольджи. Для эпииллюминации монохроматор использовался на 488 и 568 нм с разделителем луча на пути обнаружения света, чтобы избежать перекрестных помех между сигналами mEGFP и mCherry. Конфокальная визуализация живых клеток выполнялась на системе (LSM 510 Meta), оснащенной объективом 100 × 1,4 NA и столиком с регулируемой температурой.

Анализ колокализации

Изображения были получены от живых клеток, экспрессирующих CAV1-mCherry и EGFP-меченные эндосомные маркеры, с использованием вышеупомянутой системы (IX71; Olympus) с использованием монохроматического источника света (освещение EPI), объектива 60 × 1,45 NA и колесо фильтра на пути излучения света. Специально написанная процедура анализа, реализованная в MATLAB (MathWorks), использовалась для обнаружения эндосомных структур и определения перекрытия (Gupta et al., 2009). Всего было проанализировано около 6 × 10 4 эндосом из n = 68 клеток для CAV1-mCherry / Rab5-EGFP, n = 68 клеток для CAV1-mCherry / Rab7-EGFP и n = 43 клеток. для CAV1-mCherry / Lamp1-EGFP.

Дополнительный материал онлайн

На фиг. S1 показаны уровни экспрессии CAV1-mRFP и CAV1-mEGFP, стабильно трансфицированных в клетках HeLa и CV1, соответственно, по сравнению с эндогенным CAV1. Оба слитых белка были эффективно включены в 8S / 70S-эквивалентные кавеолярные комплексы. Фиг. S1 также показывает, что накопление CAV1 в эндосомальных органеллах при сверхэкспрессии не может быть обращено ко-гиперэкспрессией cavin-1. Фиг. S2 иллюстрирует используемый метод автоматического анализа колокализации и показывает, как CAV1-mCherry в просвете LE / LYS, но не мембранный маркер LE / LYS Lamp1-EGFP, был потерян во время фиксации FA.Фиг. S3 описывает и характеризует нулевой по лизину мутант CAV1 (CAV1-K * R), показывая, что мутант эффективно включался в 8S / 70S-эквивалентные кавеолярные комплексы при экспрессии в клетках CV1 и достигал плазматической мембраны, где он локализуется в кавеолярных пятнах. На фиг. S3 также показаны иммунопреципитации CAV1, проведенные в денатурирующих условиях, подтверждая, что CAV1 убиквитинирован. Видео 1 показывает, что в клетках, предварительно обработанных U18666A, вновь синтезированный CAV1-mEGFP достиг плазматической мембраны в разобранном виде.Видео 2 показывает, что в LE / LYS просвет CAV1-mCherry был потерян вскоре после добавления фиксатора FA, тогда как Lamp1-EGFP в ограничивающих мембранах был должным образом зафиксирован. В видео 3 наша стратегия двойного тега использовалась для отслеживания нацеливания тандема CAV1 на кислый просвет отдельных созревающих эндосом. Дополнительные онлайн-материалы доступны по адресу http://www.jcb.org/cgi/content/full/jcb.201003086/DC1.

Хэган, Томас [WorldCat Identities]

Наиболее распространенные произведения о Томас Хэган

более меньше

Наиболее распространенные работы автора Томас Хэган

Убийца Малькольма Икса ( Визуальный )
3 изданий опубликовано в 1980 г. в английский и проводится 237 член WorldCat библиотеки по всему миру
Этот сериал о Малкольме Икс содержит первое телеинтервью с единственным признанным убийцей Малкольма Икс.В 1981 г. В интимном разговоре с Тони Брауном из камеры Талмадж Хайер объясняет свои мотивы и сообщников, а также то, что произошло день, когда Малькольм Икс был убит 21 февраля 1965 года в Одюбонском бальном зале в Нью-Йорке. Смерть Малькольма Икса: другие голоса ( Визуальный )
3 изданий опубликовано в 1980 г. в английский и проводится 236 Член WorldCat библиотеки по всему миру
Расследует убийство лидера афроамериканцев Малкольма Икса в 1965 году.Включает интервью с Талмаджем Хайером, одним из трех мужчин. быть признанным виновным в убийстве. Хайер утверждает, что двое других осужденных вместе с ним мужчин не участвовали и что он хочет дело возобновлено. Хайер подробно излагает свою историю убийства. Я не убивал Малькольма Икса ( Визуальный )
2 изданий опубликовано в 1985 г. в английский и проводится 236 Член WorldCat библиотеки по всему миру
Тони Браун берет интервью у Талмаджа Хейера, человека, который вместе с Норманом Батлером и Томасом Джонсоном был осужден за убийство Малькольм Икс.Хайер утверждает, что к убийству причастны и другие лица, а Батлер и Джонсон невиновны. Журналистка Питер Голдман обсуждает полицейское расследование и другие события после смерти Малкольма Икса. Журнал Тони Брауна ( Визуальный )
1 издание опубликовано в 1981 г. в английский и проводится 193 член WorldCat библиотеки по всему миру
В этом выпуске журнала Тони Брауна 1981 года обсуждается убийство Малкольма Икса. Идентификация маркеров и механизмов инфекции и иммунитета с помощью Томас Хэган ( )
1 издание опубликовано в 2015 г. в английский и проводится 18 член WorldCat библиотеки по всему миру
Успешный иммунный ответ на инфекцию включает скоординированные взаимодействия между множеством типов клеток, расположенных в нескольких ткани в организме.В результате очень сложной природы этой биологической системы многие механизмы, участвующие в формирование иммунных ответов, особенно на молекулярном уровне, остается неизвестным. Последние достижения в области высокопроизводительных технологий, наряду с разработкой вычислительных инструментов для интеграции различных типов данных и построения всеобъемлющих моделей биологических ответы, позволяют лучше понять эти молекулярные механизмы, чем когда-либо прежде.Подробности этой диссертации подход системной биологии для определения надежных молекулярных сигнатур иммунного ответа на вакцинацию и инфекцию и использование этих сигнатур для прогнозирования реакции на вакцинацию и улучшения понимания молекулярных процессов, лежащих в основе иммунная система. В главе 1 представлен обзор области системной вакцинологии, в которой используются подходы системной биологии. для изучения ответа на вакцину.В главе 2 описывается разработка прогнозного классификатора ответа на вакцину против гриппа, способного различения респондентов и неответчиков на вакцинацию путем выявления различения транскрипционных подписи после вакцинации. В главе 3 анализ иммунного ответа на вакцину против гриппа расширен, чтобы изучить возрастную зависимость. изменения в ответе, характерные черты продолжительности ответа и регуляция транскрипции после вакцинации с помощью микроРНК.Глава 4 представляет интегрированный транскрипционный и метаболический анализ дендритных клеток, важных клеток врожденного иммунитета, стимулированных in vitro с LPS, бактериальным эндотоксином, который стимулирует иммунный ответ на инфекцию. Наконец, в главе 5 обсуждается потенциальное воздействие системной биологии и прогнозного анализа использования и разработки вакцин, а также будущих направлений и проблем для это поле Стенограммы судебного процесса по делу об убийстве Малкольма Икса: The People of the State of New York v.Томас Хаган, Томас 15X Джонсон, и Norman 3X Butler от Томас Хэган ( Книга )
2 изданий опубликовано в 1993 г. в английский и проводится 15 член WorldCat библиотеки по всему миру
Цены на основные средства: теория рыночного равновесия в условиях риска по Томас Хэган ( )
3 изданий опубликовано между 2004 г. а также 2013 в Немецкий и английский и проводится 6 член WorldCat библиотеки по всему миру
Norddeutsche Ratsverfassung vs.Süddeutsche Ratsverfassung. Ein kritischer Vergleich автор: Томас Хэган ( )
2 изданий опубликовано между 2004 г. а также 2014 г. в Немецкий и проводится 5 член WorldCat библиотеки по всему миру
Заставить UNIX и Windows NT разговаривать Марк Надельсон ( Книга )
2 изданий опубликовано в 2000 г. в английский и проводится 4 член WorldCat библиотеки по всему миру
Projetkmanagement — Vorgehensweise bei Aufbau und Einführung der Prozesskostenrechnung, автор: Томас Хэган ( )
1 издание опубликовано в 2009 г. в Немецкий и проводится 3 член WorldCat библиотеки по всему миру
Объекты C ++ для взаимодействия UNIX и WinNT Марк Надельсон ( Книга )
2 изданий опубликовано в 2000 г. в английский и проводится 3 член WorldCat библиотеки по всему миру
C [plus plus] объекты для взаимодействия UNIX и WinNT с помощью Марк Надельсон ( Книга )
3 изданий опубликовано в 2000 г. в английский и проводится 2 член WorldCat библиотеки по всему миру
X-ploitation ( Визуальный )
2 изданий опубликовано в 1992 г. в английский и проводится 2 член WorldCat библиотеки по всему миру
С начала съемок фильма «Малкольм Икс» # x9D; фильм Warner Brothers, который скоро будет выпущен, споры по поводу Режиссер обращается с убитым черным лидером, а также продвигает его фильм.Директор Среди критиков Спайка Ли есть чернокожие, которые считают фильм опасным искажением жизни Малкольма и что требование Ли то, что все чернокожие должны взять выходной день на работе и в школе, чтобы посмотреть его фильм, — это постыдная и безответственная коммерческая эксплуатация. Похоже, что три представителя сообщества обсуждают этот вопрос с ведущим Тони Брауном. Что сказал Фаррахан и когда он это сказал? ( Визуальный )
2 изданий опубликовано в 2000 г. в английский и проводится 2 член WorldCat библиотеки по всему миру
СМИ недавно сообщили, что министр Луи Фаррахан признал в интервью по национальному телевидению, что он мог своими словами «замешан» в смерти Малкольма Икса.Было это в первый раз Мин. Фаррахан признал, что его слова могут способствовали смерти Малкольма Икса? Эта программа дает редкую возможность увидеть старинный разговор 15-летней давности между Тони Браун и Мин. Фаррахан о своей роли в убийстве Малкольма Икса Майк Уоллес: тогда и сейчас ( Запись )
1 издание опубликовано в 1990 г. в английский и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру
Вторая половина ретроспективы сорока с лишним лет Уоллеса в качестве телеинтервьюера известных и других.Разные заслушиваются клипы интервью в исполнении Уоллеса. Ernstliche Warnung vor den gefährlichen Folgen vernachlässigter Katarrhe, автор: Томас Хэган ( Книга )
1 издание опубликовано в 1787 г. в Немецкий и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру
Введение в сейсмическую группу с большой апертурой Томас Хэган ( )
1 издание опубликовано в 1970 г. в английский и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру
Я не {u2019} т убивал Малкольма Икса ( Визуальный )
в английский и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру
Журнал Тони Брауна ( Визуальный )
1 издание опубликовано в 1980 г. в английский и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру
Тони Браун берет интервью у Талмаджа Хейера, человека, который вместе с Норманом Батлером и Томасом Джонсоном был осужден за убийство Малькольм Икс.Хайер утверждает, что к убийству причастны и другие лица, а Батлер и Джонсон невиновны. Журналистка Питер Голдман обсуждает полицейское расследование и другие события после смерти Малкольма Икса. ПРОГУЛКА ПО МОРЕ Томас Хэган ( Книга )
1 издание опубликовано в 2020 г. в английский и проводится 1 член WorldCat библиотека по всему миру

более меньше

Уровень аудитории

0 1
Дети Общий Особый

Связанные личности

Связанные предметы

Афроамериканцы Афроамериканцы — Убийство за гражданские права Убийство — Расследование Черные мусульмане C (язык компьютерных программ) C ++ (язык компьютерных программ) Копли, Чарльз Элайджа Мухаммад, Хаган, Томас Интервью Джонсон, Томас — (Томас 15x) Ли, Стэн, Майер, Фрэнк Блэквелл, Психически больной — Заключение и содержание под стражей Психически больные преступники Microsoft Windows NT Драйверы устройств Microsoft Windows NT (компьютерные программы) Ньюфаундленд и Лабрадор Нью-Йорк (штат) Нью-Йорк (штат) — Нью-Йорк Нью-Йорк (штат) — -Нью-Йорк — Гарлем Объектно-ориентированные методы (информатика) Психиатрические больницы — Прием и выписка Шабаз, Бетти Совместимость программного обеспечения Телевизионные журналисты Судебные процессы (убийство) Протоколы судебных заседаний США UNIX (компьютерный файл) Уоллес, Майк, X, Малкольм,

Крышки

Альтернативные названия

Хэган, Том 1940-

Хайер, Талмадж

Хайер, Томас

Томас Хэган Американский убийца

Thomas Hagan US-amerikanischer Attentäter, ein Mörder von Malcolm X

תומאס הייגן

توماس اجان

ߕߐߡߊߛ ߤߍ߲ߜ߭ߊ߲߫ ߊߡߋߙߌߞߌ߬ ߡߐ߰ߝߊ߰ߟߊ߸ ߛߌ߬ߟߡߊ߬ߦߊ ߡߊ߲߬ߕߏ߲ ߛߌ߲߬ߝߏ߲߬ ߞߘߐ߸ ߊ߬ ߣߌ߫ ߡߐ߱ ߡߍ߲ ߞߊ߬ ߡߊߟߑߞߐߟߡ ߌߞߛ ߝߊ߰ ߁߉߆߅ ߟߊ߫

ト ー マ ス ・ ヘ イ ヤ ー

托馬斯 · 哈 甘

языков

Телевизоры, произведенные в США | Список брендов и производителей

Мы составили список U.S. производителей и брендов телевизоров, в том числе 3 компании, которые производят одни из лучших товаров для дома и улицы; Смарт-телевизоры с разрешением 720p, 1080p HD, 4K Ultra HD, водонепроницаемые туалетные столики и кухонные телевизоры, цифровые вывески и многое другое.

Хотя ни одна из этих компаний не производит свои телевизоры из компонентов, на 100% закупаемых в Америке, они все еще собирают их здесь, в США. Есть также несколько подробностей о производителях, а также партнерские ссылки на розничных продавцов, где вы можете получить последние цены, стоимость доставки, отзывы клиентов, специальные предложения и многое другое, если таковые имеются.

Зачем покупать продукцию американского производства? Каждое рабочее место на производстве создает в среднем 3-5 других рабочих мест (подробнее см. Ниже).

  • Element Electronics возглавляет движение по перешориванию, применяя американскую изобретательность в электронике, включая линейку новых светодиодных телевизоров, собранных в США. С телевизорами, которые не уступают лучшим, созданным американскими рабочими, которые могут идти в ногу с любым человеком в мире. Когда вы смотрите Element TV, вы не просто меняете каналы, вы помогаете изменить историю.Это по-американски. Это способ Element.
    Амазонка eBay Target (платные ссылки)

    Основная часть производства компонентов для телевизоров Element Electronics осуществляется за рубежом, хотя окончательная сборка, тестирование и упаковка происходит в Виннсборо, Южная Каролина.

  • Продукция Séura разрабатывается и изготавливается на собственном предприятии. Семья принадлежит и управляется в Грин-Бей, штат Висконсин, Séura стала отмеченным наградами производителем, предлагающим полный и постоянно развивающийся портфель решений для зеркал и телевизоров, применимых во всех помещениях и на открытом воздухе.Отечественное производство в сочетании с его усовершенствованными процессами обеспечивает высочайший уровень качества, который вам необходим, и превосходное обслуживание клиентов, на которое вы рассчитываете.
    Amazon (платные ссылки)

    Телевизоры Séura собираются в Грин-Бей, штат Висконсин, с использованием экранов отечественного производства и электрических компонентов иностранного производства.

  • SunBriteTV проектирует и конструирует единственные в мире проверенные временем телевизоры, которые с нуля созданы специально для использования вне помещений.Эти настоящие всепогодные наружные ЖК-телевизоры со светодиодной подсветкой обеспечивают превосходную яркость, устойчивую к суровому воздействию дождя, грязи, насекомых, экстремальных температур и ультрафиолетовых лучей.
    Амазонка Best Buy (платные ссылки)

    Окончательная сборка SunBriteTV происходит в Северной Каролине или Техасе с использованием в основном компонентов иностранного производства. SunBriteTV также заключает контракты с независимыми установщиками на свои продукты для цифровых вывесок, причем окончательная сборка является обязанностью установщиков.

  • Каждое рабочее место на производстве в США создает в среднем 5 других хорошо оплачиваемых рабочих мест в Америке, таких как американское сырье и оборудование, менеджмент и канцелярская работа, складские работы, отгрузка и погрузочно-разгрузочные работы.Даже простая сборка создает дополнительные рабочие места.

    Покупка продукции американского производства также способствует защите окружающей среды, поскольку производство в США создает меньше загрязнения, чем продукция, произведенная в зарубежных странах с меньшими требованиями.

    Любые марки, отмеченные золотой звездой, указывают на то, что некоторые (или все) их продукты производятся в США с использованием 100% деталей местного производства. Серебряный значок указывает на то, что они собраны в Америке с использованием как отечественных, так и импортных материалов, а бронзовый значок указывает, что они собраны в США.С. использует все импортные материалы.

    Суммарный рейтинг трех вышеуказанных телекомпаний составил 66,6% 100 «Сделано в Америке».

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    *

    © 2011-2021 Компания "Кондиционеры"